強直性脊柱炎患者血清IL—21、IL—6的變化及意義

摘要：目的 探討強直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）患者血清IL-21、IL-6的變化及臨床意義。方法 應用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）測定50例AS患者（分AS病情活動組30例、穩定組20例）和30例正常對照者血清中IL-21及IL-6水平，并進行比較。結果 AS患者活動期IL-21及IL-6水平明顯高于正常組，差異有統計學意義（P<0.01），穩定期IL-21及IL-6水平與活動期比較明顯降低（P<0.05），但 仍高于正常對照組（P<0.05）。結論 IL-21和IL-6可能協同參與了AS 的發病過程，其水平高低隨病情輕重、病程而變化；臨床上對AS患者應定期觀察其血清中IL-21、IL-6 水平變化，以判斷治療效果及其預后。

關鍵詞：強直性脊柱炎；白細胞介素-21；白細胞介素-6

強直性脊柱炎（ ankylosing spondylitis，AS）是一種進行性發展以脊柱關節和骶髂關節慢性炎癥為主要表現的自身免疫性疾病，其病因及發病機制可能與感染、遺傳和免疫等因素與AS的發生關系密切，但其確切的發病機制仍尚未明確。IL-21 是由活化的CD4+T 等細胞產生的Ⅰ類細胞因子，其特異性結合IL-21R 介導多種生物學效應，對不同階段T、 B 淋巴細胞的分化和自然殺傷（NK） 細胞的增殖均起重要作用。

本文通過檢測AS患者不同時期及健康體檢者血清IL-21、IL-6水平，探討IL-21、IL-6 在AS發病中的作用。報告如下。

1資料與方法

1.1一般資料 2011年9月～2013年11月本院風濕免疫科收治的AS患者50例，男36例，女14例，年齡11～48歲，平均（32±13）歲；其中活動期30例，穩定期20例，診斷均符合1984年修訂的強直性脊柱炎紐約診斷標準[1]。活動指標定義為：ESR>25 mm/h，有脊背痛， 晨僵≥30 min，伴周圍關節腫痛，Bath 強直性脊柱炎活動性指數（BASDAI） ≥4。分對照組為來本院體檢的健康體檢者，共30例，年齡12～49歲，平均（31±12）歲，無AS既往史和家族史，排除其他自身免疫性疾病和感染性疾病表現。

1.2方法 所有患者均采集空腹靜脈血4.0 mL靜置約1.5 h后以3000 r/min離心15 min，分離出血清，置PC管中于-70℃保存，待全部收集完后同批檢測。血清IL-21及IL-6 水平測定均采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗（ELISA法），試劑盒購于生工生物工程（上海） 有限公司，嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

1.3統計學處理 統計學處理，使用SPSS 12.0 統計軟件包進行統計學分析，計量數據以（x±s）表示，組間比較采用t檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

AS患者活動期IL-21 及IL-6顯著高于對照組（P<0.05），穩定期IL-21 及IL-6 水平與活動期比較明顯降低（P<0.05），但仍高于正常對照組（P<0.05）見表1。

3討論

IL-21是一種具有四螺旋束結構的I類細胞因子，由活化的CD4+T細胞、自然殺傷（NK）細胞、濾泡輔助性T細胞（Tfh）和輔助性T細胞（Th）產生[2]，其受體復合物是由IL-21R亞單位和γ鏈組成的異源二聚物，與IL-2家族的其他成員（IL-2、IL-4、IL-7、1L-9、IL-13和IL-15）共用γ鏈。IL-21與轉錄生長因子β（TGF-β）聯用可抑制CD4+CD25+Treg的主要調節者Foxp3的表達，減少CD4+T細胞分化形成Treg細胞[3]；Zhou等[4]研究發現，Thl7細胞自分泌細胞因子IL-21不僅可經IL-6誘導產生，它還可通過自分泌的方式誘導更多的IL-21和IL-23R表達，從而更大程度地促進Thl7細胞極化。IL-21還可以通過激活JAK1和JAK3，STAT-1，STAT-3和STAT-5的磷酸化[5]。目前已證明JAK2（編碼該途徑中JAK3 的配體）與AS 相關[6]，IL-6是由許多細胞產生，包括單核細胞、巨噬細胞、T細胞、B細胞等蛋白質分子量為26 kD，由184個氨基酸組成的糖蛋白。其可以誘導B細胞增殖分化，影響B細胞產生免疫球蛋白如IgM、IgG和IgA，也可誘導T細胞分化。IL-6作為炎癥介質及MHCⅡ抗原誘導物，參與了自身免疫性疾病的發生、發展的全過程[7]。

本研究結果顯示：與正常對照組比較， AS患者治療前血清IL-21、IL-6水平明顯高于正常組。提示IL-21、IL-6與AS的發病相關。①IL-6增高誘導Th17細胞分化，使Th17細胞異常增多，導致IL-21和IL-23R表達，從而更大程度地促進Thl7極化，抑制CD4+CD25+Treg的主要調節者Foxp3的表達，減少CD4+T細胞分化形成Treg細胞，Treg細胞數量減少，不能正常抑制自身反應性T、B細胞的活化和增殖，過度活化增殖的Th細胞通過分泌IL-2、IFN-7等細胞因子，從而引發系統性炎癥反應及機體自身免疫性疾病的發生[8]。②IL-21通過STAT3 編碼JAK-STAT信號通路下游IL-23R 部分成分，導致Th1、Th17 淋巴細胞亞群的活化，從而在功能上連接了初始免疫系統和適應性免疫系統；IL-6的高表達也導致Toll樣受體（Toll like receptors，TLRs）尤其是TLR-2和TLR-4高表達，，使細胞分泌促炎癥細胞因子和趨化因子，從而引發系統性炎癥反應[9]。穩定期IL-21 及IL-6 水平與活動期比較明顯降低（P<0.05），但仍高于正常對照組（P<0.05），說明，AS患者經過治療后IL-21、IL-6水平逐漸降低，①CD4+CD25+調節性T細胞的比例逐步回升，CD4+CD25+調節性T細胞開始抑制自身反應性T、B細胞的活化和增殖。②導致IL-21、IL-6協調產生的Th17細胞減少，而減輕自身免疫。

總之，IL-21、IL-6與AS的發病密切相關，可能通過多種調節途徑參與了AS的發生。檢測血清中IL-21、IL-6水平可為AS的治療及預后判斷提供更多的實驗室依據。

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[9]毋靜，于清宏，曲源，等. TLR.2、TLR-4在強直性脊柱炎患者外周血單個核細胞中的表達及其臨床意義[J].新醫學，2011，3（42）：166-169.編輯/張燕