PARP抑制劑3-AB改善糖尿病大鼠心功能

曲 萌,董志恒

(北華大學 基礎醫學院 1.分子生物教研室； 2.病理教研室， 吉林 吉林 132013)

PARP抑制劑3-AB改善糖尿病大鼠心功能

曲 萌1,董志恒2*

(北華大學 基礎醫學院 1.分子生物教研室； 2.病理教研室， 吉林 吉林 132013)

糖尿病性心肌病(diabetic cardiomyopathy，DCM)是導致糖尿病患者晚期死亡的主要原因之一。近年的研究表明，線粒體電子傳遞鏈過氧化物的產生增多是導致DM并發癥發生4條途徑的共同機制。PARP是DNA鏈氧化損傷的傳感器[1]，與DCM的發生密切相關。然而，PARP的抑制劑3-AB對DCM的防治作用及機制少有報道。本研究旨在探討3-AB對糖尿病心肌的保護作用，為臨床DCM的防治提供可靠依據。

1 材料與方法

1.1 動物及試劑:雄性清潔級Wistar大鼠(體質量180～220 g)40只[吉林大學實驗動物中心，許可證號：SCXK(吉)2004-0012]，鏈脲佐菌素和3-氨基苯甲酰胺(3-aminobenzamid，3-AB)(Sigma公司)，PARP1單克隆抗體(Santa Cruz公司)。

1.2 動物分組及給藥:成模的27只DM大鼠隨機分為糖尿病模型組(DM組)和3-AB處理組(DT組)。DT組大鼠每日腹腔注射3-AB(30 mg/kg)，DM組和NC組每天腹腔注射等劑量的0.9%氯化鈉注射液，為期12周。

1.3 標本采集及觀察指標

1.3.1 Western blot檢測PARP1蛋白表達：取含有50 μg總蛋白，電泳濃縮分離后電轉于PVDF膜上，封閉2 h后加稀釋的羊抗鼠PARP1，4 ℃過夜，加HRP標記的兔抗羊二抗，37 ℃ 2 h，PVDF膜與ECL發光底物共反應5 min，除盡ECL發光底物后進行曝光、顯影，檢測分析蛋白顯色的吸光度值。

1.3.2 ELISA法檢測心肌組織8-OHdG及3-NT水平：嚴格按試劑盒說明操作，以100%包被液為對照調零，490 nm處檢測A值。

2 結果

2.1 血糖、8-OHdG及3-NT變化:至12周末，與NC組比較，DM組血糖、心肌中8-OHdG和3-NT含量均顯著增高(Plt;0.01)；與DM組相比，DT組大鼠血糖和心肌3-NT含量回降(Plt;0.05)(表1)。

表1 各組大鼠血糖、8-OHdG、3-NT的變化……