HER2基因在新疆維漢民族胃癌中的表達及其對預后的影響

孫 毅，趙化榮，張 華，毛 睿，鄭 超，艾斯克爾·吐拉洪，包永星

(新疆醫科大學第一附屬醫院，烏魯木齊830000)

目前，手術仍然是根治胃癌的最有效方法;然而由于胃癌早期缺乏特異性臨床表現，確診時約40%患者為進展期(1年生存率5%～15%)，根治術后復發轉移率為40%～60%。因此，尋找胃癌特定分子靶點，為有效治療提供分子基礎是臨床的迫切需求。關于人表皮生長因子受體2(HER2)基因與腫瘤關系，大量研究集中于乳腺癌，與胃癌的關系研究較少。本文就HER2在新疆維漢民族間胃癌中的表達差異以及對其預后影響進行研究，為相關分子靶向藥物治療胃癌提供理論依據。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇新疆醫科大學第一附屬醫院2002年1月～2010年12月手術切除或活檢的胃癌組織標本160例，男130例、女30例，年齡27～85歲、平均58.3歲;其中漢族108例，維吾爾族(維族)52例。患者均符合以下標準:①胃癌均在術前被相關檢查明確診斷并明確有無轉移，包括實驗室檢查、胸片、上消化道內鏡檢查、病理活檢以及腹盆腔CT;②胃癌術前未行新輔助治療;③胃癌均經過影像學檢查評估分期;④有完整的臨床及隨訪資料。160例中排除圍手術期死亡的胃癌患者。本研究開始之前獲得研究單位倫理委員會批準，遵循赫爾辛基宣言(2000年版)以及相關的法規，患者對本研究知情同意。

1.2 方法

1.2.1 HER2免疫組化染色 石蠟切片脫蠟、水化，PBS沖洗3×3 min，高溫高壓抗原修復;加3%過氧化氫溶液，室溫下孵育10 min，以阻斷內源性過氧化物酶。PBS沖洗3×3 min，加第一抗體，室溫下孵育60 min;PBS沖洗3×5 min，加聚合物增強劑(試劑A)，室溫下孵育20 min;PBS沖洗3×3 min，加酶標抗鼠聚合物(試劑B)，室溫下孵育30 min;PBS沖洗3×3 min，加新配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察3～10 min，陽性顯色為棕色。自來水沖洗，蘇木素復染，0.1%鹽酸分化，自來水沖洗，PBS沖洗返藍;梯度乙醇脫水干燥，中性樹脂封片。

1.2.2 HER2染色陽性判讀和評分標準 胃癌標本類型分為手術標本及活檢標本，其評價指標如下:①手術標本無反應或＜10%腫瘤細胞膜染色，活檢標本任何腫瘤細胞無膜染色，評分為0(陰性);②手術標本≥10%腫瘤細胞微弱或隱約可見膜染色、僅有部分細胞膜染色，活檢標本腫瘤細胞團微弱或隱約可見膜染色(不管著色的腫瘤細胞占整個組織的百分比)，評分為1(陰性);③手術標本≥10%腫瘤細胞有弱到中度的基底側膜、側膜或完全性膜染色，活檢標本腫瘤細胞團有弱到中度的基底側膜、側膜或完全性膜染色，評分為2+;④手術標本≥10%腫瘤細胞基底側膜、側膜或完全性膜強染色，活檢標本腫瘤細胞的基底側膜、側膜或完全性膜強染色，評分為3+(陽性)。評分為2+的病例為不確定病例，需進一步行熒光原位雜交(FISH)檢測，如FISH陽性，判斷為HER2陽性;如FISH陰性，判斷為HER2陰性。

1.2.3 統計學方法 應用SPSS17.0統計軟件，具有不同臨床病理特點胃癌患者的HER2表達差異比較采用χ2檢驗或Fisher精確概率法。P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 維漢民族胃癌患者HER2基因表達陽性率HER2基因表達總陽性率為10.00%(16/160)。維族HER2基因表達陽性率為15.38%(8/52)，漢族HER2基因表達陽性率為7.41%(8/108)。見表1。

表1 維漢民族胃癌患者免疫組化染色HER2基因表達(例)

2.2 HER2基因表達與胃癌臨床病理參數的關系HER2基因表達陽性與性別、年齡、族別、腫瘤大小、腫瘤病理類型、TNM分期、浸潤深度、淋巴結轉移、遠處轉移、神經是否受侵、淋巴管內是否有癌栓、貧血及癌胚抗原無相關性(P均＞0.05)，而與腫瘤部位、Lauren分型及分化程度相關(P均＜0.05)。HER2基因表達與臨床病理參數的關系見表2。

表2 HER2表達與維漢胃癌患者臨床病理參數的關系

3 討論

HER2是人表皮生長因子受體家族的一個成員［1］，該家族屬于Ⅰ型受體酪氨酸激酶，又稱ErbB受體家族，是一種膜結合蛋白。該蛋白具有一個受體結合域的胞外區，一個短的跨膜區段和一個具有酪氨酸激酶受體活性的胞內區。胞外區結合不同的配體，啟動細胞內的分子信號轉導，最終從多個途徑影響腫瘤細胞的生物活性，如細胞增殖、黏附、轉移和分化等，導致腫瘤的復發和轉移。HER2基因位于鄰近的拓撲異構酶Ⅱa基因上，也與鳥類紅細胞增多癥病毒上的癌基因v-erbB有關。最近的研究表明，HER2基因在許多不同類型的人類癌癥發展中起到一個關鍵性的作用。侵襲性乳腺癌中可檢測到HER2過度表達和(或)擴增，其表達率為10%～34%，是乳腺癌化療和內分泌治療反應不佳的一個預測因子。HER2過度表達和(或)擴增也在結腸癌、膀胱癌、卵巢癌、子宮內膜癌、肺癌、宮頸癌、頭頸部癌、食管癌和胃癌中被觀察到。研究表明，30%以上的人類腫瘤組織中伴有HER2基因過度表達，尤其是乳腺癌，其過表達與乳腺癌分化程度、臨床分期呈正相關，且表達越高，預后越差［2］。

HER2基因研究已經被應用于胃癌及胃食管結合部癌［3］。Tanner等［4］認為，于胃食管連接部近端5 cm和遠端5 cm之間(即胃食管連接部)的胃癌發生率比發生于胃部的胃癌HER2的陽性表達率高;而國內一些研究發現，HER2的陽性表達與腫瘤部位無關［5，6］。本研究提示，HER2 基因的陽性表達與腫瘤的部位有關，其陽性表達率在胃食管結合部及胃部分別為22.86%和6.40%，這與 Tanner等研究結果相似。

本研究發現，腸型胃癌比彌漫型和混合型胃癌HER2表達率高，這與國內外研究［7～9］相一致。在To-GA試驗中評價曲妥珠單抗加化療應用于HER2陽性的進展期胃癌患者中，HER2陽性表達率在胃食管腺癌、胃腺癌，腸型和彌漫型胃癌中分別是33%、21%、32%和6%。特定的組織學類型腫瘤中的癌基因可以與HER2基因的過度表達聯系在一起，HER2基因激活可能與腸型胃癌特定細胞亞群的生長發育相關，而混合型、彌漫型胃癌HER2的表達率無統計學差異。HER2在腸型胃癌中的選擇性表達機制復雜，不是所有的腸型胃癌中HER2都會高表達，組織分型不是HER2高表達的惟一相關因素。最近研究發現，鈣黏蛋白基因突變是彌漫型胃癌的遺傳標志［10］。因此HER2基因的擴增和高表達與彌漫型胃癌預后的關系有待于進一步研究。

本研究還顯示，HER2表達與胃癌分化程度明顯相關，高、中分化癌陽性率明顯高于低分化及未分化癌［11］，提示HER2與胃高、中分化腺癌的發生有密切關系，同時HER2表達患者的無病生存期和總生存期較短［12］，容易出現遠處轉移，提示預后不佳［12～14］。因此，HER2基因擴增或過表達可能成為胃癌的一個重要預后預測指標。

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