喉癌組織中CD70的表達及其意義

張小芬 陶 春 強 欣 烏力吉白乙 張 娟 孫曉宇

(內蒙古民族大學醫學院病理教研室，內蒙古 呼倫貝爾 028000)

吸煙和酗酒等因素都是促進喉癌發展的重要因素。其他已被證明的危險因素包括輻射暴露、人乳頭瘤病毒(HPV)感染、遺傳因素、空氣污染、慢性胃食道反流以及木材或金屬粉塵的職業暴露〔1〕。分化抗原簇70(CD70)、腫瘤壞死因子相關的細胞表面配體已被證實參與腫瘤細胞的細胞免疫識別作用。在小鼠腫瘤模型中發現，腫瘤細胞與CD70轉染能夠增強小鼠抗腫瘤的免疫反應〔2〕。已經被證實表達于直腸癌細胞，系統性紅斑狼瘡患者外周血T淋巴細胞。本研究將探討CD70在喉癌組織中的表達及其潛在的臨床意義。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 選取喉癌組織32例，其中男20，女12例，年齡52～75〔平均(64.3±7.4)〕歲。其中聲門型15，聲門上型17。對照組織采用喉返神經損傷引起的喉麻痹病人的聲帶組織，男14例，女8例;年齡22～58歲。

1.2 免疫組織化學染色 CD70的抗體采用鼠抗人的IgG單克隆抗體，免疫組織化學試劑盒購置于武漢博士德生物公司，操作步驟按試劑盒說明進行。將喉部分切除術手術取下的喉癌組織標本及對照組織經磷酸鹽緩沖液(PBS)反復沖洗，利用4% 的多聚甲醛固定，經石蠟包埋后，用切片機以厚5 μm進行切片。石蠟切片經脫水后，以3%過氧化氫浸泡15 min消除內源性過氧化酶活性。加熱修復抗原，冷卻后用山羊血清封閉抗原30 min后，加入鼠抗人的CD70單克隆抗體工作液，抗體濃度為1∶100，室溫孵育2 h后，緩沖液沖洗，并進行鏈霉親和素-生物素復合物(SABC)法免疫組織化學染色，經二氨基聯苯胺(DAB)顯色及蘇木精復染，中性樹膠封片后進行分析及

1.3 結果判定 至少隨機觀察10個高倍視野。依照陽性細胞數量，可分為:弱陽性(+，陽性細胞總數＜25%);中等陽性(，陽性細胞總數25%～49%);強陽性(，陽性細胞總數＞50%以上)。

1.4 統計學方法 采用SPSS13.0軟件行Wilcoxon秩和檢驗。

2 結果

免疫組織化學結果顯示，喉癌組織32例中，CD70表達弱陽性為10例，中等陽性為15例，強陽性為7例，陽性率為100%。而對照聲帶組織中，僅有2例CD70表達為弱陽性，陽性率為9%。兩組有顯著差異(P＜0.05)。

3 討論

相關研究已經證實，CD70是一個腫瘤壞死因子相關的細胞表面配體分子，參與抗腫瘤免疫反應，是激活T細胞重要的協同刺激分子。CD40及CD70分子共同表達的腫瘤細胞生長速度放緩，凋亡率增加。吳晗等〔3〕利用RT-PCR檢測CD70在肝癌細胞系和肝癌組織的表達顯示CD70基因在肝癌中呈陽性表達，并可抑制Jurkat淋巴細胞的增殖活性，在肝癌細胞免疫逃逸中起了重要作用。類似的研究發現 CD70基因在直腸癌中部分呈陽性表達，并同樣可以抑制淋巴細胞的增殖活性，可能也參與了直腸癌細胞免疫逃逸，可作為指導治療和預后判斷的參考指標〔4〕。本研究證實了喉癌細胞可能通過表達CD70進行免疫逃逸。該基因的表達可以作為潛在的生物標志物用于喉癌的早期診斷和預測預后。此外，可以探討該基因的表達激活表達與頸部淋巴結轉移的關系，以便為部分喉癌患者量身定制免疫治療方案〔5〕。然而，CD70在喉鱗狀上皮細胞癌(LSCC)抗腫瘤免疫及轉歸相關性的研究還需要進行長期隨訪，以便深入了解CD70的深入作用，為其應用在喉癌的早期診斷及生物治療方面提供基礎。

1 Marur S，Forastiere AA.Head and neck cancer:changing epidemiology，diagnosis，and treatment〔J〕.Mayo Clin Proc，2008;83(4):489-501.

2 Sirikanjanapong S，Lanson B，Amin M，et al.Collision tumor of primary laryngeal mucosal melanoma and invasive squamous cell carcinoma with IL-17A and CD70 gene over-expression〔J〕.Head Neck Pathol，2010;4(4):295-9.

3 吳 晗，韓振龍，曹英林，等.CD70在肝癌中的表達及其對淋巴細胞增殖抑制作用的研究〔J〕.山東大學學報(醫學版)，2008;46(1):27-35.

4 謝錫駒，王 鋒.直腸癌中CD70的表達及其對淋巴細胞增殖抑制作用〔J〕.江蘇醫藥，2010;36(15):1764-8.

5 Wei C，Sirikanjanapong S，Lieberman S，et al.Primary mucosal melanoma arising from the eustachian tube with CTLA-4，IL-17A，IL-17C，and IL-17E upregulation〔J〕.Ear Nose Throat J，2013;92(1):36-40.