潔凈室中浮游菌測量不確定度的評定

黃勇

[摘 要] 目的：對潔凈室浮游菌進行測量不確定度評定。方法：通過建立數學模型，識別和評估測量過程浮游菌的不確定度分量。結果：量化各分量的相對標準不確定度，并計算出合成標準不確定度。取k=2 （置信概率95%），當浮游菌的含量為46個/m3時，其合成不確定為0.132，擴展不確定為0.264，最終結果表示為46 ±12（個/m3）。結論：潔凈室浮游菌的測量不確定度主要來源為各采樣點的布置和測量重復性引入的不確定度及儀器計量性能引入的不確定度等。

[關鍵詞] 潔凈室；浮游菌；測量不確定度；分量

中圖分類號：Q93 文獻標識碼： A 文章編號：2095-5200（2014）06-073-03

浮游菌（airborne microbe）是醫藥工業等行業潔凈環境中最重要指標之一。浮游菌測試采用計數濃度法，即通過收集懸游在空氣中的生物性粒子于專門的培養基，經若干時間，在適宜的生長條件下讓其繁殖到可見的菌落進行計數，從而判定潔凈環境內單位體積空氣中的活微生物數，以此來評定潔凈室（區）的潔凈度。浮游菌測定是驗證醫藥工業潔凈室（區）、潔凈實驗室等的空氣環境是否達到規定潔凈級別的主要方法之一。對于氣流形式為非單向流的潔凈室（區），氣流對各個局部的影響強度不盡一致，從而造成浮游菌分布不均，測試時各采樣點的測得值可能會出現較大差異。本文根據 《測量不確定度評定與表示》[1]和《測量不確定度要求的實施指南》[2]的相關要求，對非單向流潔凈室中浮游菌的測量不確定度進行分析，建立其測量不確定度評定方法，以了解和提高測試結果的可靠性。

1 實驗部分

1.1 主要儀器與試劑

JYQ型浮游菌采樣器（蘇州潔凈技術研究所），ALP CL 32L型高壓蒸汽滅菌器（日本ALP公司），培養皿（Φ150×90mm），大豆酪蛋白瓊脂培養基（TSA），SPX-250型智能生化培養箱（寧波海曙賽福實驗儀器廠）。

1.2 測試方法和結果

選取藥包材生產企業滴眼劑瓶生產線的10萬級內包間（7.32 m×4.55 m =33.3 m2，高度2.7m），在靜態狀態下測試其浮游菌。測試在凈化空調系統正常運行30min 后進行，經測量此時溫度和相對濕度均穩定在 20℃和50%左右，相對于非潔凈區的靜壓差恒定為 18±0.5Pa。根據《醫藥工業潔凈室（區）浮游菌的測試方法》[3]的測試規則，待浮游菌采樣器自凈達到要求后，進行測試。

空氣中的浮游菌經浮游菌采樣器收集于培養基中，流量計和定時器設定了采樣流量和時間， 培養出的菌落，根據采樣體積， 計算出潔凈室每個采樣點的浮游菌含量。均勻分布5個采樣點，每個采樣點穩定后連續采樣 3次，每次采樣量200L。

按照國家質量監督檢驗檢疫總局頒布的《醫藥工業潔凈室（區）浮游菌的測試方法》標準GB/T 16293-2010測定浮游菌，根據國家食品藥品監督管理局頒布的直接接觸藥品的包裝材料和容器管理辦法[4]的規定，10萬級的潔凈室其浮游菌不得超過 500個/m3。

2 數學模型

3 測量不確定的來源

影響浮游菌結果的主要因素有：1） 采樣器的計量特性：浮游菌采樣器計量特性的不確定度主要由測量的流量誤差、 轉速測量誤差、 定時器誤差引入的不確定度分量組成； 2）采樣點的分布和測量重復性； 3）測量的環境條件；4）培養箱的溫度誤差。

4 測量不確定度各分量的評定

4.1 采樣器的計量特性引入的不確定度[6]

4.2 測量環境條件的不確定度

浮游菌測試前，被測試潔凈室（或潔凈區）溫、濕度須達到規定的要求，靜壓差、換氣次數、空氣流速必須控制在規定值內。當空調凈化系統運行穩定后，經測量內包間的溫度和相對濕度穩定在 20±0.5℃和 50±1%左右，相對于非潔凈區的靜壓差恒定為18±0.5Pa。因而，環境因素引入的不確定度可忽略不計，以簡化計算。

4.3 培養箱溫度誤差引入的不確定度

4.4 采樣點分布和測量重復性引入的不確定度[7]

6 討論

由以上不確定度分析顯示，對潔凈室浮游菌的測量不確定度主要分為各采樣點的布置和測量引入的不確定度、儀器計量性能引入的不確定度和培養箱溫度引入的不確定度，其中各采樣點的布置和測量引入的不確定度最大，儀器性能引入的不確定度相對較小，因為是在相對密閉的空間內，且溫度、相對濕度、氣壓相對恒定，所以環境條件引入的不確定度可以忽略。

參 考 文 獻

[1] JJF 1059.1-2012 測量不確定度評定與表示[S].北京：國家質量監督檢驗檢疫總局，2012.

[2] CNAS-GL05-2011 測量不確定度要求的實施指南[S].北京：中國合格評定國家認可委員會，2011.

[3] 中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局.GB/T 16293-2010. 醫藥工業潔凈室（區）浮游菌的測試方法[S]. 北京：中國標準出版社，2010.

[4] 直接接觸藥品的包裝材料和容器管理辦法.局令第13號.北京：國家食品藥品監督管理局，2004.

[5] 李夏林，王 玲.潔凈室中懸浮粒子的測量不確定度評估[J].北方藥學，2011，8（7）：42-43.

[6] CNAS-GL06-2006.化學分析中不確定度的評估指南[S].北京：中國合格評定國家認可委員會，2006

[7] 王靜， 徐彥， 于冬雪， 等. 工作場所空氣中總粉塵濃度測量的不確定度分析[J]. 工業衛生與職業病，2011， 37（1）：39-41.