慢性HBV感染者不同病程階段HBV前S基因缺失突變的比較分析

秦雅群，李曉東，廖 昊，李 梵，盧珊珊，劉 妍，徐東平，李 進(jìn)

我國(guó)現(xiàn)有HBV感染者約9300萬人，其中約2000萬人為慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B,CHB）患者[1]。HBV感染后臨床可表現(xiàn)為急性自限性肝炎、無癥狀 HBV 攜帶、CHB、肝硬化（liver cirrhosis,LC）、慢加急性肝衰竭（acute－on－chronic liver failure,ACLF）和肝細(xì)胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）[2]。但是，HBV感染疾病進(jìn)展的相關(guān)機(jī)制尚未完全闡明，除受感染年齡影響外，與機(jī)體免疫系統(tǒng)和病毒的相互作用密切相關(guān)[3]。

HBV為部分環(huán)狀雙鏈DNA，其基因組包含了S、P、C和X 4個(gè)開放讀碼區(qū)。S讀碼區(qū)分為前S（pre-S）1基因、pre-S2基因和S基因，各有其起始密碼子，但共用同一終止密碼子。核苷酸（nt）序列分別為 nt 2848-3204、nt 3205-154和 nt 155-835，分別編碼119個(gè)pre-S1蛋白、55個(gè)pre-S2蛋白及226個(gè)S蛋白。pre-S1和pre-S2蛋白包含多個(gè)T細(xì)胞和B細(xì)胞表位，與機(jī)體的免疫反應(yīng)有密切的相互作用[4]。近年來不斷深入的研究發(fā)現(xiàn)，pre-S基因的缺失突變可能導(dǎo)致病毒的感染性、分泌能力、免疫原性及抗原抗體的結(jié)合能力發(fā)生改變。首先，pre-S基因的缺失可能使大蛋白在細(xì)胞表達(dá)過量，并在細(xì)胞中堆積，導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)的改變，從而加重疾病的進(jìn)展，多項(xiàng)臨床研究均發(fā)現(xiàn)pre-S缺失突變與LC和HCC密切相關(guān)[5-7]。其次，HBV感染的決定區(qū)域位于pre-S1蛋白N端，通過與肝細(xì)胞表面牛磺膽酸共轉(zhuǎn)運(yùn)多肽結(jié)合以感染肝細(xì)胞[8]；pre-S2蛋白包含多聚人血清ALB結(jié)合位點(diǎn)，在病毒裝配的過程中起關(guān)鍵作用[9]。此外，HBV pre-S基因有SP1和SP2兩個(gè)啟動(dòng)子，其中SP2（nt2809-3152）大部分位于pre-S1基因內(nèi)，pre-S1缺失突變可影響SP2活性，進(jìn)而影響中蛋白和小蛋白合成[10]。目前尚缺少針對(duì)慢性HBV感染者疾病進(jìn)展的不同階段進(jìn)行pre-S基因測(cè)序的研究，本研究對(duì)較大樣本量的CHB、LC、ACLF和HCC患者進(jìn)行pre-S基因測(cè)序，并比較不同病程階段患者的pre-S缺失發(fā)生率以及發(fā)生缺失的熱點(diǎn)區(qū)域差異，以闡明HBV pre-S1和pre-S2基因缺失突變的臨床流行特點(diǎn)及其各自與疾病進(jìn)展的關(guān)系。……