宮頸上皮內瘤變中人乳頭瘤病毒基因分型及感染狀況研究*

西安市第一醫院婦產科(西安 710002)

崔亞杰 張培蓮

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宮頸上皮內瘤變中人乳頭瘤病毒基因分型及感染狀況研究*

西安市第一醫院婦產科(西安 710002)

崔亞杰 張培蓮

目的：探討宮頸上皮內瘤變中人乳頭瘤病毒(HPV)基因分型及感染狀況，為臨床宮頸癌的防治提供理論依據。方法：臨床病理診斷為宮頸上皮內瘤變(CIN)石蠟包埋的組織標本150例為研究對象。采用DNA芯片技術,對其HPV 感染狀況進行回顧性分析。結果：①HPV陽性篩查率在20～39歲年齡段處于較高水平，其中20～29歲年齡段陽性率最高,為26.92%,宮頸上皮內瘤變好發年齡組為30～59歲之間。②CIN I常見的HPV 基因型為：16、58；CIN II為16、31；CIN III 為16、52。結論：HPV易感與CIN高發為不同年齡組,在不同級別CIN 中HPV基因亞型不同。

HPV感染是宮頸癌及宮頸上皮內瘤變發生的必要因素,當自身免疫力低下或HPV持續感染未得到控制時，可能導致宮頸上皮內瘤變和宮頸癌。由于持續感染狀態到發生病變的間隔時間較長，所以盡早篩查發現HPV感染，通過對HPV分型檢測,尤其是高危型檢測,達到對宮頸上皮內瘤變及宮頸癌預防、早期發現和治療的目的。本研究對宮頸上皮內瘤變中HPV基因分型及感染狀況進行回顧性分析,了解HPV 亞型與宮頸上皮內瘤變(CIN)的相關性。

對象與方法

1 對 象 2010 年1月至2013 年12月期間，我科行TCT并HPV篩查病例共2380例,其中臨床病理診斷為宮頸上皮內瘤變的石蠟包埋組織標本150例作為研究對象,包括CINI 30例、CINⅡ60例、CINⅢ 60例。年齡23～71 歲,平均年齡41.06±7.81歲。平均孕次2.28±1.13次。

2 方 法 應用DNA芯片技術。首先通過PCR體外擴增，擴增出23種HPV基因亞型的目標片段,包括8種高危型和5種低危型，然后將擴增產物與分型探針進行DNA反向雜交，根據有無雜交信號判斷不同基因亞型的存在。這種DNA芯片技術共檢測23種HPV基因亞型包括18種高危型和5種低危型。高危型包括：HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、83、MM4；低危型包括：HPV6、11、42、43、44。同時對同一病例的多種HPV亞型感染也可進行診斷。

3 統計學方法 采用SPSS 13.0 軟件進行資料分析。采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

結 果

1 各年齡段HPV篩查陽性率及CIN患病情況 見表1。20～29歲年齡段HPV陽性率最高,為26.92%；40～49歲及50～59歲年齡段HPV陽性率分別為13.99%及14.11%，較前明顯下降，與20～29歲及30～39歲年齡段陽性率比較差異有統計學意義(P<0.05)。但宮頸上皮內瘤變好發年齡組為30～59歲之間，而非HPV陽性率最高的20～29歲年齡段,差別有統計學意義(P<0.05)。在≥60歲年齡組中，HPV陽性率逐漸下降，但發生高度上皮內瘤變(CIN II及CIN III)的機率仍較高。宮頸高度上皮內瘤變好發年齡組為30～59歲之間，以40～49歲年齡段發病率最高，與其他年齡段相比,差別有統計學意義(P<0.05)。

表1 各年齡段HPV篩查陽性率及CIN患病情況

2 HPV 感染的基因型別和宮頸病變的關系 見表2、表3。高危型HPV基因型別在不同級別CIN 中有不同表現：CIN I常見的高危型HPV 型別由多到少依次是：16、58、51、56; CIN II是16、31、33、58、53、68; CIN III 是16、52、31、58、18、51、3、59。高度上皮內瘤變最常見的高危型HPV基因型由多至少依次是：16、58、31、33、52、53、18、51、56。低危型HPV基因型主要是6、11、43、42、6。低危型HPV感染和宮頸病變也存在一定關系,但多為與高危型同時存在的雙重或多重感染。

討 論

近年來,隨著對宮頸癌病因學研究的不斷發展,研究已證實宮頸癌的發生、發展與高危型人乳頭瘤病毒(HR-HPV) 感染有密切關系[1]。多數女性在感染高危型HPV 后機體的自動清除機制可清除病毒感染，只有約 1%～3%的患者HPV 感染呈持續狀態[2]。劉征麗等[3]利用熒光偏振檢測技術檢測西安地區確診的宮頸癌和CIN患者中高危型HPV感染陽性率為60.7%。 資料顯示目前已經發現的HPV亞型有100 多種，現臨床及實驗研究均采用Munoz 高危型HPV和低危型HPV的流行病學分類方法：高危型HPV包括HPV 16、18、31 等,低危型HPV包括HPV 6、11、40、42 等。低危型HPV多在尖銳濕疣及低度CIN病變中檢出,高危型HPV多在高度CIN和宮頸癌中檢出。使用基因芯片技術可對HPV DNA進行分型診斷,可檢測23種HPV基因亞型,包括18種高危型和5種低危型,還可判斷多重感染。本研究利用基因芯片技術對低度及高度宮頸上皮內瘤變的HPV感染亞型進行檢測，結果顯示HPV基因型別在不同級別CIN 中有不同表現：CIN I常見的HPV 型別由多到少依次是：16、58、51、56；CIN II是16、31、33、58、53、68；CIN III 是16、52、31、58、18、51、3、59。高度CIN最常見的HPV 基因型由多至少依次是：16、58、31、33、52、53、18、51、56。低危型主要是6、11、43、42、6。低危型HPV基因型別和宮頸病變也存在一定關系,但多為與高危型同時存在的雙重或多重感染。而且低危型HPV感染多見于CINI和CINII、CINIII最常見高危型HPV感染,提示高危型HPV感染與CIN的發展及宮頸癌發生關系更為密切。

表2 高危型HPV感染的基因型別和CIN的關系(n)

表3 低危型HPV感染的基因型別和CIN的關系(n)

研究發現年輕的性活躍婦女HPV 感染率最高,達20%～40%,所以年齡是HPV 感染的重要危險因素之一,就具有正常性行為的婦女而言,宮頸至少感染一種HPV 的終生累積概率可高達70%。如此高的HPV感染率,只有極少數發生CIN或宮頸癌,是由于大部分婦女感染HPV后,多在8～10個月內自然消退,其中只有少數≥35 歲婦女無法自動清除HPV,表現為持續感染狀態。這類婦女發生CIN的風險明顯升高,如果未經干預阻斷，HPV持續感染，CIN 可能在20 年左右進展為宮頸癌。在我們的研究中：HPV陽性篩查率在20～39歲年齡段處于較高水平,其中20～29歲年齡段陽性率最高,為26.92%,與目前的研究結果相同,提示HPV感染與性行為相關，高陽性率見于性活躍期。40～49歲及50～59歲年齡段HPV陽性率分別為13.99%及14.11%,較前明顯下降,與20～29歲及30～39歲年齡段陽性率,比較差別具有統計學意義。但宮頸上皮內瘤變好發年齡組為30～59歲之間,而非HPV陽性率最高的20～29歲年齡段,差別具有統計學意義。在≥60歲年齡組中，HPV陽性率逐漸下降，但發生高度上皮內瘤變(CIN II及CIN III)的機率仍較高,考慮與HPV持續感染相關。宮頸高度上皮內瘤變好發年齡組為30～59歲之間，以40～49歲年齡段發病率最高,與其他年齡段相比,差別具有統計學意義。資料顯示：經過積極的宮頸癌篩查,全國宮頸癌的死亡率明顯下降,幅度為63.64%，宮頸癌的發病率和死亡率都得到了一定程度的控制[4]。所以對≥30 歲以上的女性應每3 年做一次HPV及宮頸細胞學的篩查,以盡早發現HPV,尤其是高危型HPV感染及宮頸細胞學異常,定期監測,及時治療,預防因HPV持續感染導致CIN及宮頸癌的發生。

[1] Ghittoni R,Accardi R,Hasan U,etal.The biological properties of E6 and E7 oncoproteins from human papillomaviruses[J].Virus Genes,2010,40(1)：1-13.

[2] Meijer CJ,Snijders PJ.Cervical cancer in 2013：Screening comes of age and treatment progress continues[J].Nat Rev Cli n Oncol,2014,11(2)：77-78.

[3] 劉征麗,張 菊，張 濰,等.等熒光偏振檢測西北地區宮頸病變組織中HPV感染分型的研究[J].陜西醫學雜志,2015，44(2)：164-166.

[4] 龐秋霞,符兆英.宮頸癌的預防措施及研究進展[J].中國婦幼保健,2013,28(23)：3866-3868.

(收稿：2015-03-10)

*陜西省社會發展科技攻關項目(2015SF185)

宮頸上皮內瘤樣病變 乳頭狀瘤病毒感染 基因型

R737.33

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2015.10.013