淺談實驗室自動化血液檢測過程的質量保證

隨著醫學檢測設備的不斷完善，血液ELTSA全自動檢測設備目前已成為醫院檢驗科主要必備試驗設備，能夠處理每天篩查的血液樣本數量并完成試驗所有步驟的系統，可保證試驗性能高度穩定性和重復性，顯著提高檢驗質量并減少了人為因素帶來的操作誤差。

1 正確認識檢驗自動化與檢測質量的關系

通常認為購置了自動化儀器血液樣本檢測質量就會自然得到保證，實際上擁有自動化儀器只是具備了血液采用全自動化儀器檢測的硬件設施，然而全自動化系統有專門質量保證要求，還需要得到各種“軟件”條件的支持和保證，如工作人員培訓的特殊要求，對自動化系統定期有效地維護和校準，試劑的選擇與準備及熟練掌握并靈活運用儀器用戶軟件。

2 確保ELTSA全自動化檢測的質量

2.1操作人員培訓ELTSA 全自動化儀器操作者應具備一定的知識與素質 實驗室人員在具備檢驗知識和工作能力的基礎上要有扎實過硬的血液ELTSA檢驗基礎知識和操作技能，在購進ELTSA去自動化儀器后必須經過系統培訓并取得操作技能上崗證，在儀器使用中能隨時觀察運行狀況，密切注意連結電腦提示，出現故障能及時發現處理等相關培訓。

2.2建立健全實驗室質量管理體系和血液ELTSA自動化檢測操作規程，主要目的是讓工作人員了解質量管理文件的內容，知道應該做什么，如何去做才能保證檢測過程的有效性，確保自動化檢測結果的準確性[1]。

2.3檢測前的樣本處理是保證血液ELTSA自動化檢測質量的重要前提。保證高質量的樣本前處理措施首先應制定檢測前樣本關鍵控制點：①樣本采集后要符合檢測要求；②樣本標識應能識別受檢者身份要有唯一性、準確性；③樣本留置后無遺漏、無污染、無滲漏、無稀釋；④樣本的運送要符合運輸條件；⑤樣本的接收是一個重要接口，由于采集部門與檢測部門的交接容易被忽視，應嚴格控制接收標準；⑥樣本檢測的離心分離處置，防止血凝塊、 血細胞、纖維蛋白懸浮在血清（漿）中，避免全自動加樣器向酶標板中加入上述物質會堵塞全自動酶標分析儀洗板頭的吸液針，導致“吐板”，還會出現假陽性結果。

2.4試劑選擇與準備 選擇適當的試劑是篩查計劃的關鍵，應考慮每種篩查試劑的優點及其局限性和生物學假陽性率，每批試劑進貨后應做質控確認，試驗前查看試劑的批號，必須在有效期內使用，不同試劑批號和組分試劑不得混用。用同一種試劑10次試驗做一次SD平均值評價，這樣才能保證檢測結果的準確性。試劑盒的準備：①室溫保證在正常室溫18℃～22℃內測量并記錄室溫；②每盒盒試劑使用前檢查確認，包括包裝盒外觀完好性，配裝試劑的密閉性和進貨后的質檢報告；③試劑溫度平衡，從冷藏箱中 取出試劑盒放室溫中平衡30min，才能開啟各組分包裝；④酶標板條的擺放應平整，否則將影響加樣和洗板，導致“吐板”，板孔中應潔凈無異物，否則也可導致“吐板”或出現假陽性反應；酶標板應標明檢測項目、樣本編號順序陰陽性及質控對照孔位置；⑤儀器軟件編程嚴格按照試劑盒說明書編制程序，不同檢測項目的實驗步驟，以防檢測失敗。因此保證檢測質量關鍵就是熟練掌握并靈活運用用戶軟件，才能使全自動酶標分析盡量在短時間內檢測更多的酶標板。

2.5標本加樣 ①嚴格控制加樣進板時間，要求精細管理操作，避免拖帶污染，加樣拖帶污染常有發生，特別是使用鋼針加樣更為突出，拖帶污染既有陽性拖帶污染也有陰性拖帶污染的可能。以HBsAg為例，如果加樣方向上相鄰兩份標本，前一個為高濃度抗HBs后一個為HBsAg弱陽性，加入高濃度抗H Bs標本后如果全自動加樣針沒有洗干凈就去加HBsAg弱陽性標本，由于抗原抗體結合作用，就會很可能使本來是HBsAg弱陽性的標本變成HBsAg陰性，因此全自動加樣器應采用一次性加樣吸嘴更為可靠；②全自動ELISA檢測多采用FAME24/20后處理系統，在試劑加樣時仔細調整加樣針進入酶標板微孔距離高度和液體分配流速，保證不濺出，不掛珠，確保加樣準確度。

2.6檢測過程的質量審核 檢測工作結束后報告簽發前的核查是血液檢測過程質量保證的最后一關，有效的核查是保證檢測全過程的符合性和檢測結果的可靠性；是實驗室對血液檢測質量進行監控與持續改進的重要手段。檢測關鍵步驟的控制：如酶標微孔板陰陽對照品的反應性是判斷試驗的有效性和無效性。又如室內質控結論是判斷標本檢測結果的有效性；報告的審核簽發前要對整個過程進行評價，因為檢測整個過程需求可能使多名工作人員共同操作完成的，只有完整、真實、準確及時的記錄才能保證檢查結果的有效性。 最終簽發報告人要嚴格按照檢測結論判定標準對整個過程中關鍵控制點做全面有效的檢查核實，如整個過程的原始記錄是否符合檢測需求，包括常見檢測過程中的“吐板”現象記錄、分析，這對檢測質量保證有著重要意義[2]。

2.7全自動酶標儀的維護與校準 正確使用維護與校準酶標分析儀對保證血液質量有著重大意義。保證其運行的有效性、可靠性和安全性，維護和校準是保證其良好運行的前提。①維護是一種預防性措施，它不是獨立的行為，其操作應納入日維護和月維護，經常除塵，發現問題及時處理；②校準是一種預防性的行為，其方式較多：儀器送國家計量部門檢定，委托儀器廠家校準，參加國家級或省級室間質評和同類或同型儀器比對等。

參考文獻：

[1]郭永建.WHO血液篩查建議書主要內容介紹[J].中國輸血雜志，2010，23（1）：68.

[2]姚勇.檢測報告簽發前對關鍵控制點檢查的探討[J].中國輸血雜志，2009，2（1）：59.

編輯/王敏