NOK癌基因對人胚腎293T細胞周期G1/S期的影響及其作用機制

劉 斌，劉 力

(中國醫學科學院 基礎醫學研究所 北京協和醫學院 基礎學院 病原生物學系，北京 100005)

NOK癌基因對人胚腎293T細胞周期G1/S期的影響及其作用機制

劉 斌，劉 力*

(中國醫學科學院 基礎醫學研究所 北京協和醫學院 基礎學院 病原生物學系，北京 100005)

目的探討NOK癌基因對人胚腎293T細胞周期G1/S期的影響，并研究NOK對G1/S期調控的作用機制。方法用流式細胞儀對瞬時轉染NOK及pcDNA3.0空載體的293T、293ET及HeLa細胞進行周期檢測，并用免疫印跡法(Western blot)在293T細胞中，對其細胞周期G1/S期檢驗點調控蛋白cyclin D/E1及CDK2/4等蛋白水平進行檢測。結果瞬時轉染NOK可使293T、293ET及HeLa細胞G1期較轉染空載體pcDNA3.0的細胞比例減少，S期比例增多 (Plt;0.05)。轉染NOK可使G1/S期檢驗點相關蛋白cyclin D、cyclin E1、p-CDK-2、p-CDK-4、p-Akt及p-Rb蛋白的表達量上升，使P21及P53蛋白表達量下降。結論NOK可促進細胞快速通過細胞G1/S期檢測點，其機制涉及對Akt及CDK2/4通路的影響。

NOK；細胞周期；周期素

細胞周期是細胞重要的生理過程，而細胞周期異常與腫瘤發生密切相關。惡性腫瘤的特征之一在于細胞周期穩態的失控，所以，對于細胞周期的研究對了解腫瘤細胞的增殖與分化有重要作用[1]。NOK(novel oncogene with kinase-domain)是從人扁桃體癌中克隆出的一個新型癌基因，之前的研究已經證明，NOK具有腫瘤基因的特征，其可以促進BaF3細胞向腫瘤轉化，誘導腫瘤細胞向遠端器官侵襲和轉移，且這種致癌效果可在多種組織臟器中發揮作用[2]，在乳腺癌和肺癌等惡性腫瘤中均有體現[3]。然而，對于NOK在調控細胞周期中的作用機制尚未見報道。本研究就NOK對于細胞周期的影響進行了一些初步的研究，以期為進一步揭示NOK的致癌性作用機制以及為抗NOK藥物篩選提供依據。……