趙媛媛，王妙英，焦朋增，趙 鵬

(1. 河北省邯鄲市中心醫院，河北 邯鄲 056001；2. 河北省邯鄲市第一醫院，河北 邯鄲 056001)

孕產婦血清中Toll-4、MMP-9、sICAM-1水平與早產和未足月胎膜早破的相關性研究

趙媛媛1，王妙英1，焦朋增2，趙 鵬1

(1. 河北省邯鄲市中心醫院，河北 邯鄲 056001；2. 河北省邯鄲市第一醫院，河北 邯鄲 056001)

[摘要]目的 探討孕產婦血清中Toll受體-4(Toll-4)、基質金屬酶-9(MMP-9)、血清可溶性細胞間黏附分子(sICAM-1)水平與早產和未足月胎膜早破(PPROM)的相關性。方法 收集孕產婦71例，根據有無早產、胎膜早破分為早產臨產組22例；未足月胎膜早破組25例；先兆早產組24例；另外選擇同期在門診行產檢的正常孕婦23例納入無產兆組。比較4組孕婦血清Toll-4、MMP-9、ICAM-1的差異及分析三者的相關性。結果 先兆早產組、早產臨產組、未足月胎膜早破組Toll-4、MMP-9、ICAM-1水平均明顯高于無產兆組(P均<0.05)，早產臨產組高于先兆早產組(P均<0.05)，未足月胎膜早破組高于早產臨產組(P均<0.05)。結論 孕產婦血清Toll-4、MMP-9、ICAM-1水平與早產、胎膜早破存在一定的相關性，其異常升高預示著母體存在較嚴重的炎癥反應，增加了早產、胎膜早破的風險。因此動態監測孕產婦血清Toll-4、MMP-9、ICAM-1水平有利于指導早產、胎膜早破的處理，合理應用抗生素和選擇分娩的時機。

Toll受體4；基質金屬酶-9；血清可溶性細胞間黏附分子-1；早產；胎膜早破

早產是指孕婦在28～36孕周期間分娩，是產科常見的不良妊娠結局。近年來，早產發生率呈逐年升高趨勢，這與剖宮產率的增加、生殖道感染率和助孕技術的開展有關。早產是導致胎兒圍生期并發癥和死亡率增加的重要危險因素。目前，早產的發生機制尚不明確，近期的研究認為，細胞因子參與了早產的發生過程。Toll受體4(Toll-4)、基質金屬酶-9(MMP-9)、血清可溶性細胞間黏附分子-1(sICAM-1)與早產、胎膜早破密切相關[1]。本研究對早產及未足月胎膜早破孕婦血清中的Toll-4 、MMP-9、 ICAM-1的含量進行檢測，以探討早產、胎膜早破的原因和機制，為早產、胎膜早破的防治提供參考。

1 臨床資料

1.1一般資料 收集2011年5月—2013年8月在邯鄲市中心醫院婦產科住院分娩的孕產婦71例，孕產婦均無糖尿病、高血壓、妊娠期肝內膽汁淤積癥等并發癥或伴生病，均為單胎妊娠，在28～36孕周。根據有無早產、胎膜早破分為早產臨產組22例,年齡(25.2±3.0)歲，孕周(35.4±2.3)周，孕次(1.6±0.7)次。未足月胎膜早破組25例，年齡(26.4±3.7)歲，孕周(34.8±2.1)周，孕次(1.8±0.9)次。先兆早產組24例,年齡(25.6±2.4)歲，孕周(33.9±1.9)周，孕次(1.8±1.0)次。另外選擇同期在門診行產檢的正常孕婦23例納入無產兆組,年齡(26.9±3.3)歲，孕周(34.5±1.6)周，孕次(1.9±0.8)次。4組年齡、孕周和孕次比較差異無統計學意義，具有可比性。所有對象均知情同意并簽署知情同意書。

1.2診斷標準[2]早產臨產：在妊娠28～36周(包括36周)間，規律宮縮，宮口擴張≥2 cm。先兆早產：在妊娠28～36周(包括36周)間，就診時有不規則宮縮,每小時<4次；宮口未擴張或宮頸管消退<75%，無胎膜早破。未足月胎膜早破：在妊娠28～36周(包括36周)間，宮縮無規律，胎膜破裂。

1.3指標檢測 收集上述研究對象入院當日的肘部靜脈血3 mL，經3 000 r/min離心10 min后取上清液，置于-20 ℃保存待測。Toll-4、MMP-9、ICAM-1測定采用酶聯免疫分析(ELISA)法檢測，試劑盒均由北京晶美生物工程有限公司提供。酶標儀購自濟南博華儀器有限公司,輸入標準濃度后，測吸光度，繪制標準曲線，在測定樣品吸光度，根據吸光度計算樣品含量。

2 結 果

2.1各組Toll-4、MMP-9、ICAM-1水平比較 先兆早產組、早產臨產組、未足月胎膜早破組Toll-4、MMP-9、ICAM-1水平均明顯高于無產兆組(P均<0.05)，早產臨產組高于先兆早產組(P均<0.05)，未足月胎膜早破組高于早產臨產組(P均<0.05)。見表1。

2.2Toll-4、MMP-9、ICAM-1間的關系 直線相關性分析顯示，Toll-4分別與MMP-9、ICAM-1呈正相關性(r=0.628,r=0.549,P<0.05)；MMP-9與ICAM-1呈正的相關性(r=0.719,P<0.05)。

3 討 論

表1 各組Toll-4、MMP-9、ICAM-1水平比較情況

注：①與無產兆組比較，P<0.05；②與先兆早產組比較，P<0.05；③與早產臨產組比較，P<0.05。

MMPs是一組鋅依賴的蛋白水解酶的總稱，是參與細胞外基質代謝重要物質。MMP-9是一個新的MMPs家族成員，能選擇性作用于Ⅳ型膠原，使其降解。Ⅳ型膠原是胎膜的主要結構成分，主要來源于絨毛膜和羊膜基底層，其在炎癥反應和免疫反應調控、促血管生成、細胞遷移中發揮著重要的作用，并可活化其他MMPs。胎膜早破是引起早產的主要原因之一，其發生與膠原含量、結構和代謝改密切相關。胎膜張力的維持依賴于細胞外基質各成分合成和降解間的平衡。MMP-9參與了早產、胎膜早破及羊膜腔感染的發生過程。研究表明，正常分娩時羊水總MMPs水平明顯高于中、晚孕期，給予抗MMP-9單克隆抗體后羊水中總MMPs水平明顯降低，提示MMP-9是羊水MMPs的主要成分，其水平高低直接影響了膠原的降解程度[3]。因此推測MMP-9在人類分娩和宿主宮內感染起著調節作用。本研究結果顯示，先兆早產組、早產臨產組、未足月胎膜早破組孕產婦血清MMP-9水平明顯高于無產兆組，且先兆早產組<早產臨產組<未足月胎膜早破組，提示MMP-9可能與早產、未足月胎膜早破有著密切關系。但許多早產和胎膜早破被認為是由絨毛膜羊膜感染引起，但大部分孕婦伴有亞臨床癥狀[4]。MMP-9可能在亞臨床癥狀出現之前即進入血液循環，并降解細胞外基質中的Ⅳ型膠原，致使膠原纖維水平降低，從而降低胎膜彈性變形和抗張能力，進而增加了臨產破裂或胎膜早破的風險。MMP-9可降解子宮細胞外基質中的膠原，增加子宮平滑肌的順應性，促進子宮收縮[5]。本研究中無產兆組孕婦血清有一定的MMP-9表達，提示其在早產或胎膜早破中可能有一個啟動閾值，但具體數值多少，在妊娠哪個孕周，尚需擴大樣本、延長隨訪時間進一步研究證實。

早產、胎膜早破的發生與局部炎癥反應有關。細胞因子參與了炎癥反應過程，在早產、胎膜早破中發揮著重要的作用。而大多數細胞因子由Toll樣受體與NF-KB信號傳導途徑產生和發揮作用[6]。Toll-4是與早產、胎膜早破關系最密切的一種Toll樣受體,是機體啟動對革蘭陰性細菌天然免疫反應的主要因素[7]。IL-6、MMPs等與宮縮啟動密切相關細胞因子是通過活化Toll-4受體信號傳導完成轉錄。Scharfe-Nugent等[8]采用免疫組化法和RT-PCR法檢測足月、胎膜早破、早產產婦胎膜中的Toll-4受體表達情況，結果發現Toll-4受體主要表達于巨噬細胞、中性粒細胞、中間滋養細胞、羊膜上皮細胞和蛻膜細胞。Arce等[9]研究發現，合并絨毛膜羊膜炎的早產孕婦血清Toll-4水平顯著高于足月產孕婦。本研究亦發現，在先兆早產、早產及未足月胎膜早破孕產婦血清Toll-4水平均高于無產兆的孕婦，而早產、未足月胎膜早破孕婦增高更顯著，提示Toll-4參與了早產、未足月胎膜早破的啟動機制。

sICAM-1是細胞間黏附分子-l(ICAM-1)在血清中的存在形式，主要與白細胞表面黏附分子組淋巴細胞功能相關抗原(LFA-1)相互作用促進白細胞黏附和聚集，參與炎癥反應[10]。sICAM-1可受細胞因子調節參與宮頸成熟與擴張[11]。

早產、胎膜早破的啟動過程即是炎癥反應的介導過程， 感染可激活單核巨噬細胞，釋放一系列細胞因子，如白細胞介素(IL)-6、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)等，這些細胞因子可刺激感染病灶中的微血管內皮細胞內的ICAM-1轉移至細胞膜表面，同時促進細胞內ICAM-1的合成，致使細胞膜表明ICAM-1顯著增加，當胎盤、胎膜細胞表面ICAM-1水平達到一定程度時即會釋放入羊水和母體血液中而使sICAM-1水平增高。sICAM-1水平的升高可促使中性粒細胞、巨噬細胞黏附、聚集于血管壁，并浸潤損傷區，釋放氧自由基、MMPs和IL-8、TNF-α等，激活補體系統引起細胞間的免疫識別機細胞毒性作用，加速對胎膜結構的破壞，誘發早產、胎膜早破。Bird等[12]研究發現，早產孕婦血中sICAM-1水平增高，而胎膜早破孕婦血清中sICAM-1水平更高。研究表明，雖然正常妊娠期血清sICAM-1表達增加，但在妊娠期各階段及足月臨床前血清sICAM-1水平無明顯差異，提示正常妊娠時血清sICAM-1水平沒有明顯升高，其水平的升高可能預示著早產、胎膜早破的發生[13]。本研究結果也證實了這一結論。

Toll-4、MMP-9、ICAM-1均與炎癥反應有關。正常情況下，Toll-4、MMP-9、ICAM-1相對穩定，當出現生殖道亞臨床感染時，羊水、妊娠組織及血清中的細胞因子增加，從而促進Toll-4、MMP-9、ICAM-1的合成，3種物質濃度的增加則又激活靜止的細胞因子，誘發子宮收縮而引起分娩。本研究結果顯示，三者間具有相關性，提示它們可能在早產、胎膜早破中具有協同作用。然而在實際工作中發現并非所有感染的孕婦都發生早產或胎膜早破，這說明只有當母體內炎癥反應狀態調節出現紊亂，Toll-4、MMP-9、ICAM-1出現異常升高即可導致早產的發生。

綜上所述，孕產婦血清Toll-4、MMP-9、ICAM-1水平與早產、胎膜早破存在一定的相關性，其異常升高預示母體存在較嚴重的炎癥反應，增加了早產、胎膜早破的風險。因此動態監測孕產婦血清Toll-4、MMP-9、ICAM-1水平有利于指導早產、胎膜早破的處理，合理應用抗生素和選擇分娩的時機。

[1] 鄭曉明. 未足月胎膜早破的病因研究進展[J]. 廣東醫學院學報,2013,31(1):89-90

[2] 樂杰. 婦產科學[M]. 6版. 北京：人民衛生出版社，2004：92;94

[3] 許茜,劉振紅,靳鈺. 早產胎膜早破患者血清及羊水中IL-6、MMP-9、TNF-α水平變化及意義[J]. 山東醫藥，2010，50(34):15-16

[4] 孫瑜,陳倩,邊旭明. 北京市七家三級甲等醫院宮內感染病例分析[J]. 中華圍產醫學雜志,2009,12(5):342-345

[5] 盧丹,王志學,王曉玲. 基質金屬蛋白酶9及其組織抑制物1的水平變化與胎膜早破發病的關系[J]. 中華婦產科雜志,2006,41(1):20

[6] 邢志偉,趙富璽.Toll樣受體4/核因子κB與早產[J]. 醫學綜述，2009，15(5):18-19

[7] 光瑾，叢林.Toll樣受體4在早產中的表達及意義[J]. 安徽醫學，2010，31(6):684-685

[8]Scharfe-NugentA,CorrSC,CarpenterSB,etal.TLR4provokesinflammationinresponsetofetalDNA:mechanismforfetallossinpretermbirthandpreeclampsia[J].Immunol,2012,188(11):5706-5712

[9]ArceRM,BarrosSP,WackerB,etal.IncreasedTLR4expressioninmurineplacentasafteroralinfectionwithperiodontalpathogens[J].Placenta, 2009,30(2):156-162

[10] 劉艷,劉建西,蔣小亞. 細胞間黏附分子-1在早產胎膜早破中的表達及臨床意義[J]. 實用婦產科雜志,2009,25(6):357-359

[11] 劉艷,劉建西,蔣小亞，等. 細胞間粘附分子-1與亞臨床絨毛膜羊膜炎的關系探討[J]. 貴州醫藥，2010，34(5):10-11

[12]BirdMD,MorganMO,RamirezL，etal.Decreasedpulmonaryinflammationafterethanolexposureandburninjuryinintercellularadhesionmolecule-1knockoutmice[J].JBurnCareRes,2010,31(4):652-660

[13] 戴鐘英. 胎膜早破的病因和發病機理[J]. 實用婦產科雜志,2001,15(1):3-4

王妙英，E-mail：3277855056@qq.com

10.3969/j.issn.1008-8849.2015.26.029

R0714.433

B

1008-8849(2015)26-2930-03

2014-11-20