白藜蘆醇對結腸癌SW480細胞增殖及MsrA、CXCR4和MMP-13表達的影響

崔運福，郝 濤，趙 碩，王榮華

(濱州醫學院 附屬醫院， 山東 濱州 256603)

白藜蘆醇對結腸癌SW480細胞增殖及MsrA、CXCR4和MMP-13表達的影響

崔運福，郝 濤，趙 碩，王榮華

(濱州醫學院 附屬醫院， 山東 濱州 256603)

在許多植物(例虎杖，葡萄等)中都發現有白藜蘆醇(Resveratrol,Res)，最近對它抗癌作用的研究比較多[1]。Res可以抑制癌細胞增殖，并抑制癌細胞轉移與侵襲，這在以往的體外培養細胞實驗已經得到證實[2]，但有關Res抑制結腸癌SW480細胞增殖與轉移的報道較少，其抗腫瘤的確切機制亦不清楚。本實驗通過研究Res對結腸癌SW480細胞增殖及MsrA、CXCR4和MMP-13表達的影響，為Res今后在臨床中的應用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料：低分化結腸癌SW480細胞(由美國Rockville研究所提供)，培養于含10%胎牛血清(Gibco公司)，青、鏈霉素(各100 U/mL)的DMEM培養基中，置37 ℃、飽和濕度、5% CO2培養箱孵育。Res (Sigma公司)，用DMSO溶解后保存于-20 ℃。

1.2 MTT法檢測細胞增殖活性：將處于對數增殖期的結腸癌SW480細胞懸液調整為1×105個/L，接種于96孔培養板，每孔100 μL，置于37 ℃、5% CO2培養箱培養。待細胞貼壁，去除培養基，再加入不同濃度(0、5、10、20和50 μmol/L)Res的培養基，每組設6個平行孔，同時將DMSO對照組置于37 ℃、5%CO2培養箱培養24 h后,每孔加入MTT溶液20 μL, 37 ℃、5% CO2培養箱繼續培養4 h，小心吸棄孔內培養基，每孔加入DMSO 150 μL,室溫避光振蕩15 min，使結晶充分溶解，于酶聯免疫檢測儀490 nm處檢測吸光度值(A值)。細胞增殖抑制率(%)=(1-實驗孔A值/6*對照孔A值)。

1.3 細胞劃痕實驗：將結腸癌SW480細胞接種到6孔板，待細胞匯合后進行劃痕，PBS洗1遍，更換為無血清培養基，加入低濃度Res(10和50 μmol/L)24 h后觀察劃痕距離并拍照。

1.4 Western blot檢測蛋白變化情況：棄去細胞培養液，PBS洗細……