乳腺癌中miR-146a對腫瘤相關巨噬細胞功能的影響

王佳華，馬思思，葛曄華，劉彥信，鄭德先，史 娟

(中國醫學科學院 基礎醫學研究所 醫學分子生物學國家重點實驗室， 北京 100005)

乳腺癌中miR-146a對腫瘤相關巨噬細胞功能的影響

王佳華，馬思思，葛曄華，劉彥信，鄭德先*，史 娟*

(中國醫學科學院 基礎醫學研究所 醫學分子生物學國家重點實驗室， 北京 100005)

目的探討miR-146a對腫瘤相關巨噬細胞(TAM)功能的影響及其在TAM中表達水平變化的調控機制。方法分別對比BALB/c小鼠4T1移植瘤TAM和腹腔巨噬細胞(PEC)、人乳腺癌組織TAM和外周血單核細胞，q-PCR法檢測miR-146a的表達變化。轉染miR-146a antagomir的巨噬細胞與4T1混合接種，確定TAM中miR-146a表達對腫瘤發生發展的影響。結果miR-146a在荷瘤小鼠(Plt;0.05)和人乳腺癌(Plt;0.01)相關巨噬細胞中顯著下調。miR-146a inhibitor 明顯抑制腫瘤的生長。結論TAM中miR-146a可能通過其對巨噬細胞的調控進而促進腫瘤生長。

microRNA；腫瘤相關巨噬細胞；miR-146a

腫瘤相關巨噬細胞(tumor associated macrophage，TAM)在腫瘤微環境中的天然免疫細胞的占絕大多數，尤其在某些類型的乳腺癌組織中，巨噬細胞超過總細胞數目的50%。近幾年來越來越多的研究表明TAM并未發揮抗腫瘤作用，相反，TAM參與促進腫瘤的發生、生長、 侵襲和轉移[1]。臨床數據也證明，TAM的數量與腫瘤患者的不良預后呈現高度的相關性[2]。MicroRNA在免疫調節起到關鍵作用[3]。miR-146a在巨噬細胞中能夠靶向IRAK1、IRAK12和TRAF6[4]，參與負反饋調節LPS誘導炎性反應[5]。本研究旨在探討TAM這種特殊的巨噬細胞中，miR-146a的表達水平變化以及功能。

1 材料與方法

1.1 材料

實時定量檢測試劑盒(北京全式金公司)，所用內切酶(TAKARA公司)，熒光定量PCR檢測引物(華大基因公司)，質粒大量提取試劑盒(Tiangen公司)，人外周血淋巴細胞分離液(天津市灝洋生物公司)。……