促衰變因子在三陰性乳腺癌中的表達及其對預后的影響*

李鐵軍 張海燕 姜 偉

促衰變因子在三陰性乳腺癌中的表達及其對預后的影響*

李鐵軍①張海燕②*姜 偉①

目的：探討長度促衰變因子(DAF，CD55)在三陰性乳腺癌(TNBC)中的表達及與預后的關系。方法：用免疫組化S-P法檢測100例TNBC及50例TNBC旁乳腺組織中CD55的表達；結合臨床病理和隨訪資料，建立Cox模型進行預后分析。結果：CD55在TNBC中的表達率為56.0%，在癌旁乳腺中的表達率為8.0%，兩者之間差異有統計學意義(x2=32.0，P＜0.05)。CD55的表達與腫瘤大小、臨床分期及腋下淋巴結轉移均具有顯著相關(x2=7.404，x2=8.688，x2=4.802；P＜0.05)，而與年齡和組織學分級無顯著相關。多因素分析顯示，年齡、臨床分期、CD55及腋淋巴結轉移情況4項指標是影響患者DFS的獨立危險因素；臨床分期及腋淋巴結轉移情況兩項指標是影響患者OS的獨立危險因素。結論：CD55的高表達可能參與了TNBC的發生、發展過程，并與預后有相關性，提示CD55的表達可能成為判斷TNBC浸潤進展及預后的指標之一。

三陰性乳腺癌；促衰變因子；免疫組織化學；預后

[First-author's address]The Department of Education, The Center Hospital of Cangzhou, Cangzhou 061001, China.

三陰性乳腺癌(triple-negative breast cancer，TNBC)是指雌激素受體、孕激素受體和人表皮生長因子受體-2的表達均呈陰性的乳腺癌，其被認為是一種獨特的病理類型。TNBC易轉移、復發、侵襲性高以及預后差，因此，對于其發生、發展及預后的研究成為熱點。促衰變因子(decay accelerating factor，DAF)又稱CD55，是一種補體調節蛋白，能夠防止補體因子在細胞表面的蓄積，保護宿主細胞免遭補體攻擊，在腫瘤中發揮免疫逃避的作用。本研究探討CD55在TNBC這一特殊類型乳腺癌中的表達，并對CD55與TNBC預后的關系進行分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2006年8月至2007年10月在滄州市中心醫院住院治療的100例TNBC患者的蠟塊及隨訪資料，患者均為女性；年齡25～72歲，平均41.8歲；臨床分期：Ⅰ期23例，Ⅱ期50例，Ⅲ期27例；組織學分級：Ⅰ級20例，Ⅱ級54例，Ⅲ級26例；腋下淋巴結轉移患者62例。同時選取50例癌旁乳腺組織作為對照。所有患者均接受手術治療以及放化療等綜合治療。

1.2 納入與排除標準

(1)納入標準：經病理檢測雌激素受體(estrogenreceptor，ER)、孕激素受體(progesterone receptor，PR)及人表皮生長因子受體-2(human epidermal receptor-2，HER-2)均為陰性的TNBC女性患者。

(2)排除標準：經病理檢測ER、PR及HER-2其中任意一項為陽性的非TNBC女性患者。

1.3 隨訪

本組所有乳腺癌患者均進行了隨訪，隨訪率為100%。隨訪起始時間為抗癌治療開始日，觀察終止時間為2014年7月。預后評價指標為患者的5年無病生存時間(DFS)及總生存時間(OS)。隨訪方式為門診定期復查和電話隨訪相結合。

1.4 免疫組化

采用免疫組化S-P法，以S-P免疫組化試劑盒說明書為依據操作，鼠抗人CD55單克隆抗體試劑盒購自上海優寧維生物科技有限公司。

1.5 判定指標

CD55的判斷：CD55蛋白主要表達于細胞漿及細胞膜，以棕黃色顆粒為特征。采取以每一切片中隨機選取10個高倍鏡視野及每個高倍鏡視野計數100個細胞的方法判定。染色強度等級：淺黃染為1分，中度黃染為2分，強度黃染為3分；陽性細胞的百分率：陽性細胞≤5%為0分，5%～25%為1分，26%～50%為2分，＞50%為3分；將兩者的結果綜合分析：0分計為陰性(-)，1～2分計為弱陽性(+)，3～4分計為中度陽性(++)，5～6分計為強陽性(+++)；將CD55蛋白的(-)、(+)組計為低表達組，將CD55蛋白的(++)、(+++)組計為高表達組。

1.6 統計學方法

采用統計學分析軟件SPSS 17.0軟件包進行統計學處理，計數資料應用x2檢驗，用Kaplan-Meier法描述生存曲線，組間比較采用Log-rank法進行，用Cox模型進行多因素分析，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 CD55蛋白在癌旁組織及癌組織中的表達

CD55蛋白在TNBC組織中的表達率為56.0%，在癌旁乳腺組織中的表達率為8.0%，兩者之間差異有統計學意義(x2＝32.0，P＜0.05)，見表1。

表1 CD55在乳腺不同組織類型中的表達

2.2 CD55蛋白表達與TNBC臨床病理特征之間的關系

在TNBC中，CD55的表達腫瘤大小、臨床分期及腋下淋巴結轉移均顯著相關，差異有統計學意義(x2=7.404，x2=8.688，x2=4.802；P＜0.05)，而與年齡及組織學分級無顯著相關，見表2。

表2 CD55蛋白在TNBC中的表達與臨床病理特征的關系

2.3 臨床因素對TNBC患者預后的影響

影響DFS的單因素分析顯示，年齡、臨床分期、腋下淋巴結轉移及CD55的蛋白表達與TNBC預后有關，差異有統計學意義。影響OS的單因素分析顯示，臨床分期、腋下淋巴結轉移及CD55的蛋白表達與TNBC預后有關，差異有統計學意義，見表3。

表3 影響TNBC患者預后的單因素分析

表4 影響TNBC患者DFS的多因素分析

表5 影響TNBC患者OS的多因素分析

2.4 多因素分析

將Log-rank檢驗篩選到的對TNBC生存有影響的各個因素再進行多因素Cox模型分析，入選條件為P＜0.1。結果顯示：年齡、臨床分期、CD55的蛋白表達及腋淋巴結轉移情況指標是影響患者DFS的獨立危險因素；臨床分期及腋淋巴結轉移情況兩項指標是影響患者OS的獨立危險因素，見表4、表5。

3 討論

TNBC是具有獨特的生物學及臨床特征的乳腺癌亞型，其缺乏臨床乳腺癌治療的靶點，不能從內分泌治療及靶向治療中獲益，其預后差、進展快、生存時間短及易于侵襲轉移。目前，手術和化療是其主要治療手段，一旦復發預后極差，因此，研究TNBC意義重大。CD55是一種補體衰變加速因子，與C3轉化酶結合，阻止了C3b的沉積，并抑制了攻膜復合物的形成，從而使腫瘤細胞逃脫補體的攻擊。CD55在保護癌癥干細胞免受免疫系統攻擊方面可能起到重要作用[1]。Ikeda等[2]采用免疫組化的方法檢測到CD55在乳腺癌中高表達，故可作為判斷預后的指標。本研究探討了CD55在TNBC這一特殊類型乳腺癌中的表達及其對預后的影響。

楊超等[3]通過應用免疫組化法檢測49例乳腺癌患者，乳腺癌上皮細胞的陽性表達率為65.3%，其陽性率隨乳腺癌TNM分期的增高、腫塊大小的增大及腋下淋巴結轉移數目的增多而增高。徐昶等[4]應用免疫組化方法檢測71例直腸癌組織及30例正常結直腸組織中CD55的表達情況，得出直腸癌組織CD55表達水平顯著高于正常腸黏膜組織，浸潤前沿區域間質CD55高表達患者復發和(或)轉移率(64.5%)顯著高于低表達患者(32.5%)。何政等[5]應用實時熒光定量聚合酶鏈反應(qRT-PCR)，免疫組化及Western blot檢測CD55在12例胰腺癌及對應癌旁組織中的表達，三種方法均顯示CD55在胰腺癌組織中的表達水平明顯高于癌旁組織。白雪等[6]檢測了CD55蛋白在20例正常卵巢組織、20例卵巢良性腫瘤組織及60例卵巢上皮性癌組織中的表達，CD55蛋白在卵巢上皮性癌組織中的表達明顯高于正常卵巢組織和卵巢良性腫瘤組織，并且CD55蛋白的表達隨組織病理分級及病理分期的升高而升高。本研究中發現50例癌旁乳腺組織CD55陽性率為23.8%，而CD55在TNBC中的表達率為62.5%，與以上結論類似，說明CD55在TNBC中相對高表達，對TNBC的發生及發展可能有重要影響。本研究結果還顯示：CD55的表達與腫瘤大小、臨床分期及腋下淋巴結轉移均顯著相關，提示隨著腫瘤嚴重程度進展及侵襲能力的加強，CD55蛋白表達程度隨之增加，說明CD55越是高表達，腫瘤惡性度越高，越容易出現浸潤和轉移。這與張青俊等[7]在喉癌方面的相關性研究相似。

本研究中單因素及多因素分析顯示，CD55成為判斷TNBC患者不良預后的重要因素。眾多研究證明了CD55在胃癌、結直腸癌、甲狀腺癌及乳腺癌等癌組織上存在CD55過表達的現象，而且與腫瘤不良的預后有關[8-11]。Ikeda等[2]預后分析結果顯示，腫瘤大小和CD55的表達是乳腺癌的獨立預后因素，而楊超等[3]生存曲線顯示，CD55表達強陽性患者遠期生存率明顯低于CD55表達陰性患者，且隨著CD55表達的增強，患者發生遠處轉移的概率也隨之增大，與本研究在TNBC中的預后分析結論相似。因此提示CD55可能與TNBC的發生及發展密切相關，CD55可能是影響TNBC預后的因素，檢測CD55在TNBC組織中的表達可以作為判斷患者預后的分子標志。

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[2]Ikeda J,Mofii E,Liu Y,et a1.Prognostic significance of CD55 expression in breast cancer[J]. Clin Cancer Res,2008,14(15):4780-4786．

[3]楊超,李杰,劉運江.乳腺癌組織中CD55的表達及其與預后的關系[J].中國老年學雜志,2013,33(9):2004-2006.

[4]徐昶,韓少良,吳秀玲,等.直腸癌浸潤前沿CD97與其配體CD55的表達及預后影響[J].浙江醫學,2010, 32(9):1311-1314,1317.

[5]何政,王敏,田銳,等.CD55在胰腺癌中的表達及其意義[J].中國普通外科雜志,2011,20(9):993-995.

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[7]張青俊,胡俊蘭,尚小玲,等.CD55在喉癌組織中的表達及其臨床意義[J].中國老年學雜志,2010,30(21): 3074-3076.

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Research on protein expression of CD55 in triple-negative breast cancer and its effect on prognosis/

LI Tie-jun, ZHANG Hai-yan, JIANG Wei// China Medical Equipment,2015,12(12):41-44.

Objective:To investigate the expression of CD55 in triple-negative breast cancer (TNBC) and its correlations with prognosis.Methods:The expressions of CD55 was detected by immunohistochemistry Streptavidin-Peroxidase method in 100 cases of triple-negative breast cancer and 50 cases of adjacent-carcinoma tissues, with clinical and pathological features and follow-up data, the Cox model analysis was established and to analyze the prognostic factors.Results:The positive expression of CD55 was 56.0% in the tissues from triple-negative breast cancer, whereas its positive rate was 8.0% in the corresponding adjacent breast tissues, with statistical significance (x2=32.0, P＜0.05). The expression of CD55 was significantly related with tumor size, clinical stage and axillary lymph node metastases (x2=7.404, x2=8.688, x2=4.802; P＜0.05); the expression of CD55 did not show correlation to age, and histologic grade. Multivariate analysis showed that the age, clinical stage, CD55 protein expression and axillary lymph node metastasis were the independent risk factors affecting the 5-year disease-free rate of patients and that clinical stage and axillary lymph node metastasis were the independent risk factors affecting the 5-year overall rate of patients.Conclusion:The expression of CD55 might be related to the development and prognosis of triple-negative breast cancer. The expression of CD55 may be used as one of the indicators in determining the progress and prognosis of TNBC.

Triple-negative breast cancer; Decay accelerating factor; Immunohistochemistry; Prognosis

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2015.12.013

1672-8270(2015)12-0041-04

R737.9

A

2015-03-18

滄州市科學技術研究項目(131302105)“凋亡抑制因子Livin與抑癌基因PTEN在三陰性乳腺癌中的表達及其判斷乳腺癌預后價值的研究”

①滄州市中心醫院教學處 河北 滄州 061001

②滄州醫學高等專科學校 河北 滄州 061001

*通訊作者：czyxjy001@163.com

李鐵軍,男,(1979- ),本科學歷，副主任護師。滄州市中心醫院教學處，中國醫學裝備協會會員，河北省護理學會手術室專業委員會委員，研究方向：護理管理、潔凈手術部規范化管理及臨床教學。