頭孢呋辛鈉原料藥貯存條件和充氮對色級的影響

彭肇強 秦立強

1.蘇州大學公共衛生學院營養與食品衛生系，江蘇蘇州 215123；2.國藥集團致君（蘇州）制藥有限公司，江蘇蘇州 215400

頭孢呋辛鈉為第二代頭孢菌素類抗生素，分裝而成的注射用頭孢呋辛鈉治療范圍廣、副反應少，廣泛應用于臨床[1]。但是該品穩定性差[2]，在全國藥品評價抽檢試驗中，注射用頭孢呋辛鈉不符合要求的主要項目為溶液顏色，在各類終端市場反饋中，注射用頭孢呋辛鈉溶液顏色為最主要的投訴項目。

2005 版《中國藥典》規定頭孢呋辛鈉貯存條件為遮光，密封，在冷處（2～10℃）貯存；2010 版《中國藥典》規定該品貯存條件為遮光，密封，在陰涼處（≤20℃）貯存[3]。充氮可以有效保證注射用頭孢呋辛鈉穩定性，延緩色級變化，但頭孢呋辛鈉原料充氮對延緩色級的作用沒有引起關注，該研究把頭孢呋辛鈉色級控制由制劑環節推移到前段工序進行控制，即在原料生產過程中進行充氮，同時探索不同貯存條件下，原料充氮對產品的色級穩定性影響。2013年2—3月生產的194 批無菌原料藥每批各8 瓶分別貯存冷處和陰涼處，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

頭孢呋辛鈉無菌原料藥（純度≥99.4%）；液氮（純度≥99.995%）；EDTA-2Na（AR 級）。GS1M 型殘氧儀。

1.2 原料藥模擬

實際生產過程中，原料混合前脈動兩次抽真空，分裝前在鋁桶中充高純液氮，再裝藥粉，再充氮，蓋上組合蓋，盡快軋蓋密封。但該研究中無法大批量在同一批產品中部分桶充氮、部分桶不充氮來采集數據，因此采取模擬小包裝代替成品包裝。模擬小包裝充氮方式為在減壓閥控制壓力（0.01±0.005 MPa）下，微開小鋁瓶膠塞，將充氮軟管伸入到小鋁瓶中約1 cm，持續充高純液氮1 min，拔出軟管，立即蓋上膠塞，扣上鋁蓋，使用手動軋蓋器軋蓋，檢查小鋁蓋不能擰動為準。充氮后的產品通過殘氧儀檢測殘氧量。

1.3 取樣以及處理

取無菌原料藥車間2013年2月和3月生產的頭孢呋辛鈉共194 批（批號13024001～13024067、13024201～13024253、13034001～13034040、13034201～13034234）樣品。每批取樣16 瓶（每瓶30g），8 瓶存放于陰涼庫（10～20℃），8 瓶存放于冷庫（6～10℃）。兩種貯存條件下分別在4 瓶中充氮，4 瓶中不充氮。充氮殘氧量控制在4%以下。存放3、6、12 個月時隨機各取1 瓶檢測顏色（每批每種條件多備有1 瓶樣品）。

1.4 色級判定

顏色判斷按《中國藥典》2010 版二部附錄ⅨA 《溶液顏色檢查法》第一法檢測[4]。取該品1.2 g，加入0.05 mol/L EDTA-2Na 溶液10 mL 使溶解，置于25 mL 納氏比色管中，另取規定色調和色號的標準比色液10 mL，置于另一25 mL 的納氏比色管中，兩管同置白色背景上，自上向下透視，或同置白色背景前，平視觀察；供試品管呈現的顏色與對照管比較，不得更深。為了量化分析，將色級

1.5 統計方法

采用SPSS17.0 軟件研究數據進行統計學處理，色級以平均值±標準差表示，單因素方差分析（ANOVA）比較組間的差異，如組間存在差異，則采用LSD-t 檢驗進行組間多重比較。

2 結果

194 批頭孢呋辛鈉原料起始顏色較淺，除一批次色級為<3，其他色級均<2。每種貯存方式色級均隨時間推移而加深。冷庫貯存色級變化慢于陰涼庫貯存，以不充氮貯存12 個月為例，冷庫貯存仍有1、2 和10 批次色級分別為<2、=2 和<3 的較淺顏色，而陰涼庫貯存只有6 批次為色級<3。充氮保存色級變化慢于不充氮保存，以冷庫貯存12 個月為例，充氮后貯存仍有21、12 和45批次色級分別為<2、=2 和<3 的較淺顏色，而不充氮貯存則分別為1、2 和10 批次（表1）。

冷庫貯存條件下，3、6 和12 個月后充氮原料藥的平均色級比不充氮低0.2、0.5 和0.7，其中6 和12 個月差異有統計學意義（t=6.46;t=7.82,P<0.01）；陰涼條件下，3、6 和12 個月充氮原料藥的平均色級比不充氮低0.6、0.8 和0.7，差異有統計學意義（t=8.18;t=9.65;t=6.28,P<0.01）。另外，不充氮的情況下6 和12 個月后冷庫中原料藥色級顯著低于陰涼庫，差異有統計學意義（t=7.35;t=8.54,P<0.01）；充氮情況下3、6 和12 個月后冷庫中原料藥色級顯著低于陰涼庫（t=6.14;t=10.09;t=6.93,P<0.01）。原料藥貯存在冷庫不充氮與陰涼條件充氮色級變化基本一致（見表2）。

表1 不同處理3、6 和12 個月后原料藥各色級的批次數

表2 不同處理3,6,12 個月后色級變化趨勢

3 討論

頭孢呋辛鈉穩定性差，與原料質量、溫度、光照、充氮等因素有關[5]。藥物顏色與規定顏色的差異能在一定程度上反映藥物的純度[6]，周穎等對國內上市注射用頭孢呋辛鈉進行了全面的質量分析，結果發現169 批次中5 批次不符合規定，其中4 批次顏色超標，因此顏色是影響該藥質量的主要因素之一[7]。顏色測定方法有目測法[4]、紫外-可見分光光度法[8]、HPLC 法[6，9，10]等，但藥典中《溶液顏色檢查法》第一法檢測顏色檢測直觀、快速、檢測成本低，因此該研究選用顏色作為觀察指標。

該次研究采取模擬小包裝代替成品包裝在存放的3、6、12個月時動態觀察原料生產階段充氮與否和貯存方式對產品色級的影響，結果發現頭孢呋辛鈉原料充氮比不充氮色級穩定性明顯好，溶液顏色變化較慢。周穎等采用專題調查的方法考察了不同生產工藝的優劣，結合對生產企業提供的產品長期穩定性數據的分析，得出高純氮氣保護工業的樣品的穩定性明顯高于無高純氮保護工藝的樣品，表現為溶液顏色較淺和頭孢呋辛鈉聚合物含量較低，該調查的結論和該研究結果一致[7]。趙龍山等采用熱分析法和差式掃描量法測定頭孢呋辛鈉在氮氣和空氣中的熱分解動力學參數，結果發現在空氣中表觀活化能為139.2、139.3 kJ/mol，在氮氣中為106.8、108.5 kJ/mol，因此在氮氣中更為穩定[2]。

該研究顯示原料冷處貯存比陰涼貯存色級穩定性明顯好，溶液顏色變化較慢。饒春意等分析了頭孢呋辛鈉溶液短期放置對雜質含量的影響，發現放置0、10、20、30 和60 分鐘后雜質含量分別為0.201%、0.205%、0.219%、0.224%和0.240%，即隨時間延長穩定性降低[6]。劉華等直接觀察了頭孢呋辛鈉在不同溫度下對色級的影響，5℃貯存30 d 色級為1，10℃、20℃、30℃和40℃下色級分別為1、1、3 和7[5]。盡管在10℃、20℃的陰涼條件下貯存30 d（1 個月）對色級沒有明顯影響，但我們的研究把貯存時間延長到3、6 和12 個月，發現陰涼貯存色級變化較冷處貯存顯著，因此，雖然2010 版《中國藥典》將原料和制劑的儲藏條件由“在冷處保存”改為“在陰涼處保存”[3]，我們的研究結果仍建議原料貯存于冷庫中。

目前普遍關注頭孢呋辛鈉制劑和溶液的穩定性[2，5-7]，該研究則關注了原料穩定性。原料藥充氮，不僅可以延緩藥品被氧化的速度，還可以使桶內與桶外保持微正壓，有效保障藥品不受外界環境影響。但是必須注意的是無菌原料藥采用鋁桶分裝，口徑較大，充氮效果不易控制，因此關于原料藥充氮方式還有進一步改進的空間，如可以考慮在隔離罩中充氮。目前，我國對藥品制劑有效期的規定仍以制劑分裝日期為起始日期，因此，建議原料藥存放時間越短越好，盡早分裝成制劑，有利于保證制劑在有效期內的色級穩定性。

[1]Olivier C.Clinical use of cefuroxime in paediatric community-acquired pneumonia[J].Paediatr Drugs,2000,2(5):331-343.

[2]趙龍山，李清，陳曉輝，等.頭孢呋辛鈉的熱穩定性及其熱分解動力學研究[J].中國藥房，2012,23(33):3081-3083.

[3]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].北京：中國醫藥科技出版社，2010：190-191.

[4]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[S].2010年版.北京：中國醫藥科技出版社，2010：68-69.

[5]劉華，蔡秋琴，戴國興，等.頭呋辛鈉穩定性研究[J].河北化工，2013,36(3):16-17.

[6]饒春意.頭孢呋辛鈉溶液顏色測定方法的研究[J].廣東藥學，2003,13(5):27-28.

[7]周穎，梁晟，唐敬亮，等.注射用頭呋辛鈉質量分析[J].中國新藥雜志，2014,23(5):518-522.

[8]陸娟，陳建玲，杜海霞.紫外-可見分光光度法檢查注射用頭孢呋辛鈉溶液顏色的結果分析[J].醫學信息，2011,24(8):5267-5268.

[9]袁耀佐,趙恂,張玫,錢文.改進的HPLC 法檢查頭孢呋辛鈉中有關物質[J].藥學進展，2010,34(10):468-471.

[10]陳之敏,莫金娜,余銳玉,等.注射用頭孢呋辛鈉有關物質檢查供試品溶液穩定性的研究[S].中國藥品標準,2010,11( 6):435-437.