自動化尿分析檢驗方法的改進

顧園園

(黑龍江省農墾建三江人民醫院 156300)

尿是一種容易獲得的檢驗材料，其組成的變化不僅能反映泌尿生殖道的病變，而且不少全身性疾病也可引起尿成分的變化。一直以來，驗尿被認為是一種重要的診病手段。隨著醫學發展診斷疾病方法有很多，但尿分析的作用并未稍減。筆者就自動化尿分析改良方法介紹如下。

1 自動化試劑條評價

1.1 試劑條的新進展 用自動化試劑條技術代替手工進行尿化學測定，已應用多年。由尿中的血紅蛋白、亞硝酸鹽和白細胞酯酶間接推算是否存在紅細胞、細菌和白細胞的過篩價值及實用性，已為大多數臨床及檢驗專家所接受。因為盡管尿中出現血紅蛋白不一定同時存在紅細胞、引起泌尿系感染的細菌并非都還原硝酸鹽、尿中的淋巴細胞等與沒有酯酶活性，但畢竟是少數。新一代的試條在相關的試劑墊塊(pad)中，加了抗壞血酸氧化酶或碘鹽以分解或氧化抗壞血酸;有的試條則另加一個測抗壞血酸的墊塊作為對照。此外，有的試條還另加一個空白塊，用于消除尿本身有深顏色時對結果的干擾。目前大部分試條都加了一個含多電解質試劑的，偏堿性并含有pH指示劑的墊塊，用于測尿比重。與化學試驗比較起來，測比重試條的準確性稍差。因此有些現代化尿分析儀，并不采用此法。

1.2 自動化尿分析儀的改進 試條法是通過化學反應產生的顏色變化進行測定的。早期是用肉眼觀察顏色變化及深淺，并與一標準色板進行比較而作定性或半定量。這種方法目前在一些標本量少的單位和供個人使用的試條仍大量使用。但在大批量檢查時顯得效率太低，而且肉眼比色受主觀因素的影響，精密度較差。人眼對顏色深度的微細差別往往不及儀器，因此靈敏度也較差。當前應用最廣的是半自動尿分析儀，該儀器實質上是一臺反射式光度計。經過改進，精密度及靈敏度不斷提高，已成為當前國內外臨床檢驗最常用的儀器之一。新式的儀器往往采用多個波長，有的用了壽命較長的發光二級管作為光源，有的多達十多個檢測器，并配有功能齊全的電腦。最先進的全自動儀器，如Supertron，Clinitek Atlas等，自動化程度很高。例如Atlas型儀器將490個試條連在一起，并卷成圓筒，置于儀器內;同時有一個可放50個尿樣管的轉盤和自動定量吸加液裝置。測定時，將貼了條形碼的尿樣管排列于轉盤上，啟動儀器，轉動著的試條簡使試條轉至光路區。儀器即自動按順序吸尿樣加至每個試塊，自動進行測定。熒屏顯示結果及打印，全部按程序自動進行，無需人看管。該儀器還有一特制白色濾紙墊塊。用于檢測尿的顏色(最新的儀器已能測定尿的清濁度)。同時有校正儀器用的專用試條，測定中(配合質控液)可插入對儀器進行質控的試條。這種儀器除了效率高、測定項目多、污染少以外，最大的優點是加尿量及讀取結果的時間一致，而半自動儀器的試條靠手工浸尿液后再置入儀器中，易造成污染，且條件難以一致，往往影響結果。所以這種儀器的精密度和準確性都大大提高。

2 尿沉渣檢查的標準化和自動化

2.1 現代化的尿分析儀對紅、白細胞和細菌的檢測是靠化學試驗間接(推測)求得的，特異性都不太強。試條也不能檢出管型、上皮細胞、滴蟲、精子、結晶等等。當篩查結果有疑問時，儀器往往給出警示信號，提示要進行鏡檢確定。目前，不管多么先進的尿分析儀，都不能完全取代尿沉渣的顯微鏡檢查，只能起初篩作用。關于何種情況下需要進行鏡檢。

2.2 尿沉渣鏡檢首先遇到的問題是方法如何統一。例如，取多少尿離心，離心力、離心時間，最后留下多少沉淀尿液，取多少用于鏡檢;加蓋片時，蓋片的面積、顯微鏡放大倍率、高倍鏡物鏡鏡頭的直徑，觀察多少視野以及報告方式等等，目前國內外很不一致。例如，NCCLS的GP66-T指南(1992)規定:取尿12ml離心，相對離心力(RCF)為400xg，離心5分鐘，棄上清后留下0.2ml(用一種特制的帶尖頭的離心管，傾去上清后，恰好剩下0.2ml)，吸取20μl，加于載玻片上，加22m2的蓋片，根據高倍鏡頭直徑算出高倍視野面積，最后以每毫升尿中的細胞數報告。

2.3 尿紅細胞定位檢查是臨床常用的方法，傳統的相差顯微鏡法同樣存在人為的誤差并應用受限。尿常規自動分析法以多項指標辨別血尿定位，包括尿沉渣分析的均質和非均質紅細胞、管型及小圓上皮測定，Clinitek 500的蛋白和潛血測定。尿均質和非均質紅細胞測定將直接分析紅細胞的來源，管型、小圓上皮及蛋白為腎損害的有利佐證。潛血檢驗可間接推測非均質紅細胞的存在。因非均質紅細胞即血紅蛋白逸出的紅細胞。潛血測定為過氧化酶法，對尿中的紅細胞破壞釋放出的血紅蛋白敏感。潛血陽性說明紅細胞中血紅蛋白逸出增多。因此，尿自動分析法可用于血尿定位分析。L1F-100對尿管型、小圓上皮、結晶和細菌的測定不夠準確，可作為診斷參考，必要時用顯微鏡法確定。尿自動分析法可較準確的檢驗尿常規指標，其結果能滿足和符合臨床診斷。除特殊標本及病例可取代顯微鏡檢查尿沉渣方法。