內皮素－1在肝纖維化和肝硬化中的變化及意義

張小華

（武漢大學基礎醫學院，湖北 武漢430071；公安縣人民醫院普外科，湖北 公安434300）

黃玉榮，楊娟

（公安縣人民醫院普外科，湖北 公安434300）

內皮素（ET）是近年來發現的重要血管活性物質，其對肝硬化患者肝損害和門脈血流動力學的影響受到廣泛關注［1－3］。我們通過檢測患者血清ET－1、透明質酸酶（HA）、Ⅲ型前膠原（PⅢP）、Ⅳ型膠原（Ⅳ－C）、層粘連蛋白（LN）水平，探討ET－1在肝硬化形成中的意義，并分析ET－1與門脈血流動力學的關系，為疾病的治療提供依據。

1 對象與方法

1.1 對象

選取我院2013年1月至2014年1月收治的肝炎肝硬化患者60例（觀察組）和慢性肝炎患者20例（對照組）。觀察組中男36例、女24例，年齡19～71（42±11）歲。均符合2000年西安第10次全國傳染病與寄生蟲病會議修訂的 《病毒性肝炎防治方案》中肝硬化診斷標準，肝功能Child－Pugh分級A級20例、B級22例、C級18例。對照組中男13例、女7例，年齡21～68（36±12）歲。所有患者均無原發性心、肺、腎疾病和糖尿病、高血壓等內分泌系統疾病及其他炎性疾病。觀察組與對照組一般情況比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 方法

所有患者采血前3d停用血管活性劑、利尿劑等，禁食12h后自肘靜脈采血3ml注入裝有10g／dl EDTA－Na2和抑肽酶的聚苯乙烯試管中混勻，4℃離心，分離血漿－20℃保存待測；進行彩色多普勒超聲檢查，觀察門靜脈主干血流方向，用脈沖多普勒在門靜脈官腔中取樣，取樣角度＜60°，并測量門靜脈寬度（Dpv）、門靜脈血流速度（Vpv），根據血管面積和流速計算門靜脈血流量（Qpv）。

主要儀器：GC－1500型γ放射免疫計數器（安徽中科中佳科學儀器有限公司）、EOS－880半自動生化分析儀（意大利）、HP－M2410型彩色多普勒超聲儀（日本）。主要試劑及藥盒：北京東亞免疫技術研究所制造的ET測定試劑盒、10g／dl EDTA－Na2、抑肽酶，上海海軍醫學生物技術中心制造的 HA、Ⅳ－C、LN試劑盒，芬蘭Orion Diagnostica公司制造PⅢP試劑盒。

1.3 統計學分析

采用SPSS19.0統計軟件進行統計分析。計量資料均以（±s）表示，計量資料組間比較采用t檢驗，計數資料組間比較采用χ2檢驗及直線相關分析。P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 肝硬化患者血清ET－1和HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN水平及其與肝功能分級的關系

觀察組患者血清ET－1和HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN水平均明顯高于對照組，差異具有統計學意義（P＜0.05）；血清ET－1、HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN水平呈現出肝功能C級＞B級＞A級，且均明顯高于對照組，差異具有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 肝硬化患者血清ET－1和HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN水平及其與肝功能分級的關系

2.2 肝硬化患者血清ET－1與HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN的相關性分析

肝硬化患者血清ET－1與HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN呈現明顯正相關。見表2。

表2 肝硬化患者血清ET－1與HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN的相關性

2.3 不同肝功能狀態下血清ET－1與Dpv、Vpv、Qpv的關系

觀察組患者血清ET－1、Dpv、Vpv、Qpv均明顯高于對照組，差異具有統計學意義（P＜0.05）；與肝功能分級同步，Dpv呈現C級＞B級＞A級，且與A級比較，B級明顯升高，差異具有統計學意義（P＜0.05），與B級比較，C級明顯升高，差異具有統計學意義（P＜0.05）。Vpv、Qpv均呈現A級＞B級＞C級，且與A級比較，B級明顯升高，差異具有統計學意義（P＜0.05），與B級比較，C級明顯升高，差異具有統計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 不同肝功能狀態下血清ET－1與Dpv、Vpv、Qpv的關系

由表3知，患者血清ET－1與Dpv呈現強正相關（r＝0.837，P＜0.05），與Vpv、Qpv呈明顯負相關（r＝－0.752、－0.714，P＜0.05）。

3 討論

肝硬化是臨床上常見的慢性肝病，肝功能損害、門脈高壓是其突出表現［4］。內皮素（ET）來源于內皮細胞，由21個氨基酸殘基構成，具有廣泛的病理生理作用，對機體多種組織、器官產生復雜的生物學效應［5－8］。ET家族認為由3個血管活性肽構成，在ET－1、ET－2、ET－3中，ET－1具有最強的縮血管作用［9－10］，肝臟為機體ET來源的主要場所之一，而ET－1和其受體作為病原因素和誘發因子在肝臟疾病中被廣泛研究［11－12］。

肝硬化時ET－1水平表現為肝功能C級＞B級＞A級＞對照組，表明肝硬化患者血清ET－1升高與肝功能損害程度有關。肝功能越差，ET－1升高越明顯，提示ET－1對肝硬化形成和發展起重要作用。肝臟合成ET－1部位主要在間質細胞及膽道上皮細胞［13－14］。正常人肝臟間質細胞及膽道上皮細胞ET－1弱表達，ET－1受體在肝內廣泛分布于肝細胞、竇狀隙內皮細胞、門靜脈、中央靜脈，故肝硬化內皮細胞、膽道上皮細胞ET－1合成明顯升高［15－16］。ET－1能調節肝臟微循環，促使肝血竇收縮，導致肝血竇血流減少甚至完全停止，細胞供氧減少，從而發生缺血、缺氧性損傷及慢性纖維化等［17－19］。同時肝臟是ET－1清除場所之一，肝硬化患者清除ET－1能力下降，血清ET－1會明顯升高。肝硬化時肝細胞變性壞死外，同時部分肝細胞增生，肝內血管重建，增生的血管內皮合成分泌ET－1，肝功能減退對ET－1滅活能力降低［20］。隨著ET－1水平增高，引起肝內小血管、肝竇、門靜脈收縮而導致門脈血流動力學改變，血管壁對切應力的感應變化進一步刺激ET－1釋放增加，加重門脈高壓，構成惡性循環［21］。

HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN可以反映膠原生成及纖維化情況。本研究中患者血清ET－1和HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN均明顯高于對照組，并且肝硬化患者血漿中ET－1水平隨Child－PughA、B、C級呈遞增變化，B級與A級、C級與B級ET－1水平差異明顯，表明ET－1與肝硬化的嚴重程度呈明顯正相關性。

門靜脈寬度（Dpv）、門靜脈血流速度（Vpv）和門靜脈血流量（Qpv）反映了門脈血流動力學的變化。本研究中比較了不同肝功能狀態下門靜脈寬度（Dpv）、門靜脈血流速度（Vpv）和門靜脈血流量（Qpv）水平與血清ET－1水平相關性，呈現血清ET－1與Dpv呈現強正相關，與Vpv、Qpv呈明顯負相關，反映了ET－1對門脈血流動力學的影響。

綜上所述，肝硬化者血漿ET－1水平反映了肝硬化的嚴重程度，并對肝硬化門脈血流動力學造成紊亂，在門脈高壓的形成及發展中起重要作用。

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