外周血T淋巴細胞亞群與免疫球蛋白檢測在胃癌病情監測及預后評價中的價值

宋振宇

外周血T淋巴細胞亞群與免疫球蛋白檢測在胃癌病情監測及預后評價中的價值

宋振宇

目的探討外周血T淋巴細胞亞群與免疫球蛋白(Immunoglobulin，Ig)檢測對胃癌病情監測及預后評價的意義。方法將475例胃癌患者按照其2年生存率分為預后良好組(n=266)及預后不良組(n=209)，并選取同期200例健康體檢者，納入正常對照組，比較各組受試者外周血T淋巴細胞亞群與Ig水平差異，探討其臨床意義。結果胃癌患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+顯著低于正常對照組，CD8+顯著高于正常對照組(P＜0．05);胃癌患者IgG、IgA、C3、C4均顯著低于正常對照組(P＜0．05)，其IgM水平比較未見明顯統計學差異(P＞0．05)。預后不良組與預后良好組患者外周血T淋巴細胞亞群及Ig水平比較，差異均有統計學意義(P＜0．05)。結論胃癌患者會出現明顯的外周血T淋巴細胞亞群失調、Ig降低表現，且改變程度越明顯則表明患者預后越差，因此，早期檢測患者外周血T淋巴細胞亞群與Ig水平有助于判斷其預后、指導治療對策。

T淋巴細胞亞群;免疫球蛋白;胃癌;病情;預后;評價

(The Practical Journal of Cancer，2015，30:1126～1128)

胃癌是我國發病率最高的消化道惡性腫瘤，其病情的進展與患者免疫功能的變化具有密切關聯［1］。隨著醫療技術的提高，胃癌患者的近期生存質量得到了有效保證，但其5年生存率仍不足50%，因此，進一步探究免疫功能與患者病情及預后的關系有助于早期預后的判斷與治療策略的制定［2］。為此，我們選取外周血T淋巴細胞亞群及免疫球蛋白(Immunoglobulin， Ig)兩項指標進行了臨床研究，取得了可靠的結論。

1 材料與方法

1．1 臨床資料

自我院2008年9月-2012年9月收治的胃癌患者中進行篩選，選取標準:①接受胃癌根治性手術治療并經術后病理學檢查確診［3］;②首發胃癌患者，且入組前未接受其他相關治療;排除:①合并機體免疫系統

疾病;②合并心、肝、腎等其他重要臟器官疾病;③隨訪年限不足2年或隨訪資料不完整。共選取符合條件的患者475例，按照其2年隨訪結果進行分組，將復發、轉移或死亡患者納入預后不良組［4］，其他患者納入預后良好組。預后不良組209例，男性127例，女性82例，年齡35～74歲，平均(52．1±7．6)歲，預后良好組266例，男性154例，女性112例，年齡33～70歲，平均(53．8±9．1)歲。并選取同期健康體檢者200例，在其簽署知情同意書并經我院倫理委員會批準后，將其納入正常對照組，其中男性120例，女性80例，年齡35～72歲，平均(52．9±6．4)歲。各組患者年齡、性別比例等臨床資料比較無統計學差異(P＞0．05)，具有可比性。

1．2 檢測方法

1．2．1 T淋巴細胞亞群取受試者(胃癌患者治療前)空腹靜脈血2 ml，置于EDTA抗凝管中，取全血100 μl，加入CD3+、CD4+、CD8+熒光抗體(美國Beckman-Coulter公司)標記，標記成功后取單抗(法國Immunotech公司)20 μl，避光，28℃下染色20 min;加入1．5 ml紅細胞裂解液，混勻，避光，28℃下處理10 min，以完全裂解紅細胞;以1 500 r/min離心5 min后，留取沉淀物，加入2 ml 0．1%疊氮鈉磷酸緩沖液，混勻，再次以1 500 r/min離心5 min，加入1 ml PBS溶液后，于2 h內進行檢測。檢測設備為NovoCyte系列流式細胞儀(美國ACEA公司)。

1．2．2 免疫球蛋白取受試者(胃癌患者治療前)空腹靜脈血2 ml，3 000 r/min離心后，取上清液，使用IMMAGE型免疫濁度分析儀(美國Beckman-Coulter公司)，使用免疫比濁法直接進行Ig檢測，檢測試劑購自同公司;檢測指標包括IgG、IgA、IgM及補體C3、C4。

1．3 觀察指標

比較患者與正常對照組外周血T淋巴細胞亞群、Ig水平差異，并比較預后不良組及預后良好組患者外周血T淋巴細胞亞群、Ig水平差異。

1．4 統計學分析

對本臨床研究的所有數據采用SPSS 18．0進行分析，對計數資料采用χ2檢驗，對計量資料采用t檢驗，檢驗水準設定為α=0．05，當P＜0．05時，認為其有統計學差異。

2 結果

2．1 T淋巴細胞亞群

胃癌患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+顯著低于正常對照組，其CD8+顯著高于正常對照組(P＜0．05);預后不良組患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/ CD8+顯著低于預后良好組，其CD8+顯著高于預后良好組(P＜0．05)，見表1。

表1 正常對照組與胃癌組外周血T淋巴細胞亞群水平比較(%，±s)

表1 正常對照組與胃癌組外周血T淋巴細胞亞群水平比較(%，±s)

組別CD3+CD4+CD8+CD4+/CD8+66．39±5．8443．96±5．2823．31±7．631．90±0．24胃癌組51．09±8．4034．52±5．8329．31±6．711．19±0．35預后良好組56．37±7．9138．20±4．8525．40±6．621．47±0．40預后不良組正常對照組48．42±9．0330．19±6．1233．17±7．110．99±0．28

2．2 免疫球蛋白

患者組IgG、IgA、C3、C4均顯著低于正常對照組(P＜0．05)，其IgM水平比較未見明顯統計學差異(P＞0．05);預后不良組組IgG、IgA、C3、C4均顯著低于預后良好組組(P＜0．05)，其IgM水平比較未見明顯統計學差異(P＞0．05)，見表2。

表2 正常對照組與患者組血清免疫球蛋白水平比較(g/L，±s)

表2 正常對照組與患者組血清免疫球蛋白水平比較(g/L，±s)

組別IgGIgAIgMC3C4正常對照組13．95±2．801．99±0．811．07±0．391．19±0．310．35±0．98胃癌組10．36±1．941．35±0．361．06±0．210．62±0．190．18±0．27預后良好組12．07±1．351．90±0．271．05±0．310．84±0．250．26±0．19預后不良組9．33±2．021．16±0．271．07±0．420．53±0．160．14±0．30

3 討論

腫瘤與機體局部微環境的互相作用主要影響免疫微環境的變化，其對免疫微環境的抑制在促進自身發生、發展甚至轉移方面均具有重要作用［5］。機體抗腫瘤機制主要借助于細胞免疫應答的發揮，而細胞免疫

主要依賴T淋巴細胞功能的發揮，T淋巴細胞除能夠識別腫瘤細胞，產生抗原刺激外，還能分泌致敏T淋巴細胞用于腫瘤細胞的殺傷，因此，近年來T淋巴細胞在腫瘤進展中的變化受到了廣泛關注。同時，有研究發現，在機體抗體產生、炎癥反應出現的過程中亦伴隨著Ig水平的變化［6］，因而對Ig水平的監測亦有望用于胃癌患者病情監測與預后評價。

本研究發現，胃癌患者外周血T淋巴細胞亞群、Ig水平較健康體檢者存在較大差異，且預后不良的胃癌患者其差異性更為明顯，提示外周血T淋巴細胞亞群、Ig水平的劇烈改變預示著患者病情較重、預后較差，其機制主要包括:①CD3+、CD4+在免疫應答中起到促進、擴大免疫反應的正向作用，而CD8+主要起到抑制細胞免疫進程的負向作用，在健康者機體內，上述3種T淋巴細胞亞群保持著一個較為穩定的動態平衡狀態，但隨著惡性腫瘤的出現，患者可逐漸發生T淋巴細胞狀態異常以及比例失調表現，導致免疫內環境穩定的失常［7］;②隨著患者免疫內環境穩定被打破，其記憶T細胞的表達逐漸受到抑制，機體對腫瘤細胞的免疫應答作用有所降低，同時，CD3+、CD4+水平的下降以及CD8+水平的上升使得免疫反應受到進一步影響，機體對于腫瘤的清除能力及免疫監視能力均受到抑制，這在一方面也促使腫瘤出現免疫逃逸狀態，從而更利于腫瘤細胞的浸潤及轉移，最終導致患者在術后出現復發、轉移甚至死亡等較差的預后［8］;③Ig也是機體免疫防御功能的重要組成部分，屬于體液免疫范疇，主要作用為抗感染、抗腫瘤及免疫監視。雙金權等［9］指出，惡性腫瘤患者在發病早期一般會出現B細胞分化能力增強的體液免疫功能亢進的代償性表現，但隨著患者病程的延長及病情的惡化，其體液免疫功能會迅速下降，導致Ig總體水平的降低，而病情較重、預后較差的患者體液免疫功能下降更為明顯;④IgM水平的變化一般見于炎癥反應早期，而胃癌患者IgM與正常對照組無明顯差異，提示多數患者機體已度過腫瘤細胞產生的早期反應期，此時已出現免疫機能的衰退，進一步印證了上述結論;⑤雖然機體具有較強的生成C3、C4能力，但在腫瘤細胞影響細胞免疫后，補體即被大量消耗，而當機體的補體產生速度無法趕及其消耗速度后，患者腫瘤細胞即會出現猛烈的繁殖態勢，引起病情的迅速進展［10］，因此，以Ig作為胃癌患者病情監測的指標亦存在一定意義。

綜上所述，胃癌患者會出現明顯的外周血T淋巴細胞亞群失調、Ig降低表現，這預示著其細胞免疫、體液免疫功能的下降，且上述指標改變程度越明顯則表明患者病情越重、預后越差，因此，早期檢測患者外周血T淋巴細胞亞群與Ig水平有助于判斷其預后、指導治療對策。

［1］許俊龍，張杰，李玉紅，等．D2-40，Paxillin蛋白在早期胃癌中表達的相關性及臨床病理學意義〔J〕．實用癌癥雜志，2013，28(2):140-143．

［2］Ablimit A，Kühnel H，Strasser A，et al．Abnormal Savda syndrome:Long-term consequences of emotional and physical stress on endocrine and immune activities in an animal model〔J〕．Chin J Integr Med，2013，19(8):603-609．

［3］魏冉，司元全，卞曉琨，等．胃癌患者外周血中單個核細胞及CD3^+CD81^low T細胞中ILT3的表達及意義〔J〕．臨床檢驗雜志，2013，31(9):650-653．

［4］Schmidt K，Zilio S，Schmollinger JC，et al．Differently immunogenic cancers in mice induce immature myeloid cells that suppress CTL in vitro but not in vivo following transfer〔J〕．Blood，2013，121(10):1740-1748．

［5］張曉冬，郭明浩，常占國，等．DC，CIK白體回輸對化療后胃癌患者T淋巴細胞亞群及NK細胞的影響〔J〕．山東醫藥，2014，54(3):70-72．

［6］Kalathil S，Lugade AA，Miller A，et al．Higher frequencies of GARP+CTLA-4+Foxp3+T regulatory cells and myeloid-derived suppressor cells in hepatocellular carcinoma patients are associated with impaired T-cell functionality〔J〕．Cancer Res，2013，73(8):2435-2444．

［7］葉麗萍，楊海登，沈玲燕．免疫球蛋白樣轉錄子在胃癌患者外周血單個核細胞的表達水平及臨床意義〔J〕．中華消化雜志，2014，34(1):50-52．

［8］Carrega P，Bonaccorsi I，Di Carlo E，et al．CD56brightperforinlow noncytotoxic human NK cells are abundant in both healthy and neoplastic solid tissues and recirculate to secondary lymphoid organs via afferent lymph〔J〕．J Immunol，2014，192(8):3805-3815．

［9］雙金權，吳婷，莊則豪．NS398對SGC7901胃癌細胞生長及CD44V6，MMP-9基因表達的影響〔J〕．實用癌癥雜志，2013，28(1):15-19．

［10］Galletti G，Sung MS，Vahdat LT，et al．Isolation of breast cancer and gastric cancer circulating tumor cells by use of an anti HER2-based microfluidic device〔J〕．Lab Chip，2014，14(1):147-156．

Detection of Peripheral Blood T Lymphocyte Subsets and Immunoglobulin in Monitoring and Prognosis Evaluation of Gastric Cancer

SONG Zhenyu．The First People＇s Hospital of Liangshan，Liangshan，615000

ObjectiveTo analyze the value of T lymphocyte subsets in peripheral blood and immune globulin(Ig)detection in monitoring and prognosis evaluation of gastric cancer．Methods475 cases of gastric cancer patients，in accordance with 2-year survival rate，were divided into good prognosis group(n=266)and poor prognosis group(n=209)，and 200 cases of healthy individuals was the control group，T lymphocyte subsets in peripheral blood and Ig level were compared，and its clinical significance were explored．ResultsThe peripheral blood CD3+，CD4+，CD4+/CD8+in gastric carcinoma were significantly lower than those of the control group，CD8+was significantly higher than that of the control group(P＜0．05);IgG，IgA，C3，C4in gastric carcinoma were significantly lower than those of the control group(P＜0．05)，the IgM level had no statistically significant difference(P＞0．05)，T lymphocyte subsets in peripheral blood and Ig level in poor prognosis group and good prognosis group had no statistically significant difference(P＞0．05)．ConclusionGastric cancer patients have obvious peripheral blood T lymphocyte subsets disorders and drop of Ig expression，and the greater the index change，the poorer the prognosis，therefore，early detection of peripheral blood T lymphocyte subsets and Ig level are helpful in judging prognosis and guiding treatment countermeasures．

T lymphocyte subsets;Immunoglobulin;Gastric cancer;Disease;Prognosis;Evaluation

10．3969/j．issn．1001-5930．2015．08．006

R735．2

A

1001-5930(2015)08-1126-03

2014-11-24

2015-04-08)

(編輯:甘艷)

615000四川省涼山州第一人民醫院