機體乏氧狀態(tài)對膀胱癌全膀胱切除術(shù)后患者生存狀況的影響

鄧助朋

作者單位:529200 廣東省臺山市人民醫(yī)院

機體乏氧狀態(tài)對膀胱癌全膀胱切除術(shù)后患者生存狀況的影響

鄧助朋

作者單位:529200 廣東省臺山市人民醫(yī)院

【摘要】目的探討機體乏氧狀態(tài)對膀胱癌全膀胱切除術(shù)后患者生存質(zhì)量的影響。方法將78例膀胱癌全膀胱切除術(shù)患者隨機分為機體常氧狀態(tài)組(常氧組)57例和機體乏氧狀態(tài)組(乏氧組)21例。采用免疫組化方法檢測所有病例的切片標本缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)的表達情況，將患者生存時間與多項乏氧相關(guān)因素做Kaplan-Meier分析。結(jié)果

乏氧組HIF-1α表達陽性率為85.7%(18/21)，常氧組HIF-1α表達陽性率為57.9%(33/57)；2組中位生存時間分別為57.741個月和77.544個月，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。腫瘤分期高、HIF-1α高表達、機體乏氧狀態(tài)、血紅蛋白水平<110 g/L時患者生存時間較短(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論機體乏氧狀態(tài)可導(dǎo)致腫瘤內(nèi)部供氧不足，促進HIF-1α表達上升，進而降低患者生存率。

【關(guān)鍵詞】缺氧；膀胱癌；HIF-1α；血紅蛋白；預(yù)后

Effect of Hypoxia on Postoperative Living Conditions of Patients with Bladder Cancer

after Radical Cystectomy

DENGZhupeng.TaishanPeople’sHospital,Taishan,529200

【Abstract】ObjectiveTo study the effect of hypoxia on postoperative living conditions of patients with bladder cancer after radical cystectomy.Methods78 cases of bladder cancer patients treated with total cystectomy were randomly divided into the normoxic group 57 cases and the hypoxia group 21 cases.HIF-1α expression in biopsy specimens of all patients was detected by immunohistochemical method,the survival time and hypoxia factors were analyzed by Kaplan Meier.ResultsThe positive rate of HIF-1α expression in the hypoxia group was 85.7%(18/21),and that of the normoxic group was 57.9%(33/57),the median survival time of the 2 groups were 57.741 months and 77.544 months.respectively,there had statistical difference(P<0.05);Survival time in patients with high tumor stage,higher HIF-1α expression,hypoxic condition,hemoglobin levels<110 g/L was short(P<0.05 orP<0.01).ConclusionHypoxia can promote HIF-1α expression,and reduce survival rate of patients.

【Key words】Hypoxia;Bladder cancer;HIF-1α;Hemoglobin;Prognosis

(ThePracticalJournalofCancer,2015,30:0374～0376)

膀胱癌是泌尿系統(tǒng)常見且發(fā)病率最高的惡性腫瘤，當膀胱癌患者行根治性膀胱全切術(shù)時本身處于貧血、慢性肺疾病(chronic pulmonary disease，CPD)及其他的肺功能不良或異常誘發(fā)的機體慢性乏氧狀態(tài)，是否會加重腫瘤內(nèi)的缺氧，進一步影響預(yù)后則難以確定[1-2]。研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤內(nèi)乏氧細胞及缺氧環(huán)境的存在是導(dǎo)致腫瘤侵襲性、預(yù)后差，對化療、放射性治療產(chǎn)生抵抗性的重要因素[3]。HIF-1是在缺氧誘導(dǎo)腫瘤基因表達的重要轉(zhuǎn)錄因子，進而對腫瘤的預(yù)后產(chǎn)生一定的影響。本研究以膀胱癌患者為受試對象，收集病例臨床資料并結(jié)合其標本的HIF-1表達情況來綜合測評機體缺氧狀態(tài)程度與腫瘤患者預(yù)后的關(guān)系，現(xiàn)報告如下。

1資料與方法

1.1　一般資料

收集2003年1月-2013年12月間于我院泌尿外科行根治性膀胱全切加回腸膀胱尿流改道術(shù)的膀胱癌患者78例，其中男性53例，女性25例，年齡37～80歲，平均年齡(58.5±8.6)歲。納入標準：手術(shù)前后未行放、化療；所有病例經(jīng)組織病理學(xué)確診并具有完整的隨訪記錄資料；按照膀胱癌的TNM病理分級(2009年)統(tǒng)計：Ⅰ期49例，Ⅱ期21例，Ⅲ期7例，Ⅳ期1例。

1.2　分組依據(jù)

機體乏氧狀態(tài)組(乏氧組)：①有慢性肺部疾病治療史或病史；②有持續(xù)超過3個月的咳嗽、喘息、氣促、咳痰等慢性疾病臨床表現(xiàn)，經(jīng)臨床輔助資料顯示，肺功能檢查異常。③具有彌散功能或肺通氣障礙；④術(shù)前血常規(guī)檢測平均血紅蛋白Hb<110 g/L。機體常氧狀態(tài)組(常氧組)：①既往無慢性肺部疾病治療史及病史；②無相應(yīng)的慢性肺部疾病臨床癥狀；③術(shù)前血常規(guī)檢測平均血紅蛋白Hb≥110 g/L。經(jīng)統(tǒng)計，78例膀胱癌患者乏氧組21例，常氧組57例。

1.3　試劑與方法

HIF-1α為兔抗人多克隆抗體，免疫組化SABC試劑盒，DAB顯色試劑盒均由武漢博士德公司提供。采用免疫組織學(xué)染色，HIF-1α終濃度為1∶60或1∶80，利用PBS緩沖液沖洗數(shù)次后DAB顯色，蘇木精復(fù)染細胞核，再用鹽酸酒精分化，最后以中性樹脂封存，磷酸鹽緩沖液作一抗體陰性對照。其他操作方法按照試劑盒說明書進行。

1.4　結(jié)果評定

切片染色背景清晰，對比度高，排除壞死切片及出血切片，于高倍鏡下(400倍)觀察HIF-1α著色情況及染色強度并計數(shù)陽性細胞個數(shù)，評定標準見表1。本研究設(shè)定：HIF-1α(-)為0分，HIF-1α(+)為1～6分[4]。

表1　免疫組化結(jié)果評定標準

1.5　統(tǒng)計學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件對所有數(shù)據(jù)輸入整理，計量資料應(yīng)用t檢驗，計數(shù)資料應(yīng)用χ2檢驗，Kaplan-Meier法分析各指標因素與生存率的相關(guān)性，P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1　2組患者HIF-1α的表達及臨床資料比較

截至2013年12月，78例病患均獲隨訪，平均隨訪時間為(52.4±23.9)個月，HIF-1α的表達經(jīng)觀察呈棕黃色顆粒染色并在膀胱癌的細胞核上，將所得標本統(tǒng)計后共獲得陽性者51例，陽性率為65.4%。其中乏氧組HIF-1α表達陽性率為85.7%(18/21)，常氧組HIF-1α表達陽性率61.4%(33/57)，2組HIF-1α陽性表達率、臨床分期比較有顯著差異(P<0.05)，見表2。

2.2　2組患者生存率影響因素分析

利用Kaplan-Meier曲線分析2組患者生存率，結(jié)果(圖1)表明，乏氧組與常氧組的中位生存時間分別為57.741個月和77.544個月，2組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.034<0.05)。為進一步確定乏氧指標與腫瘤預(yù)后的相關(guān)性，采用多元回歸自變量篩選方法，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，腫瘤分期高、HIF-1α高表達、機體乏氧狀態(tài)、血紅蛋白水平<110 g/L時患者生存時間較短(P<0.05或P<0.01)，見表3。

表2　2組患者HIF-1α的表達及臨床資料比較(例，%)

圖1　2組患者生存函數(shù)比較

相關(guān)指標 例數(shù)平均生存時間/月P氧狀態(tài) 乏氧組2157.741<0.05 常氧組5777.544腫瘤分期 Ⅰ~Ⅱ5178.647<0.01 Ⅲ~Ⅳ2723.283血紅蛋白水平/(g·L-1) ≥1106076.091<0.01 <1101837.443HIF-1α +5142.810<0.05 -2780.023

3討論

機體乏氧狀態(tài)是多種實體瘤中廣泛存在的一種現(xiàn)象，是腫瘤微環(huán)境的基本特征之一，其本質(zhì)原因在于腫瘤的高代謝效率及高生長率增加局部氧耗，致使血管內(nèi)盲端、血栓、癌栓形成并導(dǎo)致腫瘤內(nèi)血管結(jié)構(gòu)異常，最終因相關(guān)轉(zhuǎn)錄及信號表達發(fā)生改變而影響腫瘤血管的形成[5-6]。膀胱癌同所有實質(zhì)性腫瘤類似，其生長代謝與轉(zhuǎn)移離不開腫瘤血管的形成，當腫瘤直徑、細胞數(shù)目達到一定值后必須借助組織中新生血管來提供必需的氧氣分子及外排代謝廢物[7]。當腫瘤內(nèi)部微環(huán)境缺氧嚴重時，細胞內(nèi)多種血管生成相關(guān)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和表達發(fā)生復(fù)雜的應(yīng)激反應(yīng)，誘導(dǎo)血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)大量合成，增加腫瘤內(nèi)部血液供給，促進腫瘤生長。

研究表明，HIF-1α在腫瘤的形成、發(fā)展及轉(zhuǎn)移和擴散過程中起到十分關(guān)鍵的作用，該蛋白是由α和β2種亞基組合而成的異源二聚體，HIF-1α是HIF-1的氧調(diào)節(jié)單位，可一定程度反映HIF-1的活性。機體處于缺氧狀態(tài)下，HIF-1α與VEGF基因端點的增強子交互結(jié)合，促使VEGF的表達升高，進而促進腫瘤內(nèi)皮依賴血管的合成并加速腫瘤惡化。這與本研究中HIF-1α在膀胱癌中65.4%的高表達的結(jié)論相一致[8]。此外，HIF-1α表達的多少是衡量組織是否缺氧的重要指標。本研究采用免疫組化法檢測78例膀胱癌患者的石蠟切片標本中HIF-1α的表達，機體乏氧狀態(tài)下和常氧狀態(tài)下其陽性表達率分別為85.7%和61.1%，提示HIF-1α表達與膀胱癌的惡性程度緊密相關(guān)，隨著惡性程度逐漸增加，HIF-1α表達升高，促進 VEGF應(yīng)答基因轉(zhuǎn)錄加速。慢性肺部疾病，如慢性支氣管炎、肺結(jié)核、肺氣腫、慢性阻塞性肺疾病等可以較大程度影響肺部的通氣和換氣，從而降低動脈血氧分壓，肺部血流比例失衡，給機體造成全身性低氧血癥。本研究另一大特點是在其他停留在影響膀胱癌患者預(yù)后單因素分析研究的基礎(chǔ)上，進一步研究機體活氧狀態(tài)下，膀胱癌患者HIF-1α表達異常情況，以期更直觀徹底地揭示乏氧因素在膀胱癌患者預(yù)后中的地位[9]。我們發(fā)現(xiàn)乏氧狀態(tài)下患者術(shù)后生存時間為57.741個月，明顯短于正常狀態(tài)下患者的術(shù)后時間，該結(jié)果證明HIF-1α的表達情況是預(yù)測膀胱癌患者不良生存狀況的一個關(guān)鍵指標。此外，貧血是惡性腫瘤患者常見并發(fā)癥，機體貧血時血液攜帶和傳遞能力減弱，進而導(dǎo)致腫瘤局部乏氧。研究發(fā)現(xiàn)腫瘤合并貧血患者的死亡率是非貧血腫瘤患者的4倍，為進一步確定乏氧指標與腫瘤預(yù)后的相關(guān)性，采用多元回歸自變量篩選方法，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，腫瘤分期高、HIF-1α高表達、機體乏氧狀態(tài)、血紅蛋白水平<110 g/L時患者生存時間較短，這一結(jié)論與本研究提出的血紅蛋白<110 g/L的患者平均生存時間要遠遠短于血紅蛋白≥110 g/L患者的研究結(jié)果保持一致[10]。因此，可以認為貧血所致的機體缺氧是膀胱癌患者預(yù)后不佳的另一大重要因素。

本研究利用免疫組織化學(xué)方法，通過軟件數(shù)據(jù)處理，對影響腫瘤患者預(yù)后生存的多個因素進行分析，發(fā)現(xiàn)腫瘤分期高、HIF-1α高表達、機體乏氧狀態(tài)、血紅蛋白水平<110 g/L時患者生存時間明顯縮短。提示對膀胱癌全膀胱切除術(shù)患者的術(shù)后治療應(yīng)給予均衡的營養(yǎng)補充，避免發(fā)生貧血，配合恰當?shù)难醑煛?/p>

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(編輯：甘艷)

(收稿日期2014-08-08修回日期 2014-10-24)

中圖分類號：R737.14

文獻標識碼：A

文章編號：1001-5930(2015)03-0374-03

DOI：10.3969/j.issn.1001-5930.2015.03.018