過表達GBA誘導SH-SY5Y細胞自噬和降低α-synuclein的表達

范成河，王雪晶，楚廣磊，馬耀華，荊 婧，滕軍放

(鄭州大學 第一附屬醫院 神經內科， 河南 鄭州 450052)

過表達GBA誘導SH-SY5Y細胞自噬和降低α-synuclein的表達

范成河，王雪晶，楚廣磊，馬耀華，荊 婧，滕軍放*

(鄭州大學 第一附屬醫院 神經內科， 河南 鄭州 450052)

目的探討葡萄糖腦苷脂酶(GBA)對SH-SY5Y細胞自噬及α-突觸核蛋白(α-synuclein)表達水平的影響。方法將EGFP-N1、EGFP-GBA質粒轉染SH-SY5Y細胞，Western blot檢測Beclin 1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ及α-synuclein蛋白的表達，熒光顯微鏡觀察自噬泡的形成及LC3與GBA在細胞內的共定位。結果與轉染EGFP-N1組相比，轉染EGFP-GBA組上調Beclin 1和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ 蛋白的表達水平(Plt;0.05)，而α-synuclein表達水平則下降(Plt;0.05)；與轉染EGFP-N1組相比，轉染EGFP-GBA組自噬空泡數目明顯增加，外源性LC3免疫熒光表達明顯增強，且GBA與LC3存在共定位。結論GBA上調自噬水平，降低α-synuclein蛋白的表達。

葡萄糖腦苷脂酶；α-突觸核蛋白；自噬

大量病理的、遺傳的及臨床的研究都證實葡萄糖腦苷脂酶基因(glucocerebrosidase gene, GBA)基因突變是帕金森病及相關疾病的重要危險因素[1]。帕金森病(Parkinson’s disease, PD)的病理標志是黑質致密部選擇性多巴胺神經元的丟失及殘存的神經元內蛋白聚集體的形成，而α-突觸核蛋白是這些蛋白聚集體的主要組成部分，PD的發生、發展以及受累腦區的變性均與α-突觸核蛋白的異常聚集有密切的聯系[2-3]。GBA基因的突變可促進α-突觸核蛋白相互聚集并形成穩定的寡聚體，積聚的α-突觸核蛋白影響了GBA蛋白的活性，而GBA活性的改變反過來又影響了α-突觸核蛋白的清除，由此可見α-突觸核蛋白與GBA蛋白的缺乏在PD的發病中起到了一個雙向環路的作用[4]。自噬-溶酶體途徑在清除異常聚集的α-突觸核蛋白中發揮著重要作用[5]，GBA是溶酶體內的一種酶，且GBA與α-突觸核蛋白可相互影響，因此有學者推測GBA蛋白在自噬-溶酶體和調控α-突觸核蛋白的表達中發揮著某種作用。……