支原體肺炎患兒細胞免疫和體液免疫相關指標檢測和分析

摘要：目的 觀察支原體肺炎患兒細胞免疫和體液免疫功能的變化。方法 將141 例肺炎患兒分為支原體肺炎組80 例、細菌性肺炎組61 例，并選取同期門診體檢正常小兒90例作為正常對照組，分別檢測三組兒童的T細胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+）、免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）、補體(C3、C4)和循環免疫復合物（CIC）。結果 支原體肺炎組患兒細胞免疫功能處于低下狀態，表現為CD8+細胞比例相對較高(P<0.01)，CD3+、CD4+細胞比例及CD4+/CD8+比值明顯降低(P<0.01)，支原體肺炎組體液免疫功能明顯異常，表現為IgG，IgA，IgM及血清免疫復合物水平升高（P<0.01或<0.05），自身免疫功能亢進，激活了補體系統，使C3，C4水平明顯增高（P<0.01）。結論 肺炎支原體感染后比較容易引起患兒多種免疫功能的紊亂。

關鍵詞：支原體肺炎； 細胞免疫；體液免疫；兒童

肺炎支原體肺炎是兒童年常見呼吸道感染性疾病，約占小兒肺炎的10%～40%[1]，在流行期間比例會更高。多見于5~9歲的兒童，其癥狀從無到致命的肺炎或肺外疾病，病程遷延且其發病率逐年上升，嚴重危脅小兒的身心健康，在臨床已受到越來越多的重視，其發病機制除與肺炎支原體感染有直接關系外，還與患兒本身免疫功紊亂有關[2]，為了解肺炎支原體肺炎患兒免疫功能變化，我們對95例患兒的液體免疫和T細胞亞群進行了檢測和分析，現報告如下：

1 資料與方法

1.1一般資料選取 2010年10月~2013年10月在我院住院的肺炎患兒和兒科門診體檢正常小兒。分肺炎支原體肺炎組、細菌性肺炎組和正常對照組。肺炎支原體肺炎組95例，其中男45例，女50例，年齡11個月~14歲，平均年齡5.8歲，實驗室檢查血清MP-IgM 陽性；細菌性肺炎組61例，其中男37例，女24例，年齡10個月~11歲，平均年齡5.0歲，實驗室檢查血清MP-IgM 陰性，痰細菌培養陽性。支原體肺炎和細菌性肺炎符合《實用兒科學》（第7版）中診斷標準[3] ，且均未經療。正常對照組90例，其中男48例，女42 例；年齡1~12歲，平均為6歲，無近期急性感染性疾病史。

1.2 方法T淋巴細胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+）采用雙色熒光素標記流式技術測定，試劑美國B D公司提供，檢測儀器為美國FASCCalibur流式細胞儀；IgG、IgA、IgM、C3、C4采用免疫透射比濁法測，試劑上海復星長征醫學科學有限公司提供，檢測儀器為日立7180全自動生化分析儀；免疫復合物(Cycle immune complex，CIC)采用CIC-Clq ELISA檢測，試劑上海研晶生物科技有限公司提供，檢測儀器為美國BIO-RAD伯樂酶標儀。

1.3統計學處理 使用SPSS12.0軟件進行統計學分析，計量資料均以x±s表示，配對資料進行t檢驗。

2 結果

2.1 T淋巴細胞亞群檢測結果見表1，與正常對照組比較， 肺炎支原體肺炎組CD8+細胞比例明顯增高（（t值為：7.420 P值為：＜0.01）， CD3+、CD4+細胞比例及CD4+/ CD8+比值明顯降低（t值分別為：-14.715、-10.234、-6.828 ，P值均為：＜0.01）；與細菌性肺炎組比較，肺炎支原體肺炎組CD8+細胞比例也明顯增高（t值為：5.465 ， P值為：＜0.01），CD3+、CD4+細胞比例及CD4+/ CD8+比值也明顯降低（t值分別為：-9.605、-7.763、-5.380，P值均為：＜0.01）；細菌性肺炎組與正常對照比較，CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/ CD8+無明顯差異（t值分別為：-1.971、-1.959、1.309、-1.969，P值均為：＞0.05）。

注：A表示肺炎支原體肺炎組與正常對照組比較：P＜0.01；B表示肺炎支原體肺炎組與細菌性肺炎組比較：P＜0.01。

2.2 免疫球蛋白及循環免疫復合物檢測結果見表2，與正常對照組比較，肺炎支原體肺炎組IgA相對較高（t值分別為：2.507， P值為：＜0.05），IgG、IgM、CIC均明顯增高（t值分別為：4.142、5.493、14.211， P值均為：＜0.01）；與細菌性肺炎組比較，肺炎支原體肺炎組IgG、IgA、IgM、CIC均明顯增高（t值分別為：2.684、3.034、4.093、10.715， P值均為：＜0.01）；細菌性肺炎組與正常對照比較， 其中IgA相對較低（t值為：-2.458、P值為：＜0.05），而IgG、IgM、CIC無明顯差異（t值分別為：1.209、1.920、1.463，P值均為：＞0.05）。

注：C表示肺炎支原體肺炎組與正常對照組比較：P＜0.01；D表示肺炎支原體肺炎組與正常對照組比較：P＜0.05；E表示肺炎支原體肺炎組與細菌性肺炎組比較：P＜0.01；F細菌性肺炎組與正常對照比較：P＜0.05。

2.3C3、C4檢測結果見表3，肺炎支原體肺炎組與正常對照組比較，C3、C4均明顯增高（t值分別為：11.576、 14.465， P值均為：＜0.01）；肺炎支原體肺炎組與細菌性肺炎組比較，C3、C4均明顯增高（t值分別為：7.406、 13.830， P值均為：＜0.01）；細菌性肺炎組與正常對照比較，C3、C4無明顯差異（t值分別為：-0.582、1.934，P值均為：＞0.05）。

注：G表示肺炎支原體肺炎組與正常對照組比較：P＜0.01；H表示肺炎支原體肺炎組與細菌性肺炎組比較：P＜0.01。

3 討論

肺炎支原體（MP)是一種介于細菌與病毒之間的微小非活性生長的微生物，是目前兒童肺炎、支氣管炎的主要病原之一，肺炎支原體感染后，其發病機制除與病原體粘付、侵入和直接造成細胞損傷等[4]有關外，更與宿主感染肺炎支原體后產生異常的免疫反應有關[5]，因此，有必要觀察肺炎支原體患者的細胞免疫和體液免疫功能的變化。

T淋巴細胞亦可簡稱T細胞，源于骨髓的多能干細胞（胚胎期則來源于卵黃囊和肝），發揮細胞免疫及免疫調節等功能。CD3+細胞是成熟T淋巴細胞的特征性標志，反映了T淋巴細胞活化的比例；CD4+細胞是輔助性T淋巴細胞；CD8+細胞大多數是抑制性T淋巴細胞；CD4／CD8的比值做為免疫調節的一項指標，正常情況下相對穩定。本研究結果表明，支原體肺炎患兒CD8+細胞比例明顯增高（P<0.01），CD3+，CD4+淋巴細胞比例及CD4+/CD8+比值明顯下降(P<0.01)，說明機體的T淋巴細胞活化功能、免疫應答等受到抑制，打破了免疫功能平衡，使宿主抵抗力下降。

B淋巴細胞來源于骨髓的多能干細胞，受抗原刺激后，會增殖分化出大量漿細胞。漿細胞可合成和分泌抗體并在血液中循環，發揮體液免疫功能作用。肺炎支原體感染后，可刺激B細胞產生針對肺炎支原體特異性的IgM與IgG抗體，以及能阻止肺炎支原體吸附和侵入的分泌型IgA抗體[6]， IgM是人體液免疫中出現最早的抗體，MP感染1～2w內，體內一般可產生IgM及IgA，而IgG一般在2w后才開始升高。本研究結果表明，支原體肺炎組IgM、IgA、IgG及CIC水平均明顯升高 (P＜0.01或<0.05) ，說明B淋巴細胞被過度激活、然后過度增殖，導致合成和分泌IgM、IgG及IgA抗體增多，同時，血液中CIC的明顯增加，提示發生了過度的抗原抗體反應，過度的免疫反應往往引起更加嚴重的臨床癥狀及肺損傷[7]。

肺炎支原體與人體心、肺、肝、腦、腎和平滑肌組織有部分具有共同的抗原，肺炎支原體感染后，可產生抗淋巴細胞、肺、心、肝、腎、平滑肌和腦細胞的自身抗體[8]，與相應組織發生免疫反應，形成抗原抗體免疫復合物，然后激活補體系統，發揮強大的免疫效應，導致多系統免疫損傷[9]。本研究顯示，支原體肺炎組的補體C3、C4含量明顯高于正常對照和細菌性肺炎組(P<0.01)，提示肺炎支原體感染者產生的自身抗體與相應組織發生免疫反應所形成抗原抗體免疫復合物激活了補體，并依次發生連鎖反應，最終形成攻膜復合物（MAC），產生強大的溶細胞作用，對機體組織細胞造成損傷。同時免疫復合物激活補體系統后，產生中性粒細胞趨化因子，吸引大量白細胞，侵入病變部位，釋放溶酶體中的水解酶，引起增生和破壞性病變，這可能是肺炎支原體感染易并發肺外多器官損傷的主要原因。

參考文獻:

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