6—BA濃度對紅色大花月季愈傷組織誘導的影響

王豐華　管遠清　徐榕雪　于立芝

摘要：以紅色大花月季不帶芽莖段為外植體，研究了不同濃度6-BA對紅色大花月季愈傷組織誘導的影響。結果表明，適宜濃度的6-BA對愈傷組織的誘導率、生長量和產生速率都有明顯的促進作用；6-BA濃度為1.5 mg/L時，愈傷組織的誘導率和生長量均達到最高，分別為94%和0.9706 g/瓶；紅色大花月季愈傷組織誘導的最佳誘導培養基為MS+0.5 mg/L NAA+1.5 mg/L 6-BA。

關鍵詞：6-BA濃度；紅色大花月季；組織培養；愈傷組織誘導

中圖分類號：S685.12文獻標識號：A文章編號：1001-4942（2014）12-0054-03

月季是薔薇科多年生木本花卉，栽培品種很多，為世界四大切花之一，也是我國傳統名花[1]。紅色大花月季以色彩艷麗、花姿優美廣泛應用于園林綠化中。月季通常采用扦插的方法進行繁殖，其繁殖速度受到一定限制[2～6]。植物組織培養技術具有周期短、繁殖率高、整體生產成本低等特點，已廣泛應用于植物快繁和篩選優良種質[7～9]。愈傷組織誘導是植物組織培養技術的第一個環節，本試驗以紅色大花月季的莖段為外植體，研究6-BA（6-芐氨基腺嘌呤）濃度對愈傷組織誘導的影響，以期為紅色大花月季組織培養中合理使用6-BA誘導愈傷組織提供科學依據。

1材料與方法

1.1試驗材料

外植體采用紅色大花月季生長健壯且無病蟲害的當年生枝條，剝去葉片及附在莖上的葉柄及皮刺，用小毛刷蘸中性洗衣液將其莖段刷洗干凈，并用自來水沖洗1 h待用。

1.2試驗設計

誘導培養基均采用MS基本培養基，添加8 g/L瓊脂、30 g/L蔗糖，同時添加相同濃度的NAA及不同濃度的6-BA，pH值為5.8，高溫滅菌。試驗共設6組處理（見表1），每組處理接種10瓶，每瓶接種5個外植體，共50個外植體[10]。

1.3試驗方法

2013年10月1日，在超凈工作臺無菌環境中，將月季枝條中段飽滿且無腋芽的部分剪成1 cm長的小段。無菌水沖洗3次后，先用75%的酒精表面消毒30 s，再用1 g/L的升汞溶液消毒8～10min，無菌水沖洗5次，用無菌濾紙吸去表面水分，接種于愈傷組織誘導培養基中。培養箱光照強度為3 000 lx，光照時間10～12 h/d，培養箱干球溫度14.8℃，濕球溫度24.5℃。接種后持續觀察愈傷組織萌動情況。

1.4數據記錄及處理

2013年10月10日開始定期觀察并記錄愈傷組織的數量及生長狀態等。2013年11月26日，每組處理隨機挑選3瓶對愈傷組織的生長量進行調查。

愈傷組織的誘導率（%）=每組處理中誘導出的愈傷組織數量/每組處理中外植體總數×100[11]

愈傷組織的生長量=每組處理中3瓶愈傷組織生長量總和/3采用Microsoft Excel進行數據處理。

2結果與分析

2.1不同濃度6-BA對紅色大花月季愈傷組織誘導率的影響

由表2可以看出，不同處理對紅色大花月季愈傷組織誘導率的影響不同。T4處理誘導率最高為94%；其次是T3、T5、T6處理，誘導率均為92%；T2處理的誘導率為88%；T1處理誘導率最低，僅為28%。

紅色大花月季愈傷組織的誘導率與6-BA濃度的二次模擬函數為：

式中，x表示6-BA濃度，y表示紅色大花月季愈傷組織的誘導率，其相關系數R=0.9159>0.9，相關性顯著。6-BA濃度與紅色大花月季愈傷組織誘導率的模擬曲線見圖1。

2.2不同濃度6-BA對紅色大花月季愈傷組織產生速率的影響

紅色大花月季愈傷組織產生速率曲線見圖2，添加6-BA的所有處理（T2、T3、T4、T5、T6）愈傷組織的產生速率顯著高于未添加的處理（T1），但添加6-BA的各處理之間愈傷組織的產生速率則沒有明顯差異。

2.3不同濃度6-BA對紅色大花月季愈傷組織生長量及生長狀態的影響

由表3可知，T4處理的紅色大花月季愈傷組織生長量最高，為0.9706 g/瓶，；T1處理的愈傷組織生長量最低，為0.0015 g/瓶；各處理愈傷組織生長量由大到小的順序為T4>T5>T3>T6>T2>T1。

式中，x表示6-BA濃度，y表示紅色大花月季愈傷組織的生長量，其中相關系數R=0.9832>0.9，相關性顯著。6-BA濃度與紅色大花月季愈傷組織生長量的模擬曲線見圖3。

3結論

本研究結果表明，6-BA在紅色大花月季愈傷組織誘導方面發揮著重要作用，適宜濃度的6-BA對愈傷組織誘導率、生長量和產生速率都有明顯的促進作用。

對愈傷組織誘導率的影響表現為，紅色大花月季愈傷組織的誘導率隨6-BA濃度的增大呈現先增長后下降的趨勢，當6-BA濃度為1.5 mg/L時，愈傷組織的誘導率最高為94%。對愈傷組織生長量的影響表現為，當6-BA濃度為1.5 mg/L時愈傷組織的生長量最高為0.9706 g/瓶。

對愈傷組織產生速率的影響的表現為，添加6-BA的所有處理中愈傷組織的產生速率無明顯的差異，但都顯著高于未添加6-BA的處理。

綜上所述，紅色大花月季愈傷組織誘導過程中，MS+0.5 mg/L NAA+1.5 mg/L 6-BA為最佳誘導培養基，NAA和 6-BA兩種生長素共同作用的效果明顯優于單一生長素處理。

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