李秀紅,張獻彩,周德山*,馬 偉*
(1.首都醫科大學 基礎醫學院 組織學與胚胎學教研室,北京 100069;2.邢臺醫學高等專科學校解剖學教研室,河北 邢臺 054000)
Pak1在小鼠卵母細胞紡錘體形成中的相關性
李秀紅1,張獻彩2,周德山1*,馬 偉1*
(1.首都醫科大學 基礎醫學院 組織學與胚胎學教研室,北京 100069;2.邢臺醫學高等專科學校解剖學教研室,河北 邢臺 054000)
目的研究自動磷酸化Pak1在小鼠卵母細胞減數分裂過程中的亞細胞定位模式及其在紡錘體形成中的相關性。方法用Western blot檢測Ser144位點自動磷酸化的Pak1(pPak1S144)的蛋白表達量的動態變化;免疫熒光染色追蹤pPak1S144的亞細胞定位模式及其與紡錘體和微管組織中心蛋白之間的時空關系。結果在小鼠卵母細胞內pPak1S144持續穩定地表達于減數分裂各期,pPak1S144與中心粒周圍蛋白(pericentrin)和γ微管蛋白(γ-tubulin)在時空上呈現緊密的共定位關系并特異地定位于紡錘體兩極。結論pPak1S144是小鼠卵母細胞MTOC相關蛋白,提示其與減數分裂紡錘體形成相關。
pPak1S144;卵母細胞;減數分裂;微管組織中心;紡錘體
卵母細胞減數分裂過程中染色體分離錯誤會導致產生非整倍體(aneuploidy) 胚胎,是流產和出生缺陷的最常見原因[1]。哺乳動物卵母細胞沒有中心粒,其紡錘體的形成依賴于微管組織中心(microtubule organizing centers, MTOC)[2]。研究證實卵母細胞內γ-tubulin和Pericentrin是MTOC核心成分,前者催化微管的形成和釋放[3],后者參與形成MTOC結構平臺。
P21-activated kinase (Pak1)是一種Ser/Thr蛋白激酶,參與細胞骨架的組織、細胞形態維持和細胞生存等過程[4]。Pak1在Ser144位點發生自動磷酸化,對于Pak1活性的維持有重要的作用[5]。……