胱抑素C和β2-微球蛋白聯(lián)檢在糖尿病腎病早期診斷中的意義探討

陶鵬輝

河南省信陽市中心醫(yī)院檢驗科，河南信陽 464000

糖尿病腎病(diabetic nephropathy，DN)是糖尿病(diabetes mellitus，DM)微血管病變的重要并發(fā)癥之一，以腎小球基底膜增厚及毛細血管間腎小球硬化病變引起腎臟的損傷。近幾年糖尿病（DM）的發(fā)生率呈現(xiàn)出逐年增高的趨勢，且趨于年輕化。糖尿病腎病（DN）是糖尿病最常見的并發(fā)癥之一，同時也導致了慢性腎功能不全，但是糖尿病腎損傷在早期具有可逆性。早期DN無明顯癥狀和體征，易被忽視，當發(fā)展到臨床DN期時，尿蛋白持續(xù)陽性，腎小球濾過率(GFR)逐漸降低，腎臟的病理損傷已不可逆轉[1]。由于DN起病隱匿，進展緩慢，不易被察覺，如果發(fā)現(xiàn)持續(xù)性蛋白尿，腎功能發(fā)生了不可遏制地進行性惡化，其病死率是尿蛋白正常的糖尿病患者的15倍以上。因此，預防糖尿病患者演變成糖尿病腎病具有政要的意義。因此早期全面診斷顯得尤為重要，早期檢測和診斷DN對預防及治療DN起了決定性作用[2]。該研究對該院2013年10月—2014年10月期間收治的196例DN患者，通過血清胱抑素C和β2-微球蛋白聯(lián)檢，探討在糖尿病腎病早期臨床診斷中的意義，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該實驗研究對象選自該院內(nèi)分泌科門診和住院部，依據(jù)WHO／ISH糖尿病診斷標準確診了196例為DN患者，所有患者排除了原發(fā)性腎臟疾病和糖尿病急性并發(fā)癥均被確診為糖尿病，其中男125例，女71例，年齡25～78歲。隨機選取同期在該院體檢的80例健康者為對照組，其中男56例，女24例，年齡22～75歲。

1.2 方法

實驗對象采血前至少禁食8 h，使用真空管靜脈采血3 mL，分離血清用于CysC和β2-MG測定，均采用免疫比濁法檢測血清CysC和β2-MG含量，CysC試劑由德賽診斷系統(tǒng)（上海）有限公司提供，β2-MG試劑由重慶博士泰生物技術有限公司提供，使用德國生產(chǎn)的羅氏MODULAR P800全自動生化分析儀測定。CysC參考范圍 0.53～1.02 mg/L，β2-MG 參考范圍 1～3 mg/L。

1.3 統(tǒng)計方法

該研究所有數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行處理，計量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差（±s）表示，組間差異采用方差分析，兩組比較采用t檢驗。

2 結果

對照組患者胱抑素C檢測結果平均值為（0.48±0.14）mg/L，β2-MG 平均值為（0.86±0.22）mg/L；研究組胱抑素 C 檢測結果平均值為（1.54±0.42）mg/L，β2-MG 檢測平均值為（5.64±1.83）mg/L，研究組患者血清胱抑素C與β2-MG檢測值均顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。 見表 1。

表 1 CysC 與 β2-MG含量測定結果分析比較[mg/L，（±s）]

組別 例數(shù) 胱抑素C β2-MG糖尿病腎病組對照組P 196 80 1.54±0.42 0.48±0.14<0.05 5.64±1.83 0.86±0.22<0.05

3 討論

近年來2型糖尿病腎臟病中腎小管間質(zhì)損傷越來越受到關注，實驗室檢測方法也越來越多。目前血Cr、血Urea是臨床上最常用的檢測腎小球濾過率的指標，其中由于Cr受飲食、性別、肌肉量以及腎小管的排泌等因素的影響不能準確反映GFR，而Urea不符合內(nèi)源性（GFR）標志物的要求。由于腎臟具有強大的代償功能，當糖尿病患者腎功受到輕度受損時，血Cr、血Urea初步無變化，會維持在正常水平，只有在腎小球受到嚴重損害時，GFR下降到正常水平的50% 以下時，血Cr、血Urea才出現(xiàn)明顯升高趨勢，因此血Cr、血Urea對早期腎病無診斷意義[3]。糖尿病腎病的病因主要分為三大方面：危險因素包括病程、高血糖、高血壓、心血管疾病等；病理基礎是腎臟的結構改變；發(fā)病機制包括高血糖導致腎血流動力學改變、多元醇通道活性增加、葡萄糖轉運體功能亢進、血管緊張素轉化酶基因插入/缺失多態(tài)性。早期DN又稱微量白蛋白尿期，24 h或白天短期收集的尿清蛋白排泄率≥30～300 mg/d。若6個月內(nèi)連續(xù)尿液檢查有兩次尿白蛋白排泄為30～300 mg/d，并排除其他可能引起尿MA增加的原因，即可診斷為早期DN。常規(guī)檢測尿蛋白為持續(xù)陽性，尿蛋白定量＞0.5 g/d，白蛋白的排泄率＞200 μg/min，或者尿中白蛋白排出量＞300 mg/d，排除其他腎臟疾病可能性后，確診為臨床DN。DN是由于體內(nèi)長期出現(xiàn)高血糖狀態(tài)導致腎小球基底膜不可逆變性，從而使腎小管間質(zhì)纖維增生，進而腎小球功能逐漸喪失，最終演變成為終末期腎衰竭。人們一旦罹患DN，不僅使DM的治療難度增加，更使患者的生命安全受到嚴重威脅。

胱抑素C為一種小分子蛋白質(zhì)，相對分子量13 kD，由120個氨基酸組成，是胱氨酸蛋白酶的一種抑制劑，機體所有有核細胞均可產(chǎn)生，生成速度比較穩(wěn)定，胱抑素C在循環(huán)血液中經(jīng)腎小球濾過后幾乎均被清除，它是一種內(nèi)源性的、能夠反映腎小球濾過率的標志物。胱抑素C濃度變化趨勢與血清肌酐濃度變化趨勢相一致，呈現(xiàn)相互顯著相關性。初照成[4]的研究結果表明，胱抑素C升高水平能夠反映出2型糖尿病患者腎損害的不同程度，對糖尿病早期診斷和腎損害程度評估起到重要作用。此外，在多項胱抑素C與其他糖尿病腎病早期診斷指標相比，胱抑素C對檢測腎小球早期損害有較高的靈敏度，可作為臨床判斷糖尿病腎功能早期受損的可靠標志物之一。CysC是一個評價腎功能的新指標，其敏感性、特異性明顯優(yōu)于反映腎功能狀況的其他實驗室指標，對于評價腎小球濾過率有非常重要的價值。當腎小球受損導致GFR下降時，血清CysC水平就會迅速上升，并隨著病情的加重逐漸增高，是一種反映GFR變化的理想內(nèi)源性標志物。當出現(xiàn)早期或輕度腎損傷時，血液循環(huán)中的胱抑素C水平可能會顯著升高，與以往腎功能評價的常規(guī)指標相比較，胱抑素C的靈敏度和特異性更能得到臨床認同[5-7]。檢測血清胱抑素C的目的是檢驗腎小球濾過率，已成為首選的腎功能評價指標。CysC作為新的腎功能判斷指標之一，效果更優(yōu)于Scr的腎功能判斷指標[8]。該實驗中，糖尿病腎病血清胱抑素C檢測水平明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。CysC與其他腎功能檢測項目組合可顯著提高檢測的特異性和靈敏度。因此，CysC是一個靈敏度較高和實用強的指標，在無證據(jù)有腎病糖尿病患者診斷中，可以定期檢測CysC濃度變化來觀察其與糖尿病微血管病變的關系。

β2-微球蛋白，英文縮寫為β2-MG，β2-MG檢測是一種比較簡便、精確而又靈敏的衡量糖尿病患者輕度腎功能減退和療效觀察的方法。因此，β2-微球蛋白的測定在臨床上有很高的價值。β2微球蛋白是一種小分子球蛋白，分子質(zhì)量為11800，是99個氨基酸組成的單鏈多肽，由血小板、淋巴細胞、多形核白細胞產(chǎn)生。β2微球蛋白是人類淋巴細胞表面抗原（HLA）的β鏈（輕鏈）的一部分，不含糖，包含一對二硫鍵，其結構與免疫球蛋白穩(wěn)定區(qū)相似。β2-MG廣泛存在于唾液、尿液、血漿、腦脊液以及初乳中，正常人的β2-微球蛋白的合成率與從細胞膜上的釋放量比較恒定。β2-MG可以自由通過腎小球，99.9%在近端腎小管被吸收，在腎小管上皮細胞中分解，因此正常情況下，β2-微球蛋白的排出量非常少。β2-MG是一種小分子量蛋白，是判斷腎功能的備選指標[9]。可以通過檢測β2-MG對近端腎小管的功能進行監(jiān)測。在慢性間質(zhì)性腎炎、慢性腎衰、急性腎小管損傷或壞死等情況下，尿β2-MG含量顯著升高。腎移植患者血的尿β2-MG也明顯提高，這提示了機體產(chǎn)生排異反應，腎移植手術后可以連續(xù)測定β2-MG含量，作為腎小管和腎小球功能的評價指標。糖尿病腎病患者早期腎小管功能出現(xiàn)變化，其尿β2-MG也相應提高。該研究也顯示，糖尿病腎病組血清中β2-MG的含量比正常對照組明顯升高，差異具有顯著性。預防糖尿病腎病，應該更多的了解β2-MG這一檢查，因為β2-MG檢查是及時發(fā)現(xiàn)糖尿病腎病的重要指標。臨床醫(yī)生通常應用β2-MG這一指標來監(jiān)測糖尿病腎病的發(fā)生。通過β2-MG檢測數(shù)值的變化，結合發(fā)病癥狀以及病史陳述可以較為準確的診斷病情。定期檢測β2-MG，對于的DN預防及早期治療都起的了積極作用。β2-微球蛋白是人類血清中的一種小分子蛋白，主要由淋巴細胞產(chǎn)生，廣泛存在于有核細胞的細胞膜上，可較為完全的通過腎小管，進而重被吸收或降解[10]。糖尿病腎病早期有腎小管功能的改變，血尿β2-MG相應的會升高，主要是由于體內(nèi)腎小球和腎小管都受到損傷，或者某些部位產(chǎn)生過多造成的。因此，對糖尿病患者進行有效的β2-MG篩查是必要的，因為這樣能盡早決定適當?shù)闹委煷胧┮詼p緩糖尿病早期腎損傷進行性發(fā)展。患者如果長期處于高糖狀態(tài)，微血管灌注量會減少，腎小球濾過率降低，改變了基底膜通透性，微量白蛋白漏出，腎功能減退，隨之腎儲備能力減退直至喪失，導致β2-MG含量上升。在腎損害早期β2-MG就能發(fā)生顯著提高，因此可以作為反映腎小球濾過功能損傷的靈敏指標，也可作為腎小管近端小管受損的特異性指標。

β2-微球蛋白極易通過正常腎小球濾過膜，但幾乎全部由近曲小管攝取并代謝。因此，各種原因引起的近端腎小管受損，尿中β2-微球蛋白均見增高。如果血中β2-微球蛋白高于正常值3倍時，腎小球濾過量超過腎小管重吸收能力，此時尿中β2-微球蛋白也會升高，常見于惡性腫瘤（如多發(fā)性骨髓瘤、慢性淋巴細胞性白血病）、結締組織病、糖尿病腎病和肝病等。當腎小球濾過功能受損或超出濾過負荷時，β2-微球蛋白含量立刻表現(xiàn)出顯著升高趨勢，而CysC只有在腎功能受損后才發(fā)生明顯的變化，因此相比于CysC，β2-MG在對于腎功能的變化檢測過程中具有較高的靈敏性，科預防和阻止早期糖尿病腎病的發(fā)生。胱抑素C檢測可反映腎小管功能受損情況，β2-MG也是反映糖尿病早期腎損傷的重要指標。β2-MG是腎小球濾過功能損傷的標志，但單獨檢測易受許多因素影響。該研究也表明，隨著β2-MG的增加，血清CysC明顯升高，差異有顯著性。糖尿病腎病組和健康對照組的血清CysC與β2-MG檢測水平均明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），說明血清CysC與β2-微球蛋白是可作為監(jiān)測腎功能早期受損較靈敏的指標，二者聯(lián)合檢測能大大提高檢測陽性率，對于監(jiān)測早期糖尿病腎病的發(fā)生和病情發(fā)展程度有重要意義，可快速而又準確判斷糖尿病患者是否患DN。臨床醫(yī)生可根據(jù)患者的病情及其他實際情況，合理選擇實驗項目進行聯(lián)合檢測，以早期發(fā)現(xiàn)腎損傷并及時治療，保護患者腎功能。綜上所述，血清CysC與β2-MG在DN患者中均有較高的含量，二者聯(lián)合檢測能達到互補作用，從而提高對DN的早期診斷，特別是對有些臨床癥狀不典型的病人，減少了誤診和漏診，對DN的早期診斷、病情監(jiān)測、療效觀察和預后判斷等均有非常重要的臨床意義。

[1]何曉峰,劉曉城,劉迎見.實驗性糖尿病大鼠早期腎臟結構和功能的改變[J].中華實用醫(yī)學,2002,4(13):14-16.

[2]李素萍.血清胱抑素C與尿微量白蛋白在2型糖尿病腎病早期診斷中的價值[J].中國醫(yī)學檢驗雜志,2008,9(2):61-65.

[3]李海霞,張春麗,徐國賓,等.健康人群血清半胱氨酸蛋白酶抑制劑C與肌酐分布及其評價慢性腎臟病患者腎小球濾過功能的比較研究[J].中華檢驗醫(yī)學雜志,2006,29(11):970-974.

[4]初照成.胱抑素C在2型糖尿病不同腎損害期的變化[J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2009,30(11):1070-1071.

[5]羅威.胱抑素C在腎功能不同損害期的比較研究[J].檢驗醫(yī)學與臨床,2010,7(19):2083-2084.

[6]蔣維,李淑蓮,羅君.血清胱抑素C對早期腎損傷的臨床研究[J].檢驗醫(yī)學與臨床,2010,7(4):352-353.

[7]李維娜.血清胱抑素C測定對腎功能早期損傷的診斷價值[J].黑龍江醫(yī)學,2012,36(8):596-597.

[8]Akbari A,Lepage N,Keely E,et al.Cystatin‐C and beta trace protein as markers of renal function in pregnancy[J].BJOG,2005,112(5):575-578.

[9]Donadio,Lucchesi A,Ardini M,et al.Cystatin C,beta2-microglobulin,and retinol-binding protein as indicatorsof glomerular filtration rate:comparison with plasma creatinine[J].J Pharm Biomed Anal,2001,24(5/6):835-842.

[10]張金蓉.糖尿病患者尿微量清蛋白、尿β2-微球蛋白、糖化血紅蛋白及血脂聯(lián)合檢測的臨床意義[J].檢驗醫(yī)學與臨床,2010,7(22):2468-2469.