腎病綜合征腎素—血管緊張素系統基因多態性研究

摘要：目的 探討腎病綜合征腎素-血管緊張素系統基因多態性。方法 對我院2012年2月～2013年1月收治的腎病綜合征患者臨床治療病例進行抽樣，對40例腎病綜合征患者臨床治療病例進行回顧性研究。將40例腎病綜合征患者列為觀察組，選取40例我院健康檢查結果良好的人作為對照組。采用直接聚合酶鏈反應（Polymease Chain Reaction ，簡稱PCR）與聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態技術（Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism technique，RCP-RFLP）確定患者ACE基因I/D、AT1R基因A1166C與AGT基因M235T的基因型。結果 對照組與觀察組ACE基因I/D基因型的分布有著明顯差異，差異具有統計學意義（P<0.05），對照組與觀察組T1R基因A1166C與AGT基因M235T的基因型分布沒有明顯差異性，不具備統計學意義（P>0.05）。結論 ACE基因I/D基因型分布的多態性與腎病綜合征的發生有著直接的關聯，DD基因與D等位基因是引發腎病綜合征的主要原因。

關鍵詞：腎病綜合征；腎素-血管緊張素；系統基因多態性；ACE基因I/D基因型

腎病綜合征分為原發性、繼發性與遺傳性3大類，其中原發性腎病綜合征屬于原發性腎小球疾病[1]。腎病綜合征的病因有許多種，大多都會引起腎小球基膜通透性的上升，臨床主要表現為蛋白尿、低蛋白血癥、高脂血癥以及高度水腫。目前，用于治療腎病綜合征的方法尚沒有較為統一的標準，不過血管緊張素轉化酶抑制劑與血管緊張素受體阻斷劑在治療腎病綜合征方面具有較為顯著的療效[2]。為了了解腎病綜合征患者其系統基因多態性，我院進行了相關的研究：

1 資料與方法

1.1 一般資料 對我院2012年2月～2013年1月收治的腎病綜合征患者臨床治療病例進行抽樣，對40例腎病綜合征患者臨床治療病例進行回顧性研究。將40例腎病綜合征患者列為觀察組，選取40例我院健康檢查結果良好的人作為對照組。經過醫院倫理委員會審核通過、患者及其家屬同意后進行臨床藥物治療研究。觀察組腎病綜合征患者年齡21～45歲，平均（33.64±4.75）歲，男24例，女16例；對照組健康人年齡22～47歲，平均（32.98±4.21）歲，男20例，女20例。患者在一般資料上不存在較大的差異性，不具備統計學意義（P>0.05）。

1.2 方法

1.2.1 DNA提取 采集觀察組40例腎病綜合征患者靜脈血樣3ml，然后進行抗凝處理，使用乙二胺四乙煙酸（EDTA-K2）浸泡血樣，然后利用改良碘化鈉法提取血樣中白細胞基因組的DNA，將之置于-86℃冰箱中儲存。

1.2.2 多態性檢測 采用聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態技術對患者血樣進行檢測，聚合酶鏈反應引物序列為A1166C-F：5′-CTCATCCACCAAAGAAGCCT-3′，A1166-R：5′-AGAAAAGTCGGTTCAGTCCA-3′。準備各種引物各2μL，加入反應體系，保溫58℃，持續30s。

1.3統計學方法 應用SPSS17.0統計學軟件對上述治療進行數據分析，計量資料采用均數±標準差表示，進行t檢驗，計數資料進行χ2檢驗，P<0.05時為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1基因型頻率 根據多態性研究分析，得出AT1R基因A1166C、ACE基因I/D、AGT基因M235T基因型的頻率基本符合遺傳平衡定律（HARDY-WEINBERG），具有較強的群體代表性，值得進行多態性研究。

2.2基因型分布 對照組與觀察組ACE基因I/D基因型的分布有著明顯差異，差異具有統計學意義（P<0.05），對照組與觀察組T1R基因A1166C與AGT基因M235T的基因型分布沒有明顯差異性，不具備統計學意義（P>0.05），見表1。

3 結論

腎病綜合征分為原發性、繼發性與遺傳性三大類，其中原發性腎病綜合征屬于原發性腎小球疾病。目前用于治療腎病綜合征的方法尚沒有較為統一的標準，不過血管緊張素轉化酶抑制劑與血管緊張素受體阻斷劑在治療腎病綜合征方面具有較為顯著的療效。

ACE的主要功能是將血管緊張素轉化為效應肽血管緊張素，保證腎臟的基本功能，調節人體電解質的平衡。ACE基因處于染色體17q23，整個ACE基因編碼區長度在21kb左右，有25個內含子與26個外顯子，其中第16個內含子存在I/D基因型的多態性。通過研究我們可以直觀的發現，腎病綜合征患者體內ACE基因I/D基因型與正常健康人的基因型分布存在顯著的差異，即可將ACE基因I/D基因型的分布作為判斷患者腎病綜合征的重要依據。

AT1R分布與人體血管、肝臟、腎臟等主要器官，是維持人體血壓水準的重要受體。一般會隨著血管平滑肌細胞遷移與增值，不過根據研究，發現正常人與腎病綜合征患者AT1R基因型無明顯差異性。

ACE基因I/D基因型分布的多態性與腎病綜合征的發生有著直接的關聯，DD基因與D等位基因是引發腎病綜合征的主要原因。

參考文獻：

[1]黃海東，李新娟，王立瑞，等.IgA腎病患者AGTM234T基因多態性分析[J].實用臨床醫療雜志，2011，02（15）：57-59.

[2]彭小銅，覃遠漢，楊艷萍，等.血管緊張素轉換酶基因插入/缺失多態性與IgA腎病關聯性Meta分析[J].使用兒科臨床雜志，2011，12（26）：345-347.

編輯/王敏