血脂異常血瘀證患者血液流動性和流變性觀察*

趙 浩 劉劍剛 雷 燕

血脂異常血瘀證患者血液流動性和流變性觀察*

趙 浩1，2劉劍剛1,#雷 燕3

目的：應用計算機血液流變學可視化技術(MC-FAN)觀察血脂異?；颊哐毫鲃有?，探討血脂異常血瘀證患者血液流動性與中醫血瘀證之間的關系。方法：98例血脂異常患者，按照中醫辯證分型分為血瘀證組(n=50)和非血瘀證組(n=48)，另設健康人群為對照組(n=29)。平行測定各組血脂指標總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白-膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-C)、極低密度脂蛋白-膽固醇(VLDL-C)以及血液流變學指標全血表觀粘度(BV)、血漿粘度(PV)、紅細胞壓積(HCT)、紅細胞聚集指數(EAI)、紅細胞變形指數(EDI)、血漿纖維蛋白原(Fib)、血小板聚集率(PTGT)和血小板黏附率(PAdT)，并利用MC-FAN觀察血液流動時間(TT)。結果：與對照組比較，血瘀證組和非血瘀證組患者各血脂指標水平均顯著升高(P<0.01)，但兩患者組間差異無統計學意義(P>0.05)。血瘀證患者(25μl、50μl、75μl、100μl)血液的TT分別為21.48±7.19s，52.92±18.72s，94.11±33.00s和164.60±65.20s，較非血瘀證組患者(17.70±4.14s、40.84±14.88s、69.90±27.76 s、110.06±47.24s)均顯著延長(P<0.01)。三組間血液流變學各指標差異均無統計學意義(P>0.05)。結論：血脂異常血瘀證患者的血液流動時間顯著延長。

血脂異常；血瘀證；血液流動時間；計算機可視化技術

日本MC-FAN株式會社研制的血液流動性可視化檢測儀(Micro Channel Array Flow Analyzer，MC-FAN)，利用硅晶片模擬人體內微血管，通過計算機可視化技術，直接觀察血液流動狀況和計量血液流動時間(Transiting Time，TT)，同時通過LED顯示器實時觀察血液流動時紅細胞、白細胞和血小板等血液成分的流動[1]，較傳統血液流變學指標檢測更直觀、更形象[2-5]。本研究運用該儀器和技術觀察血脂異常(Dyslipidemia)血瘀證患者的血液流動性，同時測量宏觀血液流變學指標，旨在了解血脂異常血瘀證患者的血液流動性和流變性變化，為臨床防治和研究提供資料和方法。

1 資料與方法

1.1 對象與分組

選擇2007-05-2008-01在西苑醫院就診的血脂異?；颊?8例，按照血瘀證的中醫辨證標準分為血瘀證組(n=50，參照《中藥新藥臨床研究指導原則》[6]中的血瘀證有關證候，包括胸脅脹悶、胸痛、舌質紫暗或有瘀斑等)和非血瘀組(n=48，肝腎陰虛、脾腎陽虛型等證候患者)；另選體檢健康人群作為對照組(n=29)。三組間年齡、性別差異無統計學意義(P>0.05)，兩病例組病程和合并癥差異亦無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 對象納入和排除標準

血脂異常病例的診斷參照《中國成人血脂異常防治指南》[7]，并為近2個月未服用降脂藥物、非妊娠期、年齡20-85歲者。排除合并糖尿病、甲亢等內分泌及代謝系統疾病以及不穩定型心絞痛、心肝腎功能不全等嚴重疾病患者。

健康者納入參照中華醫學會制定的健康標準建議[7]，對本次檢測均知情并簽署知情同意書。

1.3 檢測指標和方法

1.3.1 血脂測定：采集空腹外周靜脈血2ml，離心分離血清。采用酶法測定總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)；采用免疫比濁法測定高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)和極低密度脂蛋白膽固醇(VLDL-C)。所用儀器為全自動生化儀(RX-2000型)，由美國TECHNICON公司生產。TC檢測試劑盒(批號：180131)和TG檢測試劑盒(批號：220451)購自北京中生北控生物科技股份有限公司；HDL-C檢測試劑盒(批號：￡409612)、LDL-C檢測試劑盒(批號：￡409261)、VLDL-C檢測試劑盒(批號：￡409532)均購自北京利德曼生化技術有限公司。

1.3.2 TT測定：采用MC-FAN KH-6型計算機可視化檢測儀[日本エムシー(MC-FAN)研究所提供]。取空腹外周靜脈血2ml，肝素抗凝，1h內完成檢測。操作流程：排空儀器壓力水管中的空氣，檢測生理鹽水通過的時間(一般控制在21.7±1.57s)；向模擬毛細血管裝置內注入100μl抗凝血樣，儀器自動加樣25μl、50μl、75μl和100μl流經模擬毛細血管裝置，記錄所用時間(TT)，并自動打印結果。檢測儀彩色顯示器上同時實時呈現血液流經模擬毛細血管圖像。

1.3.3 血液流變學指標測定：同TT測定制備抗凝血樣。(1)紅細胞聚集指數(Erythrocyte Aggregation Index，EAI)，儀器為LBY-BX2型紅細胞功能激光測定儀(北京普利生儀器有限公司生產)，采用光密度法測定。將0.4ml血樣置于圓錐板測試杯中，600s-1運行10s使紅細胞解聚，然后停止運行100s，使紅細胞重新聚集，計算EAI。(2)紅細胞變形指數(Erythrocyte Deformity Index，EDI)，檢測儀器亦為LBY-BX2型紅細胞功能激光測定儀(北京普利生儀器有限公司生產)，采用激光衍射法檢測。紅細胞懸浮液采用15%聚乙烯吡咯烷酮K-30(PVP，北京化學試劑公司生產，批號：060826，pH=7.4)，將紅細胞懸浮其中，測試剪切率由100s-1-11 500s-1不斷增加時，紅細胞形態由圓形逐漸被拉長成橢園形，計算機自動計算EDI。(3)血小板聚集率(Platelet Aggregation， PAgT)，LBY-NJ2型血小板聚集儀(北京普利生儀器有限公司生產)，采用比濁法檢測。按常規方法檢測1min、3min、5min PAgT。血小板聚集誘導劑為二磷酸腺苷(ADP，批號：04P01，由美國Biopool International公司生產，誘聚濃度2mM)。(4)血小板黏附率(Platelet adhesion， PAdT)，檢測儀器為XSN-RII型血小板黏附測定儀(江蘇省無錫電子儀器二廠生產)，采用旋轉玻球法，按常規方法測算黏附率。(5)血液表觀黏度(Blood Viscosity，BV)，檢測儀器為LBY-N6型全血黏度測定儀(北京普利生儀器有限公司生產)，采用錐-板法測定。測定全血在1.0s-1、5.0s-1、10.0s-1、35.0s-1、120.0s-1剪切率下的黏度。(6)血漿黏度(Plasma Viscosity，PV)采用毛細管法按常規方法測定。(7)血漿纖維蛋白原(Fibrinogen，Fib)濃度，采用凝血酶衍生法(Von clauss)，按常規方法測定。(8)紅細胞壓積(Hematocrit，HCT)采用毛細管法測定。

1.4 統計學處理

2 結 果

2.1 各組血脂水平比較

三組間LDL-C、HDL-C差異無統計學意義(P>0.05)，三組間TC、TG和VLDL-C差異有統計學意義(P<0.01)。血瘀證組和非血瘀證患者TC、TG和VLDL-C較對照組升高，差異有統計學意義(P<0.05或P<0.01)，而血瘀證組和非血瘀證組以上指標差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

2.2 各組TT比較

三組間不同血樣量的TT差異均有統計學意義(P<0.01)。血瘀證組患者25μl、50μl、75μl和100μl的TT值較對照組和非血瘀證組增加，差異有統計學意義(P<0.01)，而非血瘀證組與對照組TT值差異無統計學意義(P>0.05)。見圖1、表2。

2.3 各組血液流變學指標比較

單因素方差分析顯示，三組間各血流變指標測值差異均無統計學意義(P>0.05)，見表3、表4。

表1 各組血脂水平比較

注：與對照組比較，1)P<0.05,2)P<0.01

表2 各組TT比較

注：與對照組比較，1)P<0.01；與非血瘀證組比較，2)P<0.01

表3 各組不同剪切率下BV和PV比較

表4 各組EAI、EDI、HCT、ESR、PagT、PadT、Fib比較

[本文圖1見封4]

3 討 論

隨著國民生活水平明顯提高、飲食結構和習慣發生改變，我國血脂異常的發生率正逐年上升[8]。血脂異?；颊哂捎谥愇镔|在血漿中沉積，可能導致血液流速減慢，還可引起氧化應激損害和動脈血管功能紊亂[9]；同時，血脂異常也是糖尿病的繼發癥，大約40%的糖尿病患者存在脂代謝紊亂[10]。血脂異常在中醫屬于“痰濁”、“血瘀”范疇，主要原因是飲食肥甘厚味，腎之陰陽俱虛所致。中醫的血脂異常病機分為虛實兩類，“實”主要指血瘀、痰濁，“虛”則可分為陰虛、陽虛(包括氣虛)。但無原發病的血脂異常患者并無明顯癥狀和異常體征，往往在進行有關生化檢查時偶然被發現。這種隱蔽性造成了動脈粥樣硬化等疾病的發生發展。

為提高血脂異常檢出率，近年來的新技術和新方法不斷呈現。MC-FAN即為新方法之一，它可以通過血液流動性的可視化技術檢測血脂異?；颊咴缙谘髯兓?，進而評估血脂異?；颊叩奈ｋU性及其嚴重程度[11，12]。本文采用該技術檢測分析血脂異常血瘀證患者血液流動時間及血流變狀態，為相關疾病的診療觀察提供新的指標和方法。已有研究者[13]觀察到血脂異?；颊甙准毎钚陨撸^容易黏附在毛細血管內壁上，阻礙血液流動。還有文獻報道，血瘀證患者血脂譜較非血瘀證患者顯著升高[14]。

本研究結果顯示，血脂異常血瘀證患者4種血樣量血流時間與對照組和與非血瘀證患者比較均減慢。提示采用血液流動性計算機可視化分析方法可對血脂異常中醫證候進行量化，將中醫血瘀證與血液流動性可視化指標進行關聯分析，促進血脂異常血瘀證證候的客觀化。也是未病防治研究和血脂異常早期判別值得借鑒的方法。

(本課題儀器操作和圖像處理得到日本エムシー研究所市橋裕一工程師和北京咸通佳儀科技發展有限公司咸大元、陳亦舟工程師的指導和幫助，謹致謝忱！)

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本文第一作者簡介：

趙 浩(1975-)，男，漢族，主治醫師，碩士研究生，研究方向：心腦血管疾病的中西醫結合治療

1 劉劍剛，何良志，王丹巧，等. 血液流變性的可視化測定方法及臨床應用[J]. 微循環學雜志，2005，15(4):74-75，79.

2 劉劍剛，王丹巧.第十二屆日本血液流變學學術會議概要[J].中國血液流變學雜志，2006,16(3):495-496.

3 趙 浩，劉劍剛，雷 燕.血脂異?；颊哐毫髯儗W可視化檢測與血脂、炎癥因子的相關性分析[J].中國體視學與圖像分析，2014，19(3):310-319.

4 劉劍剛, 王丹巧，趙 浩，等. 血液流動性的計算機可視化測定及其技術應用[J]. 現代科學儀器, 2007, (6):78-81.

5 劉劍剛，海 鴻，汪曉芳，等.應用血液流動性可視化測定裝置觀察高脂血癥患者血液流動性的變化[J].中國微循環，2008，12(1)：47-50．

6 鄭莜萸主編．中藥新藥臨床研究指導原則[M]．北京中國醫藥科技出版社，2002：85-89．

7 中國成人血脂異常防治指南制訂聯合委員會．中國成人血脂異常防治指南[J]．中華心血管雜志，2007，35(5)：390-410.

8 趙文華，張 堅，由 悅，等.中國18歲及以上人群血脂異常流行特點研究[J]. 中華預防醫學雜志，2005,39(5) :306-310.

9 宋鐵英. 高脂血癥血液流變學結果分析[J]. 中國社區醫師，2011，13(263)：160.

10 黎國德，許慶波，梁 巖，等.糖尿病高危人群血脂異?；疾÷始跋嚓P危險因素分析[J].廣東醫學,2014,35(6):922-924.

11 菊池佑二，俊騰清，森正治，等.液面自動計測裝置を用いだ測定法の改良[J].日本ヘモレオロジー研究會誌，2001,4:59-63.

12 高橋洋一，加藤順一，本間宏之，等.腦血管障害患者におけゐ 赤血球變形能[J]. 日本ヘモレオロジー研究會誌，1998,1(1):13-17.

13 栗原毅，出口祥子，柳遲明子，等．血液しオロジー測定裝置MC-FANの臨床應用(第一期) [J].日本ヘモレオロジー研究會誌，2001，4:43-52．

14 謝 琛，馬曉昌. 冠心病血瘀證與血脂譜的關系研究[J]. 北京中醫藥，2010， 29 (6):427-428.

Observation of the Blood Flow and Rheology in Patients with Blood Stasis Syndrome and Dyslipidemia

ZHAO Hao1,2, LIU Jian-gang1，#, LEI Yan3

1Xiyuan Hospital, China Academy of Chinese Medical Sciences, Angiocardiopathy Institute of China Academy of Chinese Medical Sciences,Beijing 100091, China;2The Southern Districtt of Guanganmen Hospital, China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 102600, China;3Medical Experimental Center, China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700, China;#

Objective:To explore the relationship between rheology and blood stasis of traditional Chinese medicine (TCM) of hyperlipidemia with the MC-FAN. Method:A total of 127 cases were enrolled，and tested all the patients' lipid, MC-FAN TT and hemorheology indexes. The 98 hyperlipidemia patients were divided into the Blood stasis group and non-blood stasis group with the rule of traditional Chinese medicine, and the other 29 normal lipid cases were in the controlled group. Results:Compared with healthy people,the blood lipid indicators rised in the blood stasis group and the non-blood stasis group.The MC-FAN TT (25μl TT is 21.48±7.19s，50μl TT is 52.92±18.72s，75μl TT is 94.11±33.00s and 100μl TT is 164.60±65.20s,P<0.01) were extended,compared with non-blood stasis group.There were no significant differences between the 3 groups in rheology. Conclusion:For the patients of hyperlipidemia in blood stasis group, the MC-FAN TT is extended.

Dyslipidemia;Blood stasis; Hemorheology; Computer Visualization

中日合作血液流變學可視化基金項目(XYW01-20100526)

1中國中醫科學院西苑醫院，中國中醫科學院心血管病研究所，北京 100091；2中國中醫科學院廣安門醫院南區，北京 102600；3中國中醫科學院醫學實驗中心，北京 100700；#

，E-mail:liujiangang2002@sina.com

本文2015-03-05收到，2015-05-30修回

R285.5 R364.1

A

1005-1740(2015)03-0023-04