AMPA及ALA在自身免疫性肝炎中的檢測意義

劉建輝　廣東省佛山市順德區第一人民醫院檢驗科　528300

?

AMPA及ALA在自身免疫性肝炎中的檢測意義

劉建輝廣東省佛山市順德區第一人民醫院檢驗科528300

摘要目的：分析和探討抗髓過氧化物酶抗體(Anti-myeloperoxidase antibody,AMPA)和抗乳鐵蛋白抗體(Anti-lactoferrin antibody,ALA)在自身免疫性肝炎中的臨床檢測意義。方法：對82例自身免疫性肝炎患者、306例非自身免疫性肝炎患者和97 例健康志愿者均采用免疫印跡法分別檢測AMPA和ALA，觀察臨床指標并對結果進行統計分析。結果：82 例自身免疫性肝炎患者和306例非自身免疫性肝炎患者檢測AMPA陽性率分別是72.0%(59/82)和3.6%(11/306)，經χ2檢驗P<0.01；82例自身免疫性肝炎患者檢測ALA陽性率是20.7%(17/82)。結論：AMPA和ALA與自身免疫性肝炎的發生發展具有相關性，兩者相結合的臨床檢測對自身免疫性肝炎的診斷具有重要意義。

關鍵詞AMPAALA自身免疫性肝炎

自身免疫性肝炎(Autoimmune hepatitis,AIH)是組織學表現為肝組織碎屑樣壞死、 轉氨酶升高、高球蛋白血癥、自身抗體檢測陽性，病毒指標陰性的慢性肝炎，同時也可合并肝外其他自身免疫性疾病[1]?，F今其發病機制還不明確，多認為由免疫遺傳合并外界環境刺激所引起的自身免疫耐受缺陷。為了探討 AMPA、ALA等自身抗體對AIH檢測的臨床意義，我院對82例自身免疫性肝炎患者、306例非自身免疫性肝炎患者和97例健康志愿者均采用ELISA法分別檢測 AMPA和ALA，并對觀察臨床指標及結果進行統計分析，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料選取我院于2011年6月-2013年6月收治的82例自身免疫性肝炎患者及306例非自身免疫性肝炎患者。82例AIH患者中男16例，女66例，年齡24～71歲,平均年齡52歲；306例非AIH患者中原發性膽汁性肝硬化58例，原發性硬化性膽管炎46例，乙型肝炎92例，丙型肝炎65例，戊型肝炎45例。對照組97例均為健康志愿者，男44例,女53例,年齡19～63歲,平均年齡41歲。

1.2診斷依據根據自身免疫性肝炎的診斷綜合參考國際診斷標準[3]，病毒性肝炎診斷參考衛生部2008年更新的病毒性肝炎診斷指南[4]。

1.3試劑和方法

1.3.1標本采集。標本均為空腹采集不抗凝血2.0～3.0ml。以2 500r/min速度離心15min分離血清，-20℃冷凍待檢。

1.3.2檢測方法。AMPA、ALA檢測采用德國Human試劑，方法是免疫印跡法。實驗設計采用完全空白對照，嚴格按試劑說明及科室作業指導書進行操作。具體的操作方法是將血清樣品稀釋，并按既定方案向對應反應槽的膜條中加入稀釋血清樣品1ml，室溫搖晃30min，1.5ml洗液洗滌3次。加酶標記物抗體1ml再在室溫中搖晃30min，同前洗滌3次。加顯色液1ml，室溫搖晃10min，1.5ml蒸餾水洗滌1次。加終止液1ml，室溫搖晃5min。在結果判讀模板上判讀結果。

1.4統計學分析應用SPSS16.0軟件進行統計分析,計數資料以例數(百分比)描述,組間單因素分析采用χ2檢驗,以P<0.05為差異具有統計學意義。

2結果

AIH與非AIH患者AMPA、ALA的檢測：AIH與非AIH檢測AMPA陽性率經χ2檢驗P<0.01，詳見表1。

表1　AIH及非AIH患者AMPA、ALA的

3討論

目前自身免疫性肝炎診斷在臨床實踐中的方法主要包括血清學標記物(如檢測抗核抗體、抗平滑肌抗體和抗中性粒細胞胞質抗體等)和影像學診斷(B超、CT),確診該病相對較容易[2]。但對于嚴重病例若不及時明確診斷并予對癥治療其后果非常嚴重,甚至導致患者死亡,并且由于AIH和其他肝病相比在臨床表現上無明顯特異性,因此常會導致確診困難甚至誤診，從而延誤最佳治療時機。AIH患者會產生各種自身抗體，比如抗核抗體(ANA)、抗平滑肌抗體(ASMA)和抗中性粒細胞胞質抗體(ANCA)等[3]。髓過氧化物酶(MPO)是ANCA的一個靶抗原，MPO是由活化的單核細胞、中性粒細胞和巨噬細胞分泌所形成的。研究發現MPO的多態性和多種疾病的易感性相關，由此說明炎癥細胞活化后在腎臟聚集并釋放大量的MPO，導致腎臟受損，證明AMPA與腎臟損傷有極強的相關性。 研究還發現炎癥細胞中的某些顆粒蛋白(除蛋白酶-3和MPO)的抗體也可作為血清學標記物指標如ALA，因為在急性炎癥初期，ALA水平會大幅提高。因此，找到更多具有高敏感性或疾病特異性的血清抗體對AIH的診斷與鑒別有重要意義。一些由藥物引起的肝受損患者有時也能檢測到自身抗體呈陽性，臨床表現與其他慢性肝病類似，如肝區隱痛、不明原因發熱、高球蛋白血癥等，與AIH患者較難鑒別，近年來受各學者關注。而AMPA對于AIH的陽性檢出率很高，具有很高的特異性，因而，在臨床上經常使用該方法進行檢測判斷。此外，ALA的檢測在臨床上應用也較為廣泛。研究發現由藥物引起的AIH和經典AIH在肝功指標、血清抗體、免疫球蛋白、病理組織、年齡和性別上的差異無統計學意義。有些研究也發現某些病毒感染肝臟也會引起自身免疫的現象，與AIH可出現相似的血清抗體。因而，對于自身免疫性肝炎的檢測和診斷，顯得尤為重要。

本院對82例AIH患者檢測血清AMPA，陽性率為72.0%，結果與報道一致，與非AIH相比，P<0.01；AIH中ALA陽性率為20.7%，與非AIH比較P<0．01，且非AIH組中僅發現原發性硬化性膽管炎中有1例ALA陽性，其余均為陰性。說明AMPA對于AIH的診斷具有特異性，而ALA可作為其他幾項指標的輔助診斷，從而進一步確診。AMPA對于AIH的診斷價值較大，且AMPA與ALA聯合檢測對AIH的鑒別診斷有重要意義，AMPA 和 ALA 與自身免疫性肝炎的發生發展具有相關性，是診斷AIH的有效血清學自身抗體檢測指標，兩者相結合的臨床檢測可有效提高檢出率，提高臨床檢測的精確度，提高效率，對自身免疫性肝炎的診斷具有重要意義。AMPA、ALA與AIH有密切關聯，內在機制有待進一步研究。

參考文獻

[1]譚立明，張玉紅，陳冬蓮，等.抗髓過氧化物酶及乳鐵蛋白抗體對自身免疫性肝炎檢測的臨床研究〔J〕.中國免疫學雜志,2013,29(8):839-843,847.

[2]方根，劉金濤.自身抗體的檢測在自身免疫性肝炎診斷中的應用〔J〕.內蒙古醫學雜志,2012,34:188-189.

[3]孔祥沙,閆惠平,廖慧鈺,等.抗中性粒細胞胞漿抗體對自身免疫性肝炎的檢測意義〔J〕.北京醫學,2010,32(12):947-950.

(編輯紫蘇)

收稿日期2014-07-17

中圖分類號：R446.1

文獻標識碼：B

文章編號：1001-7585(2015)10-1371-02