乳腺癌中CDC6蛋白表達意義

齊攀 曹興玥 金艷 張冰 謝振斌

乳腺癌中CDC6蛋白表達意義

齊攀 曹興玥 金艷 張冰 謝振斌

目的探討乳腺癌組織中細胞分裂周期蛋白6(CDC6)蛋白表達, 分析CDC6蛋白表達與雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)、人類表皮生長因子受體-2(HER-2)、p53蛋白表達的關系和意義。方法采用免疫組化方法檢測73例乳腺癌石蠟標本中CDC6蛋白的表達, 分析其與ER、PR、HER-2、p53的關系。結果CDC6主要表達于細胞漿及細胞核中, 陽性表達率：乳腺癌中65.8%, 正常乳腺組織中40.0%, 表達差異具有統計學意義(P＜0.05)。CDC6蛋白表達與HER-2表達呈正相關。結論CDC6蛋白表達與乳腺癌關系密切, 檢測其表達對進一步了解乳腺癌的生物學行為及判斷預后有一定價值。

乳腺癌; 細胞分裂周期蛋白6；雌激素受體；孕激素受體；人類表皮生長因子受體-2

乳腺癌是婦女常見的惡性腫瘤之一, 發病率呈逐年上升趨勢, 研究發現它已成為危害婦女健康的頭號殺手。全世界每年約有120萬乳腺癌患者。乳腺是性激素依賴器官, 其生長、發育和細胞的增殖均受雌激素和孕激素的影響[1]。細胞分裂周期蛋白6(cell division cycle6, CDC6)位于人類染色體17q21.3, 它的表達受到轉錄因子E2F家族的控制, 是人類DNA復制起始物中必不可少的[2]。在G1期如果細胞中CDC6水平下調, 則細胞不能進入S期, 后來發現, 如果CDC6受到干擾, 表達下調, 則會阻滯細胞增殖及促進凋亡。

本文通過免疫組化方法來研究CDC6蛋白在乳腺癌中的表達, 探討其與已知病理指標的相關性, 從而發現CDC6蛋白在乳腺癌中的意義, 為乳腺癌患者早診早治及未來的個體化精準治療尋找適合的靶的?，F報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取新鄉市中心醫院既往73例乳腺癌石蠟組織塊,25例正常乳腺組織標本(來自瘤旁正常乳腺組織)。其中,73例乳腺癌患者中位年齡56歲,65例為浸潤性非特殊型癌,6例為浸潤性特殊型癌,2例為導管內癌。25例乳腺組織正常者中位年齡45歲, 所取標本距病灶最小距離2.5 cm, 中位距離3.5 cm, 經病理證實均為正常乳腺組織(無腫瘤浸潤)。

1.2 實驗方法及結果判斷方法 采用組織切片免疫組化方法： CDC6(11640-1-AP)兔抗人多克隆抗體為美國PTG.LAB公司生產。免疫組化染色按S-P試劑盒操作說明進行。染色過程中設陽性和陰性對照。每例乳腺癌標本均已有HE染色切片(病理既往存放), 并進行組織學分級(SBR分級標準)。CDC6以胞核和胞漿出現清晰的棕黃色顆粒為陽性, 采用半定量積分法判斷結果。

1.3 統計學方法 采用SPSS13.0統計學軟件進行數據分析。計數資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗；相關性分析采用Spearman相關分析。P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 CDC6在乳腺正常組織及乳腺癌中的表達情況 CDC6在乳腺癌組織中的陽性表達為48例, 陰性為25例, 陽性率65.8%；正常組織中陽性表達為10例, 陰性為15例, 陽性率為40.0%, 兩者陽性率相比差異有統計學意義(P＜0.05)。

2.2 CDC6表達與乳腺癌臨床指標的關系 HER-2陽性及陰性患者CDC6表達差異有統計學意義(P＜0.05), CDC6蛋白與HER-2呈正相關(r=0.737, P＜0.05)；p53陽性表達患者中CDC6陽性率為71.4%(30/42), 陽性及陰性患者CDC6表達差異無統計學意義(P＞0.05)。見表1。

表1 CDC6表達與乳腺癌各臨床指標的關系(n)

3 討論

和人類有關的更多的CDC6致瘤作用相繼被發現, 最早的在非小細胞肺癌中, 作者發現hCDC6和hCdt1蛋白和p53蛋白在腫瘤的生長中有協同效應。把腫瘤生長的不同階段通常稱為增生, 不典型增生, 惡性腫瘤, 這樣就為發現CDC6蛋白在腫瘤的增長中是如何起作用的提供條件, 基因的擴增導致了腫瘤的發生, 過表達hCDC6的細胞DNA發生損傷, 基因重新復制, 阻滯了細胞的衰老和凋亡[3]。CDC6過表達導致老鼠上皮細胞過度增生至癌變, 相同情況在人類上皮細胞中也會發生。作者發現老鼠及人類上皮細胞過度增生至癌變與腫瘤抑制基因EMT有關, 而CDC6蛋白過表達, 誘發EMT基因的沉默及EMT蛋白的減少[4]。這可能就是CDC6與癌癥有關的機制。CDC6蛋白在宮頸癌中高表達, 促進了宮頸癌的發生發展, 其可作為宮頸癌檢測的標志物[5]。CDC6蛋白在甲狀腺癌中也是增高的, 靶向CDC6增殖, 舌癌就有可能根治[6]。本研究中, 乳腺癌組織中CDC6蛋白表達較正常乳腺組織中多, 這驗證了CDC6過表達促進癌癥發展的機制。

HER-2即人類表皮生長因子受體-2,20世紀80年代, HER-2就已被發現, 該基因位于17號染色體q21上, 編碼p185跨膜蛋白, 其對上皮細胞的生長、分化、存活具有調控作用, 在正常體上皮細胞均有表達, 但無擴增。異常擴增的HER-2可以促進存活, 抑制凋亡, 促進腫瘤新生血管的生成, 增強瘤細胞的侵襲力。HER-2蛋白已成為判斷腫瘤惡性程度的重要標志物。CDC6基因及HER-2基因同位于17q21, 有協同作用, 本研究發現CDC6與HER-2有正相關性, HER-2蛋白表達增強, CDC6蛋白表達增強。這再次證實CDC6預示不良預后, 其可以成為監測乳腺癌病情、評價療效的重要分子生物學指標。通過抑制CDC6的表達可以選擇性抑制腫瘤細胞的增殖, CDC6有可能成為一種有前景的治療乳腺癌的突破點。這些意義是與本次實驗目的相一致的。

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10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.15.023

2015-05-04]

453002 新鄉市中心醫院頭頸乳腺科(齊攀)；新鄉醫學院組胚教研室(曹興玥 金艷)；新鄉市中心醫院兒科(張冰)；新鄉市中心醫院 (謝振斌)