乳腺癌脈管浸潤檢測中雙重免疫組化染色的應用分析

高鵬

乳腺為纖維組織、皮膚、脂肪以及乳腺腺體組成的，乳腺癌則是出現在乳腺上皮組織上的惡性腫瘤。乳腺雖不是人體重要的生命活動器官，且原位的乳腺癌并不會危及患者生命[1-2]。但是乳腺癌的細胞因失去正常細胞特性，使細胞之間較為松散，出現脫落的癥狀，當癌細胞脫落后，其通過淋巴液或者血液散播到患者全身，出現轉移，則會導致死亡[3-4]。癌細胞入侵到血管或者淋巴管時，才能轉移到遠端部位或者局部的淋巴結，所以乳腺癌患者通過對腫瘤脈管進行浸潤檢測，才可指定準確良好的治療方案[5]。本研究選取61例乳腺癌患者進行分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年8月～2014年1月南省南陽市中心醫院收治的61例乳腺癌患者進行研究，采取乳腺浸潤性導管癌的手術切除標本，所有患者均為女性，年齡33～74歲，平均（47.31±3.18）歲，患者在手術前沒有進行放療、化療或者抗腫瘤的其他治療，對患者給予重新切片以及HE染色，病理醫生給予確診。

1.2 方法

1.2.1 檢測方法 所有患者在免疫組織化學的試劑中選擇CD 34和CKpan，以及Dako公司的雙重免疫組織化學的試劑盒。將患者的標本采用4%的中性緩沖的甲醛給予固定，并采用常規石蠟的包埋，給予4μm的連續切片，并給予雙重免疫組織化學的染色和常規HE染色，在免疫組織化學使用SP法，使用堿性磷酸酶和DAB（二氨基聯苯胺）進行雙重染色，并給予封固，每個步驟都按照相關文獻進行操作。并對檢測結果進行詳細記錄。

1.2.2 結果判定 CD 34若為棕黃色則陽性結果，則定位在內皮細胞；CK若為紅色則評為陽性，可定位在瘤細胞胞質。HE和免疫組織化學切片要求2名病理醫生進行獨立檢驗，若HE切片中有明確的被覆內皮細胞腔隙，且有腫瘤細胞時，則為LVSI（+），在免疫組織化學的染色切片中，若在CD 34變為棕黃色染成紅色的腫瘤細胞的患者內皮細胞腔隙為LVSI（+）[3]。

1.3 統計學方法 采用SPSS 14.0統計學軟件處理數據。計量資料比較采用t檢驗，計數資料比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

61例乳腺癌患者中，在HE染色判斷中，有16例判斷為LVSI（+）。而在雙重免疫組織化學染色證實的有：10例患者為LVSI（+），6例患者為LVSI（-），而在HE染色判斷中，有45例患者沒有確定為LVSI（+）的，在雙重免疫組織化學染色的檢測后，13例患者為LVSI（+）。兩種檢測方法的診斷結果差異有統計學意義（P＜0.05）。

3 討論

乳腺癌患者在早期沒有明顯的體征和癥狀，很多人是通過體檢而發現的，其主要癥狀有乳腺腫塊、乳頭溢乳、皮膚改變，乳腺癌會導致皮膚失去彈性，以及橘皮樣的改變，而且乳頭、乳暈出現異常，若腫瘤在乳頭深部，會使乳頭出現回縮，但若腫瘤與乳頭的距離較遠，則會導致乳頭抬高或者回縮[6-7]，對患者正常的工作和生活造成嚴重的不良影響，一旦腫瘤出現轉移，還會造成生命危險。腫瘤轉移這個過程較為復雜，且脈管浸潤為中藥緩解，當腫瘤細胞到達脈管腔，則就會通過淋巴和血液進入到遠處的器官和淋巴結中，造成轉移瘤的形成，所以在對實體瘤的診斷中，LVSI為重要指標，根據其來判斷患者的病情、復發以及生存時間。腫瘤脈管浸潤這種方法為：采用光鏡對HE切片進行觀察，在被覆的內皮細胞腔隙中對瘤細胞進行明確觀察，但在有些狀態下不能給予較好判斷[8]。比如，若制片中，腫瘤細胞團因為收縮導致的裂隙和血管真正的間隙難以辨別；如果血管腔隙的瘤細胞陶紹，則HE染色不能將其在背景血液細胞中進行區分；而且若瘤細胞團填滿血管的腔隙，則不能和間質侵潤的瘤細胞團進行區分。為了較好避免上述的問題，則在檢測中使用免疫組織化學雙重標記的方法，對瘤細胞上皮性的標志物與血管內皮的細胞標志物在同1張切片上展示，并和常規的HE染色給予比較，從而得出乳腺癌脈管浸潤檢測中雙重免疫組織化學染色的應用效果。

雙重免疫組織化學染色的原理為，利用抗體和抗原之間特異性的結合以及特殊標記的技術，并對細胞和組織內給予抗體或者特定抗原的定性、定位和定量檢測[9]。在HE檢測中，雖然可區分腫瘤細胞團因收縮造成的裂隙和血管腔的間隙，可是若血管腔隙中瘤細胞較少，則會診斷為血細胞，而導致漏診現象的出現。而雙重免疫組織化學染色這種檢測方法，在同一張切片上對瘤細胞給予血管內皮細胞物和上皮性的標記，可明顯直觀地看到腫瘤組織與血管之間的關系，促進檢出率和診斷準確率的提高。

綜上所述，乳腺浸潤性導管癌患者在檢測中雙重免疫組織化學染色的檢出率，明顯比HE觀察的檢出率高，只有在早期判斷出癌細胞是否轉移或者復發， 才可進行積極有效的預后治療，達到較好的預后效果，延長患者的生存時間和生活質量。

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