HbA1c免疫比濁法在生化檢驗及臨床中的實際應用

楊利紅

HbA1c免疫比濁法在生化檢驗及臨床中的實際應用

楊利紅

目的 探討免疫比濁法檢測糖化血紅蛋白(HbA1c)在生化檢驗及臨床中的局限性及實際應用。方法 200份體檢標本(A1組), 及已確診的糖尿病患者標本100份(B1組)均檢測HbA1c, 將該項目標定后再次檢測HbA1c分為A2組與B2組。均在HbA1c重新定標前、后分別檢測并同時檢測血糖。結果 A1組與A2組、B1組與B2組HbA1c結果相比差異有統計學意義(P＜0.05), A1、 B1組中分別有49%和37%的假性增高, 整體結果偏高；B2組中HbA1c增高者41例, 血糖增高者35例, 疑似糖尿病未控制或控制不良；A2組12例血糖增高而HbA1c正常, 其中9例疑似剛發現的糖尿病患者；7例HbA1c假性增高。結論 免疫比濁法查HbA1c的結果很不穩定, 不能較準確的反映患者8周前的血糖水平。提醒臨床醫生應將此結果僅作為參考, 對新發現的和未控制及糖尿病患者的治療監測做出正確評估。

免疫比濁法；糖化血紅蛋白； 血糖 ； 糖尿病；假性增高

全球約有1.5億糖尿病患者, 而中國占近1/6, 并以飛快的速度增長, 糖尿病及其諸多并發癥給社會、家庭帶來了沉重的心理壓力和經濟負擔［1,2］。糖尿病的監測和治療越來越受到各界的重視, 而對診斷或檢測糖尿病病情, 及時發現新的或未控制的糖尿病患者及評定糖尿病的控制程度, 對預后和并發癥的預測有重要意義的。作者發現免疫比濁法檢測HbA1c時有一定局限性和弊端, 限制了其在檢驗及臨床中的實際應用, 現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本院職工2014年7月5日體檢標本200份(A1組), 及本院已確診的糖尿病患者標本100份(B1組)均檢測HbA1c, 將該項目標定后再次檢測HbA1c分為A2組與B2組。比較A1組與A2組、B1組與B2組的結果, 與血糖檢測結果相聯系, 對可疑結果定期跟蹤隨訪。

1.2 方法及試劑 在奧林帕斯Au640全自動生化分析儀上, HbA1c和血糖均使用北京利德曼生化股份有限公司生產的試劑、質控物及校準物。HbA1c方法學為免疫濁度法, 標本為EDTA抗凝標本, 血糖檢測為葡萄糖氧化酶法, 使用靜脈血血清。

1.3 診斷標準 體檢標本A組的血糖結果＞6.1 mmol/L或(和)HbA1c＞6.5%的跟蹤隨訪, HbA1c為8周復查, 血糖為2周復查。

1.4 統計學方法 所有數據采用SPSS17.0統計學軟件進行統計分析。計量資料以均數±標準差表示, 采用t檢驗。P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 校準前后結果的比對 A1組(7.1±1.9)mmol/L與A2組(5.6±1.5)mmol/L、B1組(13.4±2.7)mmol/L與B2組(11.2±2.1)mmol/L, HbA1c結果相比差異有統計學意義(P＜0.05), 與標定后結果相比：A1組與A2組相比有49%的假性增高, B1與B2組相比有37%的假性增高, 標定前整體結果偏高。

2.2 標定后結果的分析 校準物標定后, A、B兩組300份標本中標定后B2組中HbA1c增高者41份, 血糖增高者35份, 疑似糖尿病未控制或控制不良患者；另外A2組12例血糖增高而HbA1c正常, 隨訪后發現, 3例假性血糖增高, 9例疑似剛發現的糖尿病患者, 7例HbA1c假性增高, 后多次檢測HbA1c和血糖均為正常, 。

2.3 A組血糖(5.06±0.34)mmol/L, B組血糖(7.73±0.29)mmol/L,通過比對HbA1c結果, 懷疑HbA1c在整體上存在一定的假增高率, 結果很不穩定, 不能較準確的反映患者8周前的血糖水平。

3 討論

糖化血紅蛋白增高對人體的影響是多方面的, 它可以誘發糖尿病腎病(DN)、動脈硬化、白內障等并發癥, 同時也是心肌梗死、心血管疾病和腦卒中死亡的一個高危因素。妊娠期糖尿病(GDM)對母嬰危害巨大, 不控制糖尿病可使先天異常的發生率由非糖尿病孕婦的2%～3%增加到7%～9%, 控制糖化血紅蛋白＜8%, 對避免巨大胎兒、死胎、畸胎、子癇前期更有意義。因此監測糖化血紅蛋白不論對糖尿病患者疾病控制情況, 還是糖尿病患者的篩選等方面都有重要的意義。美國1型糖尿病控制及并發癥試驗(DCCT)和英國2型糖尿病控制與并發癥(UKPDS)均把糖化血紅蛋白作為糖尿病的一個重要評價標準, 都充分肯定了強化治療在阻止血管并發癥發生、發展的重要作用。其對糖尿病微血管病變早期診斷有著重要意義［3-6］。而事實上, 糖化血紅蛋白達標非常不理想, 我國大城市2型糖尿病患者的血糖控制達標率僅占25.9%。有調查表明51%的患者從未聽說過糖化血紅蛋白, 10%以上的醫師對患者進行的糖化血紅蛋白檢測＜1次/年。在我國, 只有1/4的醫師認識到糖化血紅蛋白是衡量血糖控制的重要標準。

HbA1c的金標準方法為高效液相色譜(HPLC)法, 免疫比濁法所受影響因素較多, 試劑的穩定性、抗原的含量、抗原抗體及反映的比例性等都可以影響其檢驗結果［7-9］, 方法學的局限性導致了HbA1c檢測的不穩定性。在很大程度上不能準確反應患者8周前的血糖水平, 應當用質控物每日監控、校準物有效標定來保障結果的準確性。其測定不僅僅受血糖濃度的影響, 在很大程度上還受血紅蛋白的影響, 凡伴隨著血紅蛋白代謝異常的疾病均可造成HbA1c的異常。血紅蛋白增加的疾病均可使HbA1c升高, 而伴隨血紅蛋白增加疾病的糖尿病患者HbA1c要比單純的糖尿病患者的HbA1c高。同樣, 糖尿病伴紅細胞更新率增加、紅血病、貧血、慢性失血、尿毒癥患者(紅細胞壽命縮短)等均可引起HbA1c的減低。另外還有一些藥物的影響(如心得安、嗎啡、雙氫克脲塞等)可使糖化血紅蛋白下降, 而用大量阿司匹林、維生素C可使其增高。所以在檢測HbA1c時還應充分考慮患者的綜合情況加以具體分析。不能單純的看HbA1c的高低就加以判斷。

英國糖尿病前瞻性研究結果顯示：糖化血紅蛋白每下降1%, 糖尿病相關的死亡率降低21%, 心肌梗死發生率下降14%, 腦卒中發生率下降12%, 微血管病變發生率下降37%,白內障摘除術下降19%, 周圍血管疾病導致的截肢或死亡率下降43%, 心力衰竭發生率下降16%［10］。因此, 世界權威機構對糖化血紅蛋白都有著明確的控制指標, 美國糖尿病學會(ADA)建議糖化血紅蛋白控制＜7.0%, 國際糖尿病聯盟(IDF)建議糖化血紅蛋白控制標準為＜6.5%, 我國的糖尿病指南也建議糖尿病患者糖化血紅蛋白控制在6.5%以下。作者建議：糖尿病控制好的患者可以2～3個月檢測1次, 控制欠佳者1～2個月檢測1次, 對于妊娠糖尿病(特別是1型糖尿病),就要每月檢測1次, 以便調整用藥, 使病情得到最好的控制。如果HbA1c＞10%, 胰島素劑量就需要重新調整。對監護中的糖尿病患者, 其HbA1c濃度改變2%就有明顯的臨床意義, 可以說明血糖控制的好壞。提醒臨床醫生應將此免疫比濁法的檢測結果作為參考, 密切聯系血糖及其他指征, 對新發現的和未控制的糖尿病患者及糖尿病患者的治療監測做出正確評估。

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10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.18.051

2015-01-20］

454000 焦煤(集團)中央醫院檢驗科