痰咳舒糖漿質量標準研究

何雄生 羅瑜 張遠華 肖俊強

痰咳舒糖漿質量標準研究

何雄生 羅瑜 張遠華 肖俊強

目的制訂痰咳舒糖漿的質量標準。方法采用薄層色譜法鑒別川貝母；采用紫外可見分光光度法(UV-VIS)測定貝母素乙的含量。結果薄層斑點清晰, 陰性樣品無干擾, 貝母素乙在0.05～0.35 mg呈良好的線性關系, 平均回收率為93.41%。RSD=2.23%。結論該方法準確、重復性好,可有效控制本制劑的質量。

痰咳舒糖漿；川貝母；貝母素乙；薄層色譜法；紫外可見分光光度法；質量標準

痰咳舒糖漿是本院名老中醫鄒志為的經驗處方。處方中含有桔梗、枇杷葉、川貝母、姜半夏、杏仁水、甘草等, 主治風熱咳嗽、痰多、咽喉腫痛、感冒及支氣管炎見上述證者。在臨床應用已有20年的歷史, 療效顯著并且銷量較大。為有效控制該制劑的質量, 保證臨床療效的穩定性, 作者對方中的川貝母進行薄層色譜(TLC)鑒別, 采用UV-VIS對制劑中的貝母素乙進行含量測定。

1 儀器與試劑

紫外可見分光光度計UV752, 貝母素乙對照品(供含量測定用, 購自中國藥品生物制品檢定所), 痰咳舒糖漿(100 ml/瓶,批號130510、130610、130710、130810、130910, 韶關市中醫院提供), 陰性樣品(韶關市中醫院制備), 所用試劑均為分析純, 水為去離子水。

2 川貝母的薄層定性鑒別

2.1 供試品溶液的制備 取本品100 ml, 加濃氨試液適量,使pH至11以上, 加氯仿提取2次,40 ml/次, 合并氯仿液,水浴蒸干, 殘渣加乙醇0.5 ml使溶解, 即得。

2.2 陰性樣品溶液的制備 按痰咳舒糖漿處方, 去掉川貝母, 按原工藝制備出缺川貝母的制劑, 同法制成陰性對照溶液。

2.3 對照藥材溶液的制備 取川貝母對照藥材2.5 g, 加濃氨試液使濕潤, 密封, 放置1 h, 加氯仿30 ml回流40 min, 濾過,濾液蒸干, 殘渣加乙醇0.5 ml使溶解, 即得。

2.4 貝母素乙對照品溶液的制備 取貝母素乙適量加乙醇制成1 mg/ml的對照品溶液。

2.5 TLC鑒別 按照TLC(《中國藥典》[1]2010年版一部附錄ⅥB)試驗, 分別吸取供試液、陰性對照溶液30 μl、對照藥材溶液15 μl、對照品溶液4 μl點于同一硅膠G薄層板上,以乙酸乙酯-甲醇-氨水-水(18∶2∶1∶0.1)為展開劑, 展開, 取出, 晾干, 噴以稀碘化鉍鉀試液與亞硝酸鈉乙醇試液,供試品在與對照品和對照藥材相應的位置上, 顯相同顏色的斑點[2]。結果見圖1。

圖1 川貝母薄層色譜圖(Fritillariae Cirrhosae Bulbus were identified by TLC.)

3 貝母素乙的含量測定

3.1 標準溶液的制備 準確稱取貝母素乙對照品10.00 mg,以三氯甲烷為溶劑定容至100 ml, 濃度為0.10 mg/ml, 搖勻,備用。

3.2 線性關系的考察 精密吸取對照品溶液(0.10 mg/ml) 0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 ml, 分別置25 ml量瓶中,各精密加入0.2 mol/L鄰苯二甲酸氫鉀緩沖溶液(取0.2 mol/L鄰苯二甲酸氫鉀溶液100 ml, 用0.2 mol/L NaOH溶液約50 ml調節pH值為5.0, 即得)5 ml, 再精密加0.03%溴百里香酚藍試液(取溴百里香酚藍0.03 g, 用1 mol/L NaOH溶液0.5 ml使溶解, 加水稀釋至100 ml, 即得)2 ml, 加三氯甲烷至刻度,劇烈振搖, 轉移至分液漏斗中, 放置45 min, 取三氯甲烷液,用干燥濾紙濾過, 取續濾液, 以相應試劑為空白, 照紫外可見分光光度法, 在412 nm的波長處, 用1 cm比色皿測定吸光度[3-7]。以吸光度為縱坐標, 貝母素乙質量為橫坐標, 繪制標準曲線, 得回歸方程：Y=2.091X+0.1870(r2=0.9964), 貝母素乙在0.05～0.35 mg內具有良好的線性關系。

3.3 精密度試驗 精密吸取濃度為0.1 mg/ml的貝母素乙對照品溶液0.20、0.30、0.50 ml, 依法處理, 重復測定6次, 以吸光度計算RSD值。實驗結果表明, 本儀器的精密度良好,各濃度對照品的RSD值均＜3.00%。

3.4 重復性試驗 取同一批號的樣品(批號130710)6份,按上述設定的方法進行平行試驗, 并依法進行測定貝母乙素的含量, RSD值為0.65%[8]。結果表明, 本方法的重復性良好。

3.5 穩定性試驗 對同一供試品溶液, 在0、10、20、30、40、50、60 min進行測定, 記錄貝母乙素的含量。RSD=2.65%, 表明供試品溶液在1 h內保持穩定。

3.6 加樣回收實驗 分別精密稱取已知含量的樣品(批號130910)約100 ml即0.00763 g, 共6份, 分別準確加入貝母乙素對照品溶液7.50 ml, 搖勻, 依法處理, 測定吸光值, 以相應試劑為空白, 按對照品的回歸方程進行計算, 回收率平均值為93.41%, RSD為2.23%[9-11]。見表1。

3.7 樣品測定 精密量取糖漿100 ml(n=6), 置具塞錐形瓶中, 加濃氨試液50 ml, 振搖, 靜置1 h, 加三氯甲烷-甲醇(4∶1)混合溶液50 ml, 置分液漏斗中, 振搖, 靜置2 h, 取三氯甲烷層, 用干燥濾紙濾過, 濾液蒸干, 殘渣加三氯甲烷使溶解[12]。精密量取2 ml樣品液, 置50 ml量瓶中, 照標準曲線項下的方法, 自“各精密加入0.2 mol/L鄰苯二甲酸氫鉀緩沖溶液(取0.2 mol/L鄰苯二甲酸氫鉀溶液100 ml, 用0.2 mol/L NaOH溶液約50 ml調節pH值為5.0, 即得)5 ml”起, 依法測定吸光度,從標準曲線上讀出樣品溶液中貝母素乙的重量(mg), 即得[13]。見表2。每100 ml痰咳舒糖漿含貝母乙素0.014 mg。

表1 加樣回收率結果(n)

表2 痰咳舒糖漿樣品中貝母乙素的含量測定結果(n)

4 討論

4.1 通過查找資料與反復試驗, 發現有關川貝母的TLC方法資料不多, 有些方法用于復方中藥制劑時, 各成分的分離效果不佳, 或有干擾, 或拖尾嚴重[14,15]。而本文所建立的川貝母的TLC方法分離效果好, 陰性對照無干擾, 不失為一個很好的方法。

4.2 制劑處方中川貝母屬于貴重藥材, 故對其生物堿代表成分貝母素乙進行含量測定[16]。采用紫外可見分光光度法,由本研究結果可見, 該測定方法快速、重復性和穩定性好,精密度、回收率均較高, 與TLC結合能很好地控制痰咳舒糖漿的內在質量。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部).北京：中國醫藥科技出版社,2010:10-15.

[2]中華人民共和國衛生部藥典委員會.中華人民共和國藥典中藥薄層色譜彩色圖集. 廣州：廣東科學技術出版社,1993：85-90.

[3]康廷國.中成藥薄層色譜鑒別.北京:人民衛生出版社,1995：386.

[4]張曉梅, 魏淑梅, 鄭翔.川貝半夏液質量標準的研究.醫學信息(旬刊),2009,1(12):260.

[5]柯穎川, 裴蕾.清肺止咳糖漿質量標準提高新探.中華現代中醫學雜志,2006,2(8):698-699.

[6]陳蔚琳, 漏德寶.暢聲口服液質量標準研究.中國藥房,2008,19(12):933-935.

[7]祝美華, 沈麗霞, 張新房.滴通鼻炎水質量標準研究.中成藥,2008,30(7):10-11.

[8]朱明恒, 湯大妹, 宋福坤, 等. 小兒健脾口服液的質量標準. 中國現代應用藥學,2007,24(6):503-505.

[9]劉向榮, 湯韶明. 桉葉止咳糖漿的質量標準研究.藥物分析雜志,2008,28(11):1915-1917.

[10]朱山寅.小柴胡沖劑的質量標準研究.基層中藥雜志,2002,1(16):23-25.

[11]張蘭珍, 樊曉霞, 郭亞健. 薄層掃描法測定蛇膽川貝液中貝母甲素、貝母乙素含量. 中國實驗方劑學雜志,1996(6):2-5.

[12]張玲, 黃夢嫻. 蛇膽川貝液中川貝母堿的含量測定. 廣西醫科大學學報,2002,19(6):854-855.

[13]魏其才. 蛇膽川貝液中川貝母的薄層檢識及其生物堿含量測定. 現代中藥研究與實踐,1993,7(4):24-25.

[14]梁海慧. 薄層掃描法測定蜜煉川貝枇杷膏中貝母素乙的含量.廣東藥學,2001,11(1):21-22.

[15]趙德永.4種川貝母的總皂甙, 總生物堿及西貝素的含量測定.中國中藥雜志,1994,19(2):71-72.

[16]張蘭珍, 樊曉霞. 薄層掃描法測定蛇膽川貝液中貝母甲素、貝母乙素含量. 中國實驗方劑學雜志,1996(6):2-5.

Research of quality standard for Tankeshu syrup

HE Xiong-sheng, LUO Yu, ZHANG Yuan-hua, et al. Shaoguan City Hospital of Traditional Chinese Medicine, Shaoguan512026, China

ObjectiveTo establish the quality standard for Tankeshu syrup.MethodsThin-layer chromatography (UV-VIS) was applied for identification of dulbus fritillariae cirrhosae, and ultraviolet visible spectrophotometry for content of peiminine.ResultsThin-layer had clear spots, without interference by negative samples. Peiminine showed fine linear relation in range of 0.05～0.35 mg, with the average recovery rate as93.41% and RSD=2.23%.ConclusionThis method has accuracy and good repeatability, and it can control the quality of Tankeshu syrup.

Tankeshu syrup; Bulbus fritillariae cirrhosae; Peiminine; Thin-layer chromatography; Ultraviolet visible spectrophotometry; Quality standard

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.16.192

2015-02-09]

512026 韶關市中醫院