EDTA-K2血漿替代血清行甲狀腺功能測定

賀淑巍 王旭

EDTA-K2血漿替代血清行甲狀腺功能測定

賀淑巍 王旭

目的探討乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)血漿行甲狀腺激素及促甲狀腺素(TSH)檢測的可行性。方法采用自身配對設計,隨機選取門診患者和健康體檢者43例取血清和EDTA-K2血漿樣本,于同一UniCel DxI800 Access化學發光儀進行指標測定,EDTA-K2血漿測定結果分別與血清測定結果做對比,運用配對t檢驗和Wilcoxon檢驗以及相關性分析,評價血漿與血清結果的差異以及相關性,并進行回歸分析最終確定血漿代替血清進行甲狀腺激素及TSH測定的可行性。結果血漿與血清的甲狀腺激素及TSH測定結果經比較,EDTA-K2血漿的甲狀腺激素及TSH測定結果與血清測定結果差異有統計學意義(P＜0.05)。相關分析顯示甲狀腺激素及TSH檢測結果EDTA-K2血漿與血清均具有高度正相關關系(r＞0.700)。結論EDTA-K2血漿適合甲狀腺激素及TSH的測定,但EDTA-K2血漿的甲狀腺激素及TSH測定結果需建立回歸方程將血漿值換算成血清值。

乙二胺四乙酸二鉀；血漿；血清；甲狀腺功能指標

DOI∶10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.17.063

近年來,隨著全自動化學分析儀的廣泛使用,為快速回報檢驗結果提供了技術保證,但目前血清做為常規檢測標本,其析出時間長,時達1～2 h,一方面影響檢驗結果報告速度,使患者等待檢驗報告的時間比較長,另一方面,血液凝固不好,容易造成分析儀器樣品針的堵塞,影響檢驗結果的準確性,為了改變這種狀況,能否用血漿代替血清。再一方面,偶有臨床抽取EDTA-K2血漿為標本,能否行甲狀腺功能測定,血漿中的纖維蛋白原和抗凝劑對甲狀腺激素及TSH的測定到底有無干擾。這一類的報道并不多見,也由于各檢測系統的試劑參數、操作系統有一定的差異而說法不一,對本實驗室是否能夠采用EDTA-K2血漿做標本提供指導的意義不大。本研究擬對比門診患者隨機采樣的不抗凝血清與抗凝EDTA-K2血漿樣本的甲狀腺激素及TSH的檢測指標,以探討EDTA-K2血漿行甲狀腺激素及TSH檢測的可行性。

1 材料與方法

1.1 材料 本院門診患者和健康體檢者43例,隨機取樣。按常規方法分別采血至2個真空玻璃試管中各3 ml,其中1管不抗凝,另外1管為EDTA-K2抗凝。抗凝血漿取血充分混勻后即刻離心分離血漿,不抗凝血清室溫放置1 h后血清析出離心分離血清供檢。

1.2 儀器與試劑 全自動化學發光免疫分析儀(美國貝克曼庫爾特公司)UniCel DxI800 Access。血清總三碘甲狀腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4)、TSH、游離三碘甲狀腺原氨酸(FT3)、游離甲狀腺素(FT4)檢測試劑均為原裝進口配套試劑

1.3 方法 為保證實驗結果的準確性及可比性,所有樣品有專人負責測定,儀器校準并用質控品做質控,將EDTA-K2血漿以及血清樣本放入同一UniCel DxI800 Access化學發光儀進行檢測。

1.4 統計學方法 用SPSS20.0統計學軟件處理數據,EDTA-K2血漿與血清的甲狀腺激素及TSH檢測結果為計量資料,經Kolomgorov-Smirnov檢驗,血清的T3、T4、FT3、FT4和EDTA-K2血漿的T3、T4、FT3為正態分布數據,以均數±標準差(±s)表示,實施t檢驗,用Pearson相關分析分析血漿與血清結果間的相關性,r＞0.700為高度正相關[1］；EDTAK2血漿和血清的TSH以及EDTA-K2血漿的FT4為偏態分布,以中位數表示,EDTA-K2血漿與血清的檢測結果的比較采用Wilcoxon檢驗,用Spearman相關分析分析EDTA-K2血漿與血清結果間的相關性,r＞0.700為高度正相關[1］。P＜0.05表示兩組間差異有統計學意義且高度相關,采用回歸模式建立回歸方程。

2 結果

EDTA-K2血漿與血清進行甲狀腺激素及TSH測定并將結果進行統計學處理。見表1。

表1 EDTA-K2血漿與血清甲狀腺功能五項測定結果對比[±s,M(P25,P75)］

表1 EDTA-K2血漿與血清甲狀腺功能五項測定結果對比[±s,M(P25,P75)］

注∶兩種樣本比較,P＜0.05

項目 例數 血清組 血漿組 t/Z 相關系數r T3 43 1.79±0.37 2.61±0.56 14.335 0.747 T4 43 128.06±28.16 139.34±31.33 7.79 0.955 FT3 43 5.03±1.48 7.85±1.54 29.81 0.916 FT4 43 14.47±5.92 14.32(11.66,17.15) -4.637 0.939 TSH 43 1.01(0.08,2.32) 0.76(0.03,1.96) -5.714 0.991

2.1 資料表明的結果 EDTA-K2血漿與血清結果比較可見,甲狀腺激素及TSH的水平差異有統計學意義(P＜0.05),T3、T4、FT3、FT4血漿值高于血清值,TSH血漿值低于血清值。相關分析顯示甲狀腺激素及TSH檢測結果血漿與血清均具有高度正相關關系。

2.2 回歸方程計算結果 血清T3濃度(Y)與EDTA-K2血漿T3濃度(X)的回歸方程為Y=0.488X+0.513,(r2=0.547)；血清T4濃度(Y)與EDTA-K2血漿T4濃度(X)的回歸方程為Y=0.858X+8.505,(r2=0.909)；血清FT3濃度(Y)與EDTA-K2血漿FT3濃度(X)的回歸方程為Y=0.880X-1.879,(r2=0.835)；血清FT4濃度(Y)與EDTA-K2血漿FT4濃度(X)的回歸方程為Y=0.797X+1.750,(r2=0.926)；血清TSH濃度(Y)與EDTA-K2血漿TSH濃度(X)的回歸方程為Y=1.237X-0.006X2+0.028,(r2=0.996)。

3 討論

UniCel DxI800 Access分析儀是將包被單克隆抗體的順磁性顆粒和待測標本加入反應管中標本中的抗原與微粒子表面的抗體結合,再加入堿性磷酸酶標記的抗體,經溫育后形成固相包被抗原-抗體-酶標記抗體復合物；在電磁場中洗滌分離,再加入底物發光劑,發光劑被結合在磁性離子表面的堿性磷酸酶的催化下迅速去磷酸基因,生成不穩定的中介體,中介體分解,發射光子。為快速準確的向臨床提供檢測結果。本文對比測定了EDTA-K2血漿與血清的甲狀腺激素及TSH,并將檢驗結果進行統計學分析。本實驗顯示,EDTA-K2血漿甲狀腺激素及TSH與血清結果差異有統計學意義(P＜0.05),T3、T4、 FT3、FT4血漿高于血清,TSH血漿低于血清。Glendenning[2］報道,在樣本、試劑混合液中加入過量EDTA,導致金屬陽離子螯合,影響化學發光反應中堿性磷酸酶標記的活性。而本實驗EDTA-K2血漿值與血清值存在差異,推想可能由于樣本中的EDTA-K2影響化學發光反應中堿性磷酸酶標記的活性。另外觀察本實驗發現∶EDTA-K2血漿的T3、T4、FT3、FT4、TSH與血清結果差異均有統計學意義(P＜0.05),且高度正相關,這些項目可以用血漿代替血清,但需要建立回歸方程將血漿值換算成血清值或者建立血漿參考體系。但目前的參考體系源于血清,如果再建立血漿參考體系就會造成2種參考值在臨床同時使用,容易產生混亂[3］。鑒于此種原因,認為可以將EDTA-K2血漿的T3、T4、FT3、FT4、TSH的測定結果利用回歸方程轉換為血清值,然后以血清值的形式發放報告。為了證實此方法的可靠性,用回歸方程轉換后的43例EDTA-K2血漿的T3、T4、FT3、FT4、TSH的血漿值與血清值同時進行配對樣本t檢驗和Wilcoxon檢驗,結果差異無統計學意義(P＞0.05)。

綜上所述,EDTA-K2血漿適合甲狀腺激素及TSH項目的測定,但EDTA-K2血漿的T3、T4、FT3、FT4、TSH的測定結果需要建立回歸方程將血漿值換算成血清值。

[1]胡良平.檢驗醫學科研設計與統計分析.北京:人民軍醫出版社,2004:150.

[2]Glendenning P.Preanalytical factors in the measurement of intact parathyroid hormone with the DPC IMMULITE assay.Clin chem,2002,48(3):566-567.

[3]徐克,王小青.肝素抗凝血漿用于急診生化檢驗的探討.上海醫學檢驗雜志,2002(17):38-39.

2015-04-21］

∶450052 鄭州大學第一附屬醫院核醫學科

∶王旭