乙肝病毒ELISA定性及熒光定量PCR聯合檢測的應用價值

陳　麗　汪　芳　葉曉燕　江西省上饒市第二人民醫院檢驗科　334000

乙肝病毒ELISA定性及熒光定量PCR聯合檢測的應用價值

陳麗汪芳葉曉燕江西省上饒市第二人民醫院檢驗科334000

摘要目的：探討乙肝病毒的ELISA定性檢測與熒光定量PCR聯合檢測在臨床診斷中的應用價值。方法：選取2013年4月-2014年3月我院收治的乙肝患者71例為觀察對象，使用ELISA定性方法與熒光定量PCR方法對患者的乙肝病毒前抗原(Pre-S2)、乙肝病毒DNA及乙肝兩對半進行定性、定量檢測，比較不同兩對半模式下的乙肝病毒檢出情況。結果：61例HBsAg陽性患者中，Pre-S2陽性48例，HBeAg陽性31例，HBV-DNA陽性43例，Pre-S2陽性率與HBV-DNA相似，二者均高于HBeAg。結論：將ELISA定性與PCR定量聯合運用于乙肝病毒的臨床檢測中，可更清楚反映出HBV的復制與傳染性，需引起重視。

關鍵詞乙肝病毒ELISA定性熒光定量PCR聯合檢測

據估計，全球大約有3億左右的乙肝病毒(HBV)攜帶者，我國是乙肝的高發區域之一。乙肝作為目前危害最為嚴重、流行性最廣泛的病毒性肝炎，其早期診治方法一直是臨床研究的重點內容。HBV血清標志物始終是現階段進行乙肝病毒感染者診斷與病程判別的重要依據。本文對71例乙肝病毒感染者進行病毒酶聯免疫吸附試驗(ELISA定性)與熒光定量(FQ-PCR)聯合檢測，分析患者的Pre-S2、乙肝病毒DNA(HBV-DNA)與乙肝兩對半的檢測結果。現將具體內容報告如下。

1資料與方法

1.1一般資料選取2013年4月-2014年3月于我院就診的71例乙肝患者作為觀察對象。其中男38例，女33例；年齡19~67歲，平均年齡(46.19±4.07)歲。所有患者均取清晨空腹靜脈血，離心后分離血清，保存于4℃條件下備用。

1.2方法

1.2.1Pre-S2檢測方法：采用東芝40全自動生化分析儀，3V生化系列診斷試劑。使用雙抗夾心ELISA方法，按照相關檢測試劑的使用說明書進行操作，隨后進行洗滌與酶物質的吸光度測定。

1.2.2HBV-DNA檢測：PCR采用美國ABI7300熒光定量分析儀，試劑為中山大學達安基金股份有限公司生產的熒光定量分析試劑。使用HBV核酸擴增熒光定量試劑盒與相關試劑進行HBV-DNA定量檢測，整個操作過程嚴格按照試劑使用說明書進行。以HBV-DNA低于1.0×102IU/ml為檢測最低值。同時使用自動化化學發光免疫分析儀與對應試劑進行乙肝兩對半定量檢測。

2結果

2.1相關指標的檢測結果詳見表1。

表1　乙肝兩對半、PCR檢測HBV-DNA與

2.2Pre-S2與HBsAg、HBeAg、HBV-DNA的關系，見表2。

3討論

從表1中不難看出，HBsAg陽性患者的HBV-DNA陽性率較HBeAg陰性患者有明顯下降，提示HBeAg陽性患者的乙肝病毒復制活動相對活躍，具有高傳染性，與相關文獻報道一致[1]。抗HBe、抗HBc與HBsAg均陽性檢出的患者血清中仍存在一定的HBV-DNA陽性率，充分表明存在抗HBe并不代表乙肝患者體內的病毒復制終止。推斷其可能與Pre-C相關區域變異有關。研究中有1例同時表現出HBeAg陽性與抗HBe陽性，推斷患者可能處于血清轉換期[2]。

多篇文獻證實，血清中的HBV-DNA是檢測乙型肝炎是否具有傳染性的敏感指標[3]。乙肝前S2抗原在HBsAg、HBeAg與HBV-DNA陽性中均可陽性檢出，提示血清學表達始終與乙肝病毒復制的相關指標呈現出關聯性變化，不同乙肝兩對半類型的患者血清檢測均為Pre-S2陽性。值得注意的是，前S2抗原不僅能直觀反映出HBV的復制活躍程度與患者的傳染性，還可作為低水平HBsAg陽性患者的輔助診斷指標，以便更準確地對乙肝病毒感染患者的病毒復制與傳染性進行判斷。

表2　Pre-S2與HBsAg、HBeAg、HBV-DNA的關系

綜上所述，臨床上應將ELISA定性與PCR定量檢測綜合運用于乙肝病毒的臨床檢測中，并對HBeAg、HBV-DNA與Pre-S2進行綜合評估，以便更清楚了解到HBV復制與傳染性的具體情況，需引起重視。

參考文獻

[1]顏敏.血清HBV-DNA熒光定量PCR檢測與乙肝病毒標志物模式的相關因素探討〔J〕.中外醫療,2014,26(21):193-194.

[2]陳海雁,張桂花,羅錦彬,等.熒光定量PCR法檢測乙肝病毒DNA和乙肝病毒標志物檢測的臨床價值分析〔J〕.國際檢驗醫學雜志,2014,16(14):2216-2217.

[3]石伍華,王海清,許艾明,等.熒光定量PCR檢測HBV-DNA與ELISA方法測定乙肝五項指標相關性分析〔J〕.臨床和實驗醫學雜志,2009,1(3):87-88.

(編輯紫蘇)

收稿日期2014-12-01

中圖分類號：R446.11

文獻標識碼：B

文章編號：1001-7585(2015)13-1790-02