XRCC1基因多態性與肝細胞癌易患性的關聯性研究

龔文鋒，張秋明，鐘鑒宏，白　濤，黃　山，向邦德，馬　良， 黎樂群※

(1.廣西醫科大學附屬腫瘤醫院肝膽外科，南寧 530021； 2.廣西醫科大學第十附屬醫院綜合病區，廣西 欽州 535000)

XRCC1基因多態性與肝細胞癌易患性的關聯性研究

龔文鋒1，張秋明2，鐘鑒宏1，白濤1，黃山1，向邦德1，馬良1， 黎樂群1※

(1.廣西醫科大學附屬腫瘤醫院肝膽外科，南寧 530021； 2.廣西醫科大學第十附屬醫院綜合病區，廣西 欽州 535000)

摘要：目的評價X線交叉互補修復基因1(XRCC1) Arg280His位點基因多態性與肝細胞癌(HCC)發病風險的關聯性。方法檢索PubMed、EMABSE及中國知網等數據庫，收集關于XRCC1 Arg280His基因多態性與HCC易患性的病例對照研究，提取數據進行Meta分析。以病例組及對照組XRCC1 Arg280His基因型分布的比值比(OR)為效應指標，計算合并OR值及其95%置信區間(CI)。 結果共7篇文獻符合納入標準，累計病例1448例，對照1529例。Arg/Arg基因型與His/His基因型比較的OR=0.69 (95%CI0.47~1.01,P=0.05)。而Arg/Arg基因型與Arg/His+His/His基因型比較的OR=0.78(95%CI0.52~1.17,P=0.24)。Arg-allele 與 His-allele比較的OR=0.74 (95%CI0.52~1.04,P=0.09)。 結論XRCC1 Arg280His位點基因多態性可能不參與HCC的發生。

關鍵詞：肝細胞癌；X線交叉互補修復基因1；多態性； Meta分析

肝細胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是在全世界男性癌性死亡原因中排第二、女性癌性死亡原因中排第六的惡性腫瘤[1]，發病率在全球范圍分布不均，以東南亞及撒哈拉以南非洲地區的發病率最高[2]。HCC的發病機制尚未完全闡明，流行病學及臨床研究表明，HCC與肝炎病毒[3-4]、黃曲霉素B1感染[5]、酒精性肝硬化[6]等相關。然而，暴露在這些環境的個體并不都罹患HCC，提示HCC的發生不僅取決于環境因素，還可能受個體遺傳易患性[7-8]的影響。致病因素和(或)其代謝產物通過損傷機體的DNA導致機體細胞不穩定從而誘發癌變，而機體通過DNA損傷修復系統參與修復以維持基因組穩定性。X線交叉互補修復基因1(X-ray repair cross-complementing group 1，XRCC1)是機體非常重要的DNA損傷修復基因，其第280密碼子編碼的氨基酸發生G→A變異從而導致Arg→His改變，該變異可能改變XRCC1基因的功能而導致腫瘤的發生。關于XRCC1 Arg280His基因多態性與腫瘤發病易患性的研究較多，包括HCC，但由于各研究樣本量相對不大且結果缺乏一致性。因此，本研究擬采用Meta分析方法來評估XRCC1 Arg280His基因多態性與HCC發病的關聯性。

1材料與方法

1.1文獻檢索中文以肝癌、XRCC1、X線交叉互補修復基因1、多態性，英文以HCC/Hepatocellular Carcinoma；XRCC1/X-ray Repair Cross-Complementing group 1/DNA repair genes為主題詞、關鍵詞，分別在中國知網、維普中文科技期刊數據庫、萬方全文數據庫及PubMed、EMBASE數據庫上進行檢索，檢索日期截至2014年4月，收集關于XRCC1 Arg280His基因多態性與HCC易患性的病例對照研究。

1.2文獻納入標準①國內外關于XRCC1 Arg280His基因多態性與HCC易患性的病例-對照研究；②研究方法相同或相似，暴露定義相同，能提供病例組(HCC患者)和對照組(健康人群)的觀察人數、基因型頻率分布及相關原始數據；③HCC病例組均經組織病理學確診。

1.3質量評估通過以下幾方面對文獻進行質量評估來評定其偏倚及影響程度:①研究對象是否有明確的納入標準;②病例組及對照組來源情況; ③統計方法是否恰當;④對研究存在的偏倚是否進行了討論;⑤實驗設計是否合理;⑥對照組哈迪-溫伯格遺傳平衡(Hardy-Weinberg Equilibrium,HWE)情況。

1.4統計分析按Meta分析的要求分別收集、整理、核實及校對數據。采用RevMan 5.14統計軟件進行Meta分析，對文獻結果進行異質性檢驗(P>0.10 表示結果一致性較好，采用固定效應模型進行數據分析；P≤0.10則采用隨機效應模型進行效應量的合并)。以比值比(odds ratio,OR) 及其95% 置信區間 (confidence interval,CI) 作為每個研究結果的研究效應測定指標。HWE采用http://krunch.med.yale.edu/hwsim/網站提供的HWSIM程序進行計算(P>0.05時表示群體基因遺傳平衡，數據來自同一蒙德爾群體，且具有代表性；P<0.05表示群體缺乏代表性)。采用敏感性分析評價結果的穩定性，對納入的文獻使用倒漏斗圖進行發表偏倚評價。

2結果

2.1文獻概述檢索符合納入標準的文獻7篇[9-15]，6篇為中國人群[10-15]，1篇為印度人群[9]；3篇英文及4篇中文文獻，累計病例1448例，對照1529例。納入研究的基本特點如表1。

2.2Meta分析結果

2.2.1Arg-allele vs His-allele異質性檢驗P<0.001，I2=78%，存在異質性，采用隨機效應模型計算，OR=0.74，95%CI0.52~1.04,P=0.09 (圖2)。

表1　納入文獻中觀察組與對照組的一般資料

PCR-RFLP：限制性片段長度多態性聚合酶鏈反應；PCR-CTPP：四引物擴增受阻突變體系聚合酶鏈反應；TaqMan:實時熒光定量聚合酶鏈反應；病例組：肝細胞癌患者，對照組：健康人群; 同一研究中的病例組及對照組中的基因檢測方法均為同一檢測方法(如均為PCR-RFLP、PCR-CTPP、TaqMan);基因分型中包含純合子及雜合子，其中純合子包含Arg/Arg(野生型)及His/His(突變型)，而雜合子指Arg/His

圖1　XRCC1 Arg280His基因多態性與HCC易患性關系的Meta分析森林圖(Arg-allele vs His-allele)

2.2.2Arg/Arg vs His/His異質性檢驗P=0.82，I2=0%，異質性較好，采用固定效應模型計算，OR=0.69，95%CI0.47~1.01,P=0.05。

2.2.3Arg/Arg vs.Arg/His+His/His異質性檢驗P=0.0003，I2=76%，存在異質性，采用隨機效應模型計算，OR=0.78，95%CI0.52~1.17,P=0.24。

2.3亞組分析

2.3.1中國人群Arg-allele vs His-allele;Arg/Arg vs His/His;Arg/Arg vs Arg/His+His/His；Arg/Arg+Arg/His vs His/His比較，合并OR值分別為0.78 (95%CI0.53~1.15,P=0.20)；0.74(95%CI0.48~1.15,P=0.18)；0.91 (95%CI0.64~1.30,P=0.59)；0.70 (95%CI0.46~1.05,P=0.09) 。

2.3.2印度人群對印度人群進行分層分析，只有1個研究[2]共63例病例及155對照納入分析，結果顯示XRCC1 Arg280His基因多態性與HCC易患性的關聯性不強，尚不能認為XRCC1 Arg280His Arg/Arg分型是HCC的易患基因或保護基因型。

2.3.3樣本量>300例亞組分析將樣本量>300例的研究重新進行Meta分析，共納入4個研究[2]共1195例病例及1224例對照，結果顯示對于總人群，Arg-allele vs His-allele;Arg/Arg vs His/His;Arg/Arg vs Arg/His+His/His；Arg/Arg+Arg/His vs His/His比較，合并OR值分別為1.00 (95%CI0.74~1.37,P=0.98)；0.75 (95%CI0.48~1.16,P=0.19)；1.03 (95%CI0.71~1.51,P=0.87)；0.87 (95%CI0.56~1.37,P=0.55) 。

2.4敏感性分析去除HWE檢驗P<0.05的研究[2]重新進行Meta分析，結果未發現明顯改變；去除權重大的文獻重新進行Meta分析結果亦未發現顯著改變；分別采用固定效應模型及隨機效應模型對研究進行統計分析結果亦無顯著改變。以上提示結果穩定性較好，見表2。

表2　Meta分析結果敏感性分析

2.5發表偏倚Arg/Arg基因型與His/His基因型比較，Arg/Arg基因型與Arg/His+His/His基因型比較，Arg-allele與His-allele比較，發表偏倚均采用RevMan 5.14軟件進行分析。漏斗圖顯示各研究之間分布均勻，提示存在發表偏倚的風險比較低，見圖2。

圖2　Arg-allele vs His-allele比較漏斗圖

3討論

XRCC1位于人第19號染色體的長臂(q13.2～13.3)，編碼633個氨基酸，其編碼的蛋白質與DNA聚合酶β、多聚ADP核糖聚合酶以及DNA連接酶Ⅲ結合形成復合體參與對機體DNA損傷的修復，是機體重要的DNA 修復基因。該基因第280密碼子編碼的氨基酸發生G→A變異引起Arg→His改變，該變異可能改變XRCC1基因的功能而導致腫瘤的發生。國內外很多關于XRCC1 Arg280His基因多態性與腫瘤易患性的關聯研究，包括食管癌[16]、甲狀腺癌[17]、乳腺癌[18]、前列腺癌[19]等。然而，關于XRCC1 Arg280His多態性與HCC易患性的研究樣本量不大，且結果不盡相同，本研究擬采用Meta分析的方法評估該基因與HCC的關聯性。

本研究納入7個病例對照研究共1448 HCC病例及1529例健康對照，有4個[9-12]研究結果顯示XRCC1 Arg280His與HCC的發生、發展密切相關，3個[13-15]研究顯示否定兩者相關性。本研究合并結果表明，XRCC1 Arg280His與HCC無關聯性，得出無關聯性結果最可能的原因是本研究納入的很多屬于小樣本的研究，這可能導致在計算XRCC1 Arg280His與HCC關聯性出現高風險選擇性偏倚的可能。因此，該結果仍需要有更大樣本量更嚴謹的研究納入后重新證實其關聯性，將>300例樣本量的研究重新進行Meta分析，結果未顯示實質性的改變，因此可以認為本研究Meta分析存在選擇性偏倚的風險較低。在去除對照組的HWE<0.05的研究后重新進行分析，結果亦顯示XRCC1 Arg280His與HCC無關聯性(P>0.05)；同時，分別采用隨機模型及固定模型進行分析，結果未發現實質性改變。以上敏感性分析結果一致性表明本研究結果可信度比較高。

然而，本研究仍存在以下局限性：首先，盡管所有納入的病例及對照組均采用了一致的納入標準，然而，仍有可能存在潛在其他的因素影響計算結果；其次，HCC是多因素共同導致的疾病，由于缺乏原始的數據而無法在有無病毒感染、有無黃曲霉素B1暴露、有無酒精背景等方面進行亞組分析；最后，由于數據缺乏而不能對納入的研究進行基因-環境、基因-基因的相互作用進行分析。

盡管如此，本研究表明XRCC1 Arg280His與HCC無關聯性。但結果仍需從基因-基因及基因-環境方面進行更大樣本、更嚴謹的研究來證實，從而得到更可靠的循證醫學證據，為HCC提供更進一步的防治措施。

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The Association Study of XRCC1 Gene Polymorphism and Hepatocellular Carcinoma Suspetibility

GONGWen-feng1,ZHANGQiu-ming2,ZHONGJian-hong1,BAITao1,HUANGShan1,XIANGBang-de1,MALiang1,LILe-qun1.

(1.DepartmentofHepatobiliarySurgery,AffiliatedTumorHospitalofGuangxiMedicalUniversity,Nanning530021，China; 2.DepartmentofComprehensiveMedicalTreatment,theTenthAffiliatedHospitalofGuangxiMedicalUniversity,Qinzhou535000，China)

Abstract:ObjectiveTo explore the association between X-ray repair cross-complementing group 1(XRCC1) Arg280His polymorphism and risk of hepatocellular carcinoma(HCC).MethodsPubMed,EMBASE and the Chinese National Knowledge Infrastructure databases were systematically searched to identify relevant studies.Odds ratios (ORs) with 95% confidence intervals (CIs) were used to assess the strength of the association.ResultsAltogether 7 studies were included in the meta-analysis,involving 1448 cases and 1529 controls.The XRCC1 Arg280His polymorphism were not significantly associated with increasing or decreasing risk of HCC (Arg-allele vs His-allele:OR=0.74,95%CI0.52-1.04,P=0.09;Arg/Arg vs His/His:OR=0.69,95%CI0.47-1.01,P=0.05;Arg/Arg vs Arg/His+His/His:OR=0.78,95%CI0.52-1.17,P=0.24).ConclusionXRCC1 Arg280His polymorphism may not be involved in HCC.

Key words:Hepatocellular carcinoma; X-ray repair cross-complementing group 1; Polymorphism; Meta-analysis

收稿日期：2014-08-04修回日期：2015-09-23編輯：樓立理

基金項目：國家自然科學基金(81160262)；廣西科學技術廳(桂科攻2011GXNSFD018032)

doi：10.3969/j.issn.1006-2084.2015.23.041

中圖分類號：R735.7； R181.23

文獻標識碼：A

文章編號：1006-2084(2015)23-4337-04