梔子柏皮湯不同配伍在大鼠體內的藥代動力學研究

黃健忠

梔子柏皮湯不同配伍在大鼠體內的藥代動力學研究

黃健忠

目的 探討梔子柏皮湯不同配伍對梔子苷體內藥代動力學的影響。方法 將30只SD大鼠隨機分為5組, 每組6只。分別灌胃含等量梔子苷的梔子苷單體溶液及梔子、梔子-炙甘草、梔子-黃柏、梔子-黃柏-炙甘草湯劑, 采用HPLC方法測定給藥后不同時間血藥濃度, 比較藥代動力學參數。結果 湯劑組AUT及T1/2顯著高于梔子苷單體組, 梔子-炙甘草、梔子-黃柏及梔子黃柏-炙甘草組T1/2、AUT0-t及AUT0-∞均顯著高于梔子組, 梔子-黃柏-炙甘草組AUT0-t、AUT0-∞、T1/2、Tmax及Cmax均高于其他組, 組間比較差異有統計學意義(P＜0.05)。結論 梔子柏皮湯藥材間相互作用有助于促進梔子苷吸收, 從而提高藥物生物利用度。

梔子柏皮湯；配伍；藥代動力學

梔子柏皮湯源于《傷寒論》, 由梔子、黃柏和炙甘草三種中藥組成, 在身黃發熱癥、傷寒治療方面具有良好功效［1］。藥代動力學可用于研究不同配伍對藥物在體內的吸收、分布、代謝和排泄的影響, 從而明確發揮藥效的物質基礎［2］。本文就梔子柏皮湯不同配伍對梔子苷體內藥代動力學的影響進行研究。現報告如下。

1 材料與方法

1.1 藥品與試劑 梔子苷對照品購自中國藥品生物制品檢定所, 批號：110749-200714；中藥梔子、黃柏和炙甘草購自桂平市人民醫院藥劑科；色譜純乙腈和甲醇購自美國Tedia公司；分析純冰乙酸購自國藥化學試劑有限公司。

1.2 儀器 高效液相色譜儀Agilent 1200型(美國Ailent公司)；高速冷凍離心機Z32HK型(上海賀默儀器科技有限公司)；真空干燥箱DZF-6020MBE型(上海博訊實業有限公司)。

1.3 動物 SD大鼠, 雌雄各15只, 230～250 g, 南方醫科大學動物實驗中心提供, 合格證號：0092481。

1.4 方法

1.4.1 標準溶液配制 精確稱量1 mg梔子苷對照品, 甲醇溶解配制成0.1 g/L儲液, 倍比稀釋成0.5、1、2、4、8、16、20 mg/L的系列工作液。

1.4.2 湯劑制備及含量測定 按10∶6∶3比例稱取梔子、黃柏及炙甘草, 100℃蒸餾水煎煮3次, 20 min/次, 煎液合并過濾取上清, 濃縮后取100 μl上清液甲醇稀釋至1000倍, 混勻后離心取上清液, 0.22 μm濾膜過濾后HPLC分析測定梔子苷含量。梔子、梔子-黃柏及梔子-炙甘草的湯劑制備及梔子苷含量測定方法同上。

1.4.3 色譜條件 Agilent TC-C18色譜柱(4.6 mm×250 mm, 5 μm)；柱溫25℃；進樣量為10 μl；流動相為0.1%冰乙酸水溶液-甲醇；檢測波長為238 nm。

1.4.4 藥代動力學實驗 將30只SD大鼠隨機分為5組,每組6只。雌雄各3只, 實驗前12 h禁食, 以40 mg/kg梔子苷的標準給予梔子苷單體、梔子、梔子-炙甘草、梔子-黃柏和梔子-黃柏-炙甘草灌胃, 于給藥后6、15、30、45 min及1、2、4、6、8、10 h進行眼眶取血, 肝素離心管離心取上清后凍存待測。

1.4.5 血漿樣品預處理 取200 μl血漿, 加600 μl乙腈混勻后離心取700 μl上清, 真空干燥后用100 μl的30%甲醇溶液進行復溶, 然后測定。

1.5 統計學方法 采用3P97藥代動力學軟件進行血藥濃度-時間數據分析, 采用SPSS17.0統計學軟件進行統計分析,計量資料以均數±標準差( x-±s)表示, 采用t檢驗；計數資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 線性范圍 取200 μl SD大鼠空白血漿, 加入梔子苷系列工作液, 分別配制成0.05、0.10、0.20、0.40、0.80、1.20、1.60及2.00 mg/L樣品進行測定, 以梔子苷峰面積為縱坐標,以梔子苷濃度為橫坐標, 得到線性方程為Y=0.6926X+0.0248 (r=0.9997), 線性范圍為0.06～2.00 mg/L。

2.2 藥代動力學研究 5組SD大鼠分別灌胃含等量梔子苷的梔子苷單體溶液及梔子、梔子-炙甘草、梔子-黃柏、梔子-黃柏-炙甘草湯劑, 經血藥濃度-時間數據分析結果表明,湯劑組AUT及T1/2顯著高于梔子苷單體組, 梔子-炙甘草、梔子-黃柏及梔子黃柏-炙甘草組T1/2、AUT0-t及AUT0-∞均顯著高于梔子組, 梔子-黃柏-炙甘草組AUT0-t、AUT0-∞、T1/2、Tmax及Cmax均高于其他組, 組間比較差異有統計學意義(P＜0.05)。

3 討論

中藥配伍是中醫藥基本理論之一, 是中醫藥現代化研究的重要組成部分之一［3］。目前, 中藥方劑配伍的研究已經從組織器官、動物模型發展到了藥細胞, 甚至分子水平［4］。中藥藥代動力學在考察中藥體內分布、吸收、代謝和排泄方面具有重要作用［5］。本研究初步建立了利用HPLC研究梔子柏皮湯不同配伍對梔子苷體內藥代動力學影響的測定方法, 并利用此方法研究發現, 湯劑給藥比梔子苷單體給藥生物利用度高, 全組方給藥比其他配伍給藥生物利用度高, 從而說明,梔子柏皮湯藥材間相互作用有助于促進梔子苷吸收, 從而提高藥物生物利用度。

［1］ 張英豐, 董宇, 朱曉新.中藥復方藥代動力學研究的方法與思考.中國天然藥物, 2008, 6(5):321-324.

［2］ 韓靜文, 黃成, 宋玨, 等.梔子柏皮湯不同配伍在大鼠體內的藥代動力學研究.中國實驗方劑學雜志, 2014, 20(8):110-113.

［3］ 黃立華, 夏侯林, 王建安.息香在大鼠體內的藥代動力學研究.時珍國醫國藥, 2013, 24(4):813-814.

［4］ 張鵬, 楊秀偉.紫花前胡苷在大鼠體內的藥代動力學研究.中國藥理學通報, 2008, 24(9):1240-1244.

［5］ 劉益華, 李晶, 林曼婷, 等.梔子有效成分梔子苷的現代研究進展.中國藥學雜志, 2012, 47(6):406-309.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.05.203

2014-09-19］

537200 廣西桂平市人民醫院藥劑科