單核細(xì)胞HLA—DR及血清細(xì)胞因子表達(dá)水平對(duì)重癥患者免疫抑制診斷價(jià)值的研究

摘要：目的 探討重癥患者外周血單核細(xì)胞HLA-DR的表達(dá)及部分血清細(xì)胞因子水平對(duì)其免疫抑制狀態(tài)的診斷價(jià)值。方法 采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)27例重癥患者外周血單核細(xì)胞HLA-DR的表達(dá)，用CBA技術(shù)檢測(cè)血清細(xì)胞因子IL-10等的水平，同時(shí)追蹤患者相關(guān)感染指標(biāo)。結(jié)果 27例重癥患者中HLA-DR表達(dá)率<40%者5例，IL-10（7.603±4.123）pg/mL，HLA-DR表達(dá)率40%～85%者10例，IL-10（7.368±9.995）pg/mL，HLA-DR表達(dá)率>85%者12例，IL-10（2.248±1.556）pg/mL。結(jié)論 重癥患者外周血單核細(xì)胞HLA-DR表達(dá)率低于正常對(duì)照，監(jiān)測(cè)HLA-DR的表達(dá)及相關(guān)細(xì)胞因子水平對(duì)判斷患者的免疫功能狀態(tài)有較好的臨床意義。

關(guān)鍵詞：重癥患者；免疫抑制；HLA-DR；細(xì)胞因子；CBA

重癥患者易發(fā)生免疫抑制，如不能及時(shí)糾正，死亡率會(huì)大大增加[1]。因此，正確評(píng)估重癥患者免疫狀態(tài)十分重要，但目前尚未明確指標(biāo)能確定患者發(fā)生了免疫抑制。大量研究表明，大的手術(shù)、創(chuàng)傷及器官移植可造成HLA-DR表達(dá)下降，且與其后的感染并發(fā)癥及膿毒癥有一定的相關(guān)性[2-4]。也有研究者圍繞著免疫反應(yīng)涉及的細(xì)胞因子，提出了一系列監(jiān)測(cè)指標(biāo)[5]。本文擬以重癥患者為研究對(duì)象，探討外周血單核細(xì)胞HLA-DR的表達(dá)及部分血清細(xì)胞因子水平對(duì)免疫抑制狀態(tài)的診斷價(jià)值。

1資料與方法

1.1一般資料 患者組：27例 為2012～2013年本院ICU收治的外科創(chuàng)傷患者。對(duì)照組：27例為2012～2013年本院體檢中心的健康人群

1.2試劑與儀器 熒光素標(biāo)記單克隆抗體及同型對(duì)照檢測(cè)試劑，流式細(xì)胞儀均為美國(guó)BD公司產(chǎn)品。

1.3方法 所有患者在ICU內(nèi)接受常規(guī)監(jiān)測(cè)和治療，記錄患者一般情況。抽取患者外周血檢測(cè)HLA-DR，檢測(cè)結(jié)果以表達(dá)HLA-DR的單核細(xì)胞占全部被檢單核細(xì)胞的百分比表示。并同時(shí)留取血清標(biāo)本檢測(cè)細(xì)胞因子。

1.4數(shù)據(jù)分析及統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。檢測(cè)數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 HLA-DR在CD14+單核細(xì)胞上的表達(dá) 健康對(duì)照組HLA-DR表達(dá)率>85% ，重癥組為（66.8±28.1）% 。以HLA-DR表達(dá)<40%和>85%作為界值將重癥患者分為三組，見表1。

2.3細(xì)胞因子檢測(cè)結(jié)果 重癥組與對(duì)照組 IL-4、IL-6、IL-10 的平均水平存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05），見表2。

2.4 HLA-DR表達(dá)率和細(xì)胞因子水平的關(guān)系 第Ⅰ組和第Ⅱ組的IL-4、IL-6水平具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）；第Ⅰ組和第Ⅲ組的IL-4、IL-10水平具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）；第Ⅱ組和第Ⅲ組的IL-6水平具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05），見表3、圖1。

圖1

注：橫坐標(biāo)為HLA-DR的表達(dá)率；縱坐標(biāo)為IL-4、IL-6、IL-10檢測(cè)值的對(duì)數(shù)。

圖1顯示隨著HLA-DR表達(dá)率的升高，血清IL-4水平呈上升趨勢(shì)、IL-10水平呈下降趨勢(shì)、IL-6水平則呈現(xiàn)出先上升后下降的變化。

3討論

足夠的HLA-DR表達(dá)對(duì)于特異性免疫和非特異性免疫系統(tǒng)功能都是十分重要的[4]。已有許多研究表明，大手術(shù)后、嚴(yán)重創(chuàng)傷、腫瘤及器官移植等情況可造成mHLA-DR表達(dá)的下降，并且這種下降與其后的感染并發(fā)癥及膿毒癥有一定的相關(guān)性[6]。本實(shí)驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)重癥患者HLA-DR的平均表達(dá)率明顯低于健康對(duì)照組，說明在重癥患者單核細(xì)胞表面HLA-DR抗原表達(dá)受到抑制。HLA-DR表達(dá)強(qiáng)度不僅因人而異，且與疾病或衰老等密切相關(guān)[7]。有研究表明，嚴(yán)重創(chuàng)傷患者HLA-DR的表達(dá)和IL-10呈顯著的負(fù)相關(guān)性[8]，本實(shí)驗(yàn)也得到了相同的結(jié)果。 但I(xiàn)L-10是否是HLA-DR表達(dá)降低的直接原因尚不能完全肯定。實(shí)驗(yàn)還顯示IL-6水平隨著HLA-DR表達(dá)率的增加出現(xiàn)先升后降的變化，而非單純線性關(guān)系，IL-4水平則呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)，這表明血清細(xì)胞因子在發(fā)揮網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)作用時(shí)的復(fù)雜變化。

綜上所述，重癥患者外周血單核細(xì)胞HLA-DR表達(dá)率低于正常對(duì)照，監(jiān)測(cè)HLA-DR的表達(dá)及相關(guān)細(xì)胞因子水平對(duì)判斷患者的免疫功能狀態(tài)有較好的臨床意義。

參考文獻(xiàn)：

[1]姚詠明，柴家科，林洪遠(yuǎn).現(xiàn)代膿毒癥理論與實(shí)踐[M].北京：科學(xué)出版社，2005：402-443.

[2]Volk HD，Reinke P，Doecke WD.Clinical aspects：from systemic inflammation to immunoparalysis'[J].Chem Immunlo，2000，74（1）：162-177.

[3]Lekkou A，arakantza M，Mouzaki A，et al.Cytokine production and monocyte HLA-DR expression as predictors of outcome for patients with community-acquired severe infections[J].Clin Diagn Lab Immunol，2004，11：161-167.

[4]王曉東，李維勤，虞文魁.創(chuàng)傷患者單核細(xì)胞表面人白細(xì)胞抗原-DR表達(dá)變化及其臨床意義[J].中華創(chuàng)傷雜志，2006，22（8）.

[5]寇麗，尤勝義.急性胰腺炎患者外周血單核細(xì)胞HLA-DR表達(dá)與部分細(xì)胞因子水平的觀察[J].天津醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，14（3）.

[6] 林洪遠(yuǎn)，郭旭生，姚詠明.CD14+單核細(xì)胞人類白細(xì)胞抗原-DR預(yù)測(cè)膿毒癥預(yù)后及指導(dǎo)免疫調(diào)理治療的初步臨床研究[J].中國(guó)危重病急救醫(yī)學(xué)，2003，15（3）.

[7]Klava A，Woodhouse LF ， Windsor A ， et al . Interleukin 10 inhibits endotoxin induced mono cyte major histocompatibility complex class Ⅱ upregulation after surgery[J].Br J Surg， 1996，83（5）：688.

[8]Tatsumi H，Ura H，Jkeda S，et al.Surgical influence on Th1/Th2 balance and monocyte surface antigen expression and its relation to infection complicatios[J].World J Surg，2003，27：522-528.

編輯/肖慧