羅格列酮對膿毒癥大鼠凝血功能的影響

周靈芝，康婷，高順利(南華大學附屬第一醫院，湖南衡陽421001)

羅格列酮對膿毒癥大鼠凝血功能的影響

周靈芝，康婷，高順利
(南華大學附屬第一醫院，湖南衡陽421001)

摘要:目的觀察膿毒癥大鼠應用羅格列酮后凝血功能指標的變化，為膿毒癥的藥物治療提供新的思路。方法將48只SD大鼠隨機分為A、B、C組各16只，A、B組行盲腸結扎穿孔術建立膿毒癥大鼠模型，C組開腹僅暴露盲腸、不行盲腸結扎穿孔術。術后B組大鼠尾靜脈注射羅格列酮，其余兩組注射等量生理鹽水，觀察各組術后不同時間點的凝血功能指標變化。結果術后24、48 h，A、B組PT、APTT、TT均較C組延長，A組較B組延長更明顯(P均＜0.05) ; A、B組FIB、凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)較C組降低，以A組降低最為顯著(P均＜0.05) ; A、B組纖溶酶原激活物抑制劑-1(PAI-1)較C組明顯升高，A組升高最為顯著(P均＜0.05)。結論羅格列酮能夠改善膿毒癥大鼠凝血功能障礙。

關鍵詞:膿毒癥;羅格列酮;凝血功能;大鼠

膿毒癥患者因炎癥介質的“瀑布樣”釋放導致其凝血系統被激活，纖溶系統被不同程度抑制，血液出現高凝狀態，導致微循環障礙［1，2］。研究發現，羅格列酮可通過抑制炎癥介質的表達而減輕炎癥反應，在膿毒癥及缺血再灌注損傷發生過程中發揮抗炎作用［3，4］。2013年7月～2014年8月，本研究采用盲腸結扎穿孔法制造大鼠膿毒癥模型，觀察羅格列酮對膿毒癥大鼠凝血功能的影響?，F報告如下。

1　材料與方法

1.1動物分組及模型建立SD大鼠48只(南華大學實驗動物部提供)，雌雄不拘，體質量250～300 g，均自由攝食、飲水;將其隨機分為A、B、C組各16只。A、B組行盲腸結扎穿孔術，建立膿毒癥大鼠模型; C組開腹，僅暴露盲腸，不行盲腸結扎穿孔術。術后B組大鼠于造模后0、12 h兩次尾靜脈注射羅格列酮(美國Cayman公司) 0.3 mg/kg。A、C組均注射等量生理鹽水。

1.2凝血功能檢測各組分別計劃于造模后即刻(術后0 h)及羅格列酮或生理鹽水注射后(術后) 12、24、48 h各取大鼠4只，取其頸動脈血，采用STA-R多功能凝血分析儀(法國思達高公司)檢測凝血酶原時間(PT)、活化部分凝血活酶時間(APTT)、纖維蛋白原(FIB)、凝血酶時間(TT)、血漿纖溶酶原激活物抑制劑-1(PAI-1)及抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)。

1.3統計學方法采用SPSS17.0統計軟件。計量資料用珋x±s表示，組間比較采用重復測量方差分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1膿毒癥大鼠造模情況參照Remick［5］關于盲腸結扎穿孔術的手術方式及診斷標準，A、B組各16只大鼠術后12 h均出現攝食減少、發熱癥狀，肛溫平均增加1.5℃，呼吸頻率較術前增加1倍，心率較術前增加50%，白細胞升高1倍以上，膿毒癥大鼠模型均制作成功。C組術后12 h攝食基本正常，體溫、心率、呼吸變化不明顯，白細胞稍有上升，但較術前增加不到1倍。

2.2各組術后凝血指標比較術后0、12 h三組大鼠凝血功能指標比較差異無統計學意義(P＞0.05)。術后24、48 h，A、B組PT、APTT、TT均較C組延長，A組較B組延長更明顯(P均＜0.05) ; A、B 組FIB水平較C組降低(P均＜0.05)，其中以B組降低明顯(P＜0.05) ; A、B組PAI-1水平較C組升高(P均＜0.05)，其中A組升高明顯(P＜0.05) ; A、B組AT-Ⅲ較C組降低(P＜0.05)，以A組降低明顯(P＜0.05)。見表1。

表1　三組大鼠術后不同時間點凝血功能指標比較(±s)

注:與C組同時間點比較，*P＜0.05;與A組同時間點比較，△P＜0.05。

組別　n　PT(s)　APTT(s)　TT(s)　FIB(g/L)　PAI-1(ng/mL)　AT-Ⅲ(%) A 組術后0 h　4　8.12±1.13　30.21±1.29　20.12±2.31　5.13±0.71　30.23±2.39　110.71±5.51術后12 h　4　8.17±1.57　32.23±1.97　22.14±2.57　4.74±0.57　32.23±1.97　106.49±6.91術后24 h　4　15.25±2.31*　41.25±4.11*　33.25±4.11*　2.59±0.71*　57.22±4.19*　82.32±5.24*術后48 h　4　14.54±1.69*　43.63±3.27*　35.64±5.67*　2.24±0.74*　63.71±6.57*　80.70±5.37*B組術后0 h　4　8.63±1.21　31.37±1.47　21.63±2.41　5.61±0.49　31.27±2.46　112.27±5.46術后12 h　4　8.42±1.29　31.32±1.68　21.32±1.89　5.31±0.59　33.45±2.58　108.38±6.65術后24 h　4　12.29±2.04＊△　37.32±3.44＊△　28.31±3.04＊△　3.31±0.54＊△　51.32±5.61＊△　91.73±5.59＊△術后48 h　4　11.38±1.78＊△　38.73±3.56＊△　32.73±4.76＊△　3.76±0.66＊△　59.85±5.64＊△　103.85±6.48＊△C組術后0 h　4　8.39±1.35　30.91±1.83　20.39±2.15　5.30±0.55　30.27±2.43　110.27±6.93術后12 h　4　9.07±1.25　30.09±2.09　20.07±2.19　5.17±0.43　29.69±2.59　113.19±5.29術后24 h　4　8.86±1.43　30.14±1.97　20.86±1.94　5.86±0.71　31.14±2.44　113.41±5.74術后48 h　4　8.39±1.22　31.09±2.12　19.39±2.32　5.13±0.56　30.29±2.52　114.79±7.50

3　討論

膿毒癥時患者機體炎癥介質和抗炎介質之間的平衡被打破，產生大量細胞因子和炎癥介質且不斷循環促進形成“瀑布樣”釋放，這些炎癥介質可激活凝血系統導致凝血功能障礙［2，6］。羅格列酮屬于噻唑烷二酮類，它通過與過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR)γ結合，使PPARγ/RXRα發生空間構象改變，脫離輔抑制因子并結合輔激活因子，再通過與相應靶基因啟動子上的聚對苯二甲酰對苯二胺(PPAE)結合，激活靶基因轉錄，啟動細胞內級聯信號途徑發揮其作用。PPARγ活化后可以通過調控NF-κB和AP-1信號轉導通路，在轉錄水平抑制TNF-α、IL-6的轉錄而發揮抗炎作用［7］。已有研究表明，羅格列酮及其類似物吡格列酮可減輕全身炎癥反應癥狀、減少病變部位炎性細胞浸潤及炎癥因子的表達，從而在膿毒癥、支氣管哮喘、炎癥性腸病等急慢性炎癥反應中發揮抗炎作用［4，8～12］。

本研究中A、B組采用盲腸結扎穿孔術成功構建膿毒癥大鼠模型，術后B組大鼠尾靜脈注射羅格列酮，結果顯示術后12 h膿毒癥大鼠凝血功能尚無明顯異常，術后24、48 h，A、B組PT、APTT、TT均較C組延長，但是A組較B組延長更明顯; A、B組FIB、AT-Ⅲ較C組降低，以A組降低更顯著; A、B組PAI-1較C組明顯升高，以A組升高更顯著。提示盲腸結扎穿孔導致膿毒癥大鼠的凝血功能發生障礙，而羅格列酮對凝血功能障礙有改善作用。

凝血功能障礙是一個非常復雜的病理生理過程，包括炎癥介質釋放、血小板活化聚集、血管內皮損傷等一系列因素參與，其中炎癥介質過度釋放是凝血功能障礙的始動環節并貫穿整個過程［13］。本研究羅格列酮對膿毒癥大鼠凝血功能障礙有改善作用，可能為羅格列酮的臨床應用及膿毒癥的藥物治療提供新的思路。但是，其具體作用機制還有待深入研究。

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(收稿日期:2014-11-26)

通信作者:周靈芝

文章編號:1002-266X(2015)21-0026-02

文獻標志碼:A

中圖分類號:R631.2; R-322

doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2015.21.009