不規(guī)則抗體檢測(cè)應(yīng)用于孕婦產(chǎn)前檢查的價(jià)值分析

謝楠楠 謝小燕

血型不規(guī)則抗體即除A、B、O型系統(tǒng)外的其他抗體，它可以通過(guò)注射、母嬰血型不合妊娠等多種途徑產(chǎn)生[1]。不規(guī)則抗體不僅能引發(fā)免疫溶血性輸血反應(yīng)及增加交叉配血難度，還可以經(jīng)由胎盤(pán)進(jìn)入胎兒體內(nèi)，造成新生兒溶血病[2]。因此加強(qiáng)孕婦產(chǎn)前不規(guī)則抗體檢測(cè)具有十分重要的意義。為探討不規(guī)則抗體檢測(cè)在孕婦產(chǎn)前檢查中的價(jià)值，本研究比較分析行/不行不規(guī)則抗體檢測(cè)的孕婦新生兒溶血情況，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2010年1月～2013年1月來(lái)揭陽(yáng)市人民醫(yī)院進(jìn)行產(chǎn)前檢查的200例夫婦血型不合孕婦為研究對(duì)象行不規(guī)則抗體檢測(cè)，年齡22～39歲，平均（26.7±1.4）歲，孕次 1～5 次，平均（2.3±0.3）次。溶血新生兒納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）出生后3 d內(nèi)出現(xiàn)黃疸癥狀，癥狀慢慢加重；（2）足月新生兒1～4 d內(nèi)血清總膽紅素在220.6 μmol/L以上，早產(chǎn)兒則在256.5 μmol/L以上，且2周內(nèi)沒(méi)有下降；（3）排除藥物等其他原因引發(fā)溶血病。選擇同期未行不規(guī)則抗體檢測(cè)的200例夫婦血型不合孕婦為對(duì)照組。2組孕婦在年齡、妊娠情況等方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，有可比性。

1.2 方法

1.2.1 準(zhǔn)備工作 （1）設(shè)備及試劑。不規(guī)則抗體檢測(cè)中應(yīng)用的設(shè)備及試劑包括離心機(jī)、漩渦混合器、抗A/B抗體、凝聚胺介質(zhì)試劑、巰基乙醇應(yīng)用液（0.2 mol/L）、標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞及廣譜抗人球蛋白等。（2）血液標(biāo)本準(zhǔn)備。①夫婦2人均分別采取凝血、抗凝血4 mL和2 mL，其中抗凝血和抗凝劑混合均勻；②于37℃環(huán)境中孵育至凝血45～60 min，離心血清備用；③利用抗凝血生理鹽水清洗3次，配制紅細(xì)胞懸液（濃度為3%～5%）；④酶處理紅細(xì)胞。先準(zhǔn)備好酶溶液及抑制劑，均2 mL，A細(xì)胞懸液及B細(xì)胞懸液，均1 mL，37℃環(huán)境下孵育10 min，然后把1 mL的酶液分別加入到A、B細(xì)胞懸液中，37℃環(huán)境下處理5 min，之后利用抑制劑停止反應(yīng)，最后經(jīng)由生理鹽水清洗3次，配制酶（3%～5%）紅細(xì)胞懸液備用。

1.2.2 ABO血型及Rh血型檢測(cè) （1）ABO血型。此類(lèi)血型檢測(cè)方式包括2種：①玻片法。正定型：將抗A試劑、抗B試劑均在玻片（已標(biāo)記）上滴1滴，并把受檢者紅細(xì)胞分別滴入A、B試劑中，通過(guò)緩慢傾斜2 min讓其充足混合，若凝集提示陽(yáng)性；反定型：將A紅細(xì)胞、B紅細(xì)胞試劑均在紙板（已標(biāo)記）上滴1滴，分別滴入1滴受檢者血清，混合觀察凝集情況。②試管法。于做好標(biāo)記的2支試管中分別滴入1滴抗A、B試劑，隨后把1滴受檢者紅細(xì)胞懸液加入2支試管中，然后進(jìn)行離心，速率為3400轉(zhuǎn)/min，離心1 min，觀察凝集情況。（2）Rh血型定型。采取玻片法，把1滴抗D滴在玻片上，并于其上加入1滴受檢者紅細(xì)胞懸液，若凝集提示陽(yáng)性。

1.2.3 不規(guī)則抗體檢測(cè) 于3支試管中均加入2滴血清、1滴分型細(xì)胞、700 μL低離子介質(zhì)及2滴凝聚胺，然后進(jìn)行離心，3400轉(zhuǎn)/min，離心1 min，去掉上清，在3支試管中分別加入2滴重懸液，輕輕晃動(dòng)觀察凝集情況，若凝集提示不規(guī)則抗體陽(yáng)性。另外對(duì)于血型為Rh陰性血的孕婦來(lái)說(shuō)，還要進(jìn)行抗人球蛋白檢查，以確定不規(guī)則抗體檢查結(jié)果。

1.2.4 IgG抗A/B效價(jià)測(cè)定 采取酶法測(cè)定方式，選取受檢者血清50 μL、2-Me應(yīng)用液50 μL，將其封閉，于37℃環(huán)境下孵育15 min，然后加入700 μL生理鹽水進(jìn)行稀釋。選擇1∶32、1∶42、1∶128、1∶256 4 管，在其中加入 1 滴應(yīng)酶處理紅細(xì)胞A/B，37℃環(huán)境下孵育 7 min，離心 1 min，3400轉(zhuǎn)/min，若效價(jià)在1∶64及以上提示陽(yáng)性。對(duì)于孕婦血型為“O”、丈夫血型“AB”來(lái)說(shuō)，行IgG抗A及抗B效價(jià)測(cè)定；對(duì)于夫婦血型相符者來(lái)說(shuō)，則不用行IgG抗A/B效價(jià)測(cè)定。另外，對(duì)IgG抗A/B效價(jià)在1∶64及以上的孕婦進(jìn)行臨床干預(yù)。

1.3 觀察指標(biāo) 對(duì)200例受檢者不規(guī)則抗體檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。觀察和統(tǒng)計(jì)2組孕婦新生兒溶血病發(fā)生情況，包括溶血病發(fā)病率、新生兒血清總膽紅素濃度等。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 對(duì)本組研究的數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。計(jì)量資料采用“±s”表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用例數(shù)（n）表示，計(jì)數(shù)資料組間率（%）的比較采用χ2檢驗(yàn)；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不規(guī)則抗體檢出情況 200例受檢孕婦中，IgG抗A/B效價(jià)在1∶64及以上者103例，占51.5%；IgG抗A/B效價(jià)在1∶64以下者97例，占48.5%。不規(guī)則抗體檢測(cè)陽(yáng)性12例，占6.0%；陰性188例，占94.0%。

2.2 2組新生兒溶血病發(fā)生情況比較 對(duì)照組200例孕婦新生兒溶血病發(fā)生30例（15.0%），受檢組新生兒溶血病發(fā)生8例（4%），2組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=14.074，P＜0.05）。2組新生兒血清總膽紅素濃度比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=11.589，P＜0.05）。見(jiàn)表 1。

表1 2組新生兒溶血病發(fā)生情況比較［n（%）］

3 討論

近年來(lái)，血型不合引發(fā)的新生兒溶血病在臨床上比較常見(jiàn)，主要原因包括以下幾點(diǎn)：（1）母嬰血型不合，母體紅細(xì)胞缺乏胎兒紅細(xì)胞中含有的某種血型抗原，當(dāng)這種血型抗原經(jīng)由胎盤(pán)進(jìn)入母體后，會(huì)對(duì)母體產(chǎn)生相應(yīng)的免疫性抗體[3]。（2）母體通過(guò)輸血等方式或天然存在于胎兒紅細(xì)胞血型抗原對(duì)應(yīng)的抗體，這些抗體經(jīng)由胎盤(pán)進(jìn)入胎兒體內(nèi)，與紅細(xì)胞出現(xiàn)反應(yīng)，導(dǎo)致其紅細(xì)胞被破壞，進(jìn)而出現(xiàn)溶血病[4]。溶血病主要表現(xiàn)為黃疸、貧血、血清總膽紅素濃度較高等，嚴(yán)重時(shí)導(dǎo)致新生兒智力下降[5]。因此，產(chǎn)前及時(shí)的進(jìn)行不規(guī)則抗體檢測(cè)對(duì)預(yù)防新生兒溶血病具有十分重要的意義。

相關(guān)報(bào)道稱(chēng)母體為“O”型血、新生兒為“A”型時(shí)，新生兒溶血病發(fā)生率比新生兒B型高，這是因?yàn)樘杭t細(xì)胞A位點(diǎn)比B位點(diǎn)多[6]。本研究中，200例孕婦經(jīng)不規(guī)則抗體檢測(cè)，檢出IgG抗A/B效價(jià)在1∶64及以上高達(dá)51.5%，不規(guī)則抗體檢測(cè)陽(yáng)性率為6.0%[7-8]。對(duì)上述孕婦進(jìn)行臨床干預(yù)，結(jié)果顯示，受檢組新生兒溶血病發(fā)生率為4.0%。明顯低于對(duì)照組的15.0%（P＜0.05），且受檢組新生兒血清總膽紅素濃度明顯低于對(duì)照組（P＜0.05）。可見(jiàn)產(chǎn)前進(jìn)行不規(guī)則抗體檢測(cè)，能及時(shí)發(fā)現(xiàn)血型抗體效價(jià)異常孕婦，給予相應(yīng)的干預(yù)處理，以降低新生兒溶血病發(fā)生率，減輕溶血程度[9]。建議孕婦在妊娠16～20周開(kāi)展第1次血型抗體檢查，于30周開(kāi)始第2次檢查[10]。

綜上所述，產(chǎn)前不規(guī)則抗體檢測(cè)可作為預(yù)防孕婦產(chǎn)后新生兒溶血病診斷的重要指標(biāo)之一。

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