肺癌組織中PAX2、PAX5的表達變化及意義

任胤龍，侯俊娜，趙玉苗，徐勤福，許愛國(鄭州大學第一附屬醫院，鄭州450052)

肺癌組織中PAX2、PAX5的表達變化及意義

任胤龍，侯俊娜，趙玉苗，徐勤福，許愛國(鄭州大學第一附屬醫院，鄭州450052)

摘要:目的觀察肺癌組織中轉錄因子PAX2、PAX5的表達變化，并探討其意義。方法采用免疫組化染色法檢測29例份非小細胞肺癌(NSCLC，NSCLC組)、18份小細胞肺癌(SCLC，SCLC組)、13例份肺良性增生(對照組)組織PAX2、PAX5，分析PAX2表達與NSCLC臨床病理參數的關系、PAX5表達與SCLC臨床病理參數的關系。結果NSCLC組、SCLC組、對照組PAX2陽性率分別為82.8%(24/29)、0(0/18)、7.7%(1/13)，NSCLC組分別與SCLC組、對照組比較，P均＜0.01; PAX5陽性率分別為6.7%(2/29)、83.3%(15/18)、7.7%(1/13)，SCLC組分別與NSCLC組、對照組比較，P均＜0.01。PAX2表達與NSCLC臨床病理參數無相關性; PAX5表達與SCLC有無淋巴結轉移有關(P＜0.05)。結論NSCLC組織中PAX2表達升高，SCLC組織中PAX5表達升高; PAX2可能與NSCLC的發生相關，而PAX5則與SCLC的發生、轉移存在一定聯系。

關鍵詞:肺腫瘤;肺癌;轉錄因子

惡性腫瘤早已成為威脅人類健康的重大疾病，而肺癌占有較大比例。隨著工業化進展、空氣質量下降及煙草的蔓延，肺癌的發病率與病死率呈逐年上升趨勢。根據細胞學特征及病理類型不同，肺癌主要分為非小細胞肺癌(NSCLC)和小細胞肺癌(SCLC)，由于NSCLC與SCLC的發生、發展及轉移存在本質區別，臨床上對于NSCLC與SCLC的診斷、治療有著明顯的不同，其患者預后也存在較大差異。國外已有學者發現，PAX家族成員在許多類型腫瘤發生過程中廣泛表達，并與腫瘤的生長轉移存在一定聯系［1］。轉錄因子PAX5已被發現在B淋巴細胞瘤中高度表達，除此之外在成神經細胞瘤及乳腺腫瘤中發現PAX5有所表達。PAX2則在一些腎臟腫瘤、膀胱癌、乳腺癌、前列腺腫瘤和輸卵管腫瘤被發現［2］。然而，在肺癌中關于PAX2及PAX5的研究國內外報道較少。本研究觀察了肺癌組織中PAX2、PAX5的表達變化，并探討其意義。

1　材料與方法

1.1材料收集2014年12月～2015年4月鄭州大學第一附屬醫院收治并經纖維支氣管鏡下取肺支氣管活檢標本60例份，其中NSCLC標本29例份(NSCLC組)、SCLC標本18例份(SCLC組)及肺良性增生13例份(對照組)。NSCLC組患者男23例，

女6例;年齡35～78歲，平均60.28歲;腺癌12例，鱗癌17例;有吸煙史19例，無吸煙史10例;有淋巴結轉移26例，無淋巴結轉移3例;臨床分期Ⅰ+Ⅱ期16例，Ⅲ+Ⅳ期13例。SCLC組患者男13例，女5例;年齡48～75歲，平均62.56 歲;有吸煙史10例，無吸煙史8例;有淋巴結轉移16例，無淋巴結轉移2例;臨床分型局限型9例，彌散型9例。所有肺癌患者均為首次確診，且未接受放化療及其他抗癌治療。對照組患者男9例，女4例;年齡25～75歲，平均56歲;炎性增生12例，肺錯構瘤1例。

1.2組織PAX2、PAX5檢測PAX2、PAX5兔抗人單克隆抗體購自美國Abcam生物公司，Envision試劑盒購自北京中杉金橋生物公司。標本經10%中性甲醛固定，常規石蠟包埋，切片厚度5 μm，免疫組化Envision法染色，陰性對照用PBS代替一抗，操作步驟嚴格按照說明書進行。結果判定標準: PAX2陽性反應為細胞核或細胞質中呈現深黃色及棕色顆粒，PAX5陽性反應為細胞核著色呈現深黃色及棕色，在高倍鏡下隨機選取5個視野，計算200個細胞的染色情況，根據染色強度進行評分:無著色(0分)、淺黃色(1分)、棕黃色(2分)、棕褐色(3分)，染色細胞比例＜10%(0分)、10%～25%(1分)、25%～50%(2分)、＞50%(3分)，染色強度積分與染色細胞比例積分乘積≥3分提示陽性表達。

1.3統計學方法采用SPSS17.0統計軟件。組間比較采用χ2檢驗，相關性分析采用Spearman相關分析法。P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1各組PAX2、PAX5表達比較NSCLC組、SCLC組、對照組PAX2陽性率分別為82.8%(24/ 29)、0(0/18)、7.7%(1/13)，NSCLC組分別與SCLC組、對照組比較，P均＜0.01; PAX5陽性率分別為6.7%(2/29)、83.3%(15/18)、7.7%(1/13)，SCLC組分別與NSCLC組、對照組比較，P均＜0.01。

2.2 PAX2表達與NSCLC臨床病理參數的關系結果見表1。由表1可知，PAX2表達與NSCLC臨床病理參數無相關性。

2.3 PAX5表達與SCLC臨床病理參數的關系結果見表2。由表2可知，PAX5表達與SCLC有無淋巴結轉移有關(P＜0.05)。

3　討論

PAX屬轉錄因子，因其結構中有一段高度保守的pairedbox(配對盒)基因結合區而得名。以往普遍認為，腫瘤的發生與成熟細胞去分化密切關聯，PAX基因在一些組織器官的發生發展、修復再生中發揮著復雜且重要的作用，而在正常發育成熟的細胞中基本不表達，因此PAX基因被普遍認為與眾多腫瘤的發生發展有著聯系［3］。PAX2位于人類10號染色體q25上，已被證實與中樞神經系統、眼、腎臟、甲狀腺等器官的發生相關，并有國內外學者在卵巢癌、乳腺癌、結腸癌、前列腺癌及淋巴瘤等腫瘤組織中發現PAX2高度表達［4～10］。Muratovska等［1］分別在卵巢癌和膀胱癌中發現PAX2的高表達與腫瘤細胞的生長存在相關性，并證實腫瘤生長與PAX2調節ADAM10相關。Monte等［5］發現，PAX2在三苯氧胺所致子宮內膜腫瘤中有所表達，并與腫瘤的惡性程度相關。本研究顯示，NSCLC組PAX2表達較高，而SCLC組并未發現PAX2表達，出現這種結果的原因主要考慮由于NSCLC與SCLC的發生來自于不同細胞系。因此，我們認為PAX2可能與

NSCLC的發生有關。

表1　PAX2表達與NSCLC臨床病理參數的關系

表2　PAX5表達與SCLC臨床病理參數的關系

PAX5作為PAX家族的另一成員，其在1989年被Barberis等［11］確認為一種B細胞特異性轉錄因子，對B細胞的發育、增殖和分化起著關鍵作用;不久之后人們發現PAX5不僅作為B細胞特異性的轉錄因子并且能夠調節CD19(編碼B細胞特異性的表面蛋白)的表達［12］。隨著對PAX5研究的不斷深入，人們發現PAX5不僅表達于B淋巴細胞，同時在一些腫瘤如成神經細胞瘤、神經內分泌腫瘤、骨髓瘤中均有表達。Baumann等［13］在關于成神經細胞瘤的研究中發現，與侵襲性較低的有功能型成神經細胞瘤相比，侵襲性較高的無功能型成神經細胞瘤中PAX5的表達更為顯著。在關于高度侵襲性的SCLC細胞株的類似研究中，同樣有文獻報道PAX5高表達，而在NSCLC中未見報道。在關于成神經細胞瘤的研究中，敲除PAX5結果導致瘤細胞的侵襲性降低這一現象使學者考慮PAX5不僅與瘤細胞的增殖并且可能與其轉移相關［13，14］。Stuart等［15］發現，在成膠質細胞瘤中PAX5基因的活化可能使p53等抑癌基因的轉錄受到抑制，細胞獲得生長優勢，保持分裂活躍，最終促成腫瘤發生或惡性進展。除此之外，Kanteti等［16］在關于SCLC腫瘤細胞的研究中發現，PAX5在SCLC中呈高表達，而在NSCLC中并未見發現PAX5的表達，這與本實驗結果相似。Kanteti還通過敲除肺癌小細胞中的PAX5基因，發現失去PAX5表達的癌細胞其生存復制能力明顯低于未敲除PAX5基因的癌細胞，并且失去表達PAX5的癌細胞中伴有c-Met的表達缺失，因而他們認為PAX5可直接調控c-Met的轉錄表達，從而促進癌細胞增殖、分化、運動及侵襲。本研究發現，SCLC組PAX5陽性率高于NSCLC組與對照組，同時發現PAX5陽性表達與SCLC是否有淋巴結轉移有關。

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收稿日期:( 2015-06-07)

通信作者:許愛國

基金項目:河南省重點科技攻關計劃項目(112102310180)。

文章編號:1002-266X(2015)35-0080-03

文獻標志碼:B

中圖分類號:R734.2

doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2015.35.031