經肝動脈自體骨髓干細胞移植治療失代償期肝硬化43例臨床觀察

周鳳蕊，李廣明

(鄭州市第六人民醫(yī)院 肝病五科 河南 鄭州 450015)

肝硬化是以肝組織纖維化、假小葉形成為病理改變的進行性、彌漫性、慢性肝病，臨床上以肝功能損害和門脈高壓為主要臨床表現(xiàn)，后期常出現(xiàn)腹水、消化道出血、脾腫大、肝腎綜合征等嚴重并發(fā)癥。目前以保護肝功能及對癥支持治療為主。近年來隨著對細胞研究認識的不斷深入及分子生物學和細胞生物工程技術的快速發(fā)展，干細胞移植成了研究熱點，尤其是骨髓干細胞移植治療肝硬化顯示出良好前景，為失代償期肝硬化的治療提供了一種嶄新方法。筆者運用經肝動脈自體骨髓干細胞移植治療失代償期肝硬化43例，取得了滿意療效，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年1月至2013年6月鄭州市第六人民醫(yī)院肝病五科住院的43例肝硬化患者，其中男性22例，女性21例，年齡(36.37±7.41)歲，病程(9.62±3.13)a;乙肝肝硬化31例，丙肝肝硬化10例，酒精性肝硬化2例，肝硬化程度按Child-Pugh 分級評定［1］。本研究已通過醫(yī)院倫理委員會批準。

1.2 治療方法 ①術前準備:術前12 h 行碘過敏實驗、術區(qū)常規(guī)備皮，術前6 h 禁食水，患者移植當天進行隔離，采髓室消毒常規(guī)消毒;②自體骨髓干細胞的采集:取髂前上棘為穿刺點，術區(qū)常規(guī)消毒、鋪巾，采用浸潤麻醉，骨髓穿刺針穿刺至骨髓腔，抽取骨髓160 ml，以15 000 U 肝素鈉抗凝;③自體骨髓干細胞的分離:抽取的抗凝骨髓血采用專門的干細胞分離試劑盒，用密度梯度離心法分離制成干細胞懸液，生理鹽水調節(jié)細胞密度，計數(shù)后置冰桶備用;④干細胞移植方法:在數(shù)字減影血管造影機下，局部浸潤麻醉滿意后穿刺左側股動脈，置入動脈鞘，引入肝動脈導管，在數(shù)字造影機下置于肝固有動脈，了解血管分布，然后緩慢注入分離好的骨髓干細胞懸液約1.0 ×109/ml 細胞注入肝動脈內。術后拔出動脈鞘，鹽袋加壓包扎穿刺部位，平臥12 h，禁止下肢劇烈活動。

1.3 觀察指標

1.3.1 血清生化指標檢測:分別于移植術前和術后第3 周、6 周、9 周檢測血清谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)、總膽紅素(TBiL)、白蛋白(ALB)和凝血酶原時間(PT)。

1.3.2 臨床癥狀及體征變化:觀察患者治療前后乏力、食欲、腹脹、黃疸、腹水的變化。

1.3.3 不良反應觀察:觀察患者不良反應的發(fā)生情況，隨時記錄。

1.4 臨床療效判斷標準［2］顯效:臨床主要癥狀和體征消失，血清生化指標檢查正常;有效:臨床主要癥狀和體征明顯改善，血清生化指標好轉;無效:臨床主要癥狀和體征無改善或加重，血清生化指標無好轉甚至惡化。

1.5 統(tǒng)計學方法 運用SPSS 13.0 軟件，定量資料用均數(shù)±標準差(±s)表示，用t 檢驗，定性資料用百分比表示，用χ2檢驗。所有檢驗均采用雙側檢驗，檢驗水準為α=0.05。

2 結果

2.1 臨床療效 術后第9 周觀察，43例患者中顯效17例，有效14例，無效12例，總有效率為73.1%。

2.2 血清生化指標變化 患者自體骨髓干細胞移植后第3 周血清生化指標開始出現(xiàn)變化，ALT、AST、TBiL開始下降，ALB 開始升高，PT 無明顯變化;至第6 周時ALT、AST、TBiL 均較術前明顯降低(P ＜0.05)，ALB較術前顯著升高(P ＜0.05)，PT 較前下降，但差異無統(tǒng)計學意義(P ＞0.05);至第9 周時，ALT、AST、TBiL、ALB 和PT 與術前相比差異有統(tǒng)計學意義(P ＜0.05)，見表1。

表1 經肝動脈自體骨髓干細胞移植術前后血清生化指標變化(±s)

表1 經肝動脈自體骨髓干細胞移植術前后血清生化指標變化(±s)

組別 ALT/(U/L) AST/(U/L) TBiL /(μmol/L) ALB /(g/L)PT/s術前治療后3 周治療后6 周治療后9 周68.2±15.3 44.5±11.7 33.6±14.4 32.7±13.9 71.1±18.2 52.7±13.1 46.8±14.6 44.3±13.8 62.6±18.2 51.7±12.8 34.9±11.4 31.1±10.3 30.1±3.7 31.6±2.9 35.2±3.1 35.4±2.8 25.1±4.7 24.3±4.4 19.2±3.3 17.7±2.6

2.3 臨床癥狀及體征變化 自體骨髓干細胞移植術后第6 周時大多數(shù)患者臨床癥狀及體征明顯改善，至第9 周時改善顯著，其中黃疸減少13例，腹脹減少19例，乏力減少30例，食欲減退改善27例，腹水減少17例。見表2。

表2 經肝動脈自體骨髓干細胞移植術前后癥狀及體征的變化(n)

2.4 不良反應 43例經肝動脈自體骨髓干細胞移植患者術中均未發(fā)現(xiàn)不良反應，術后1例出現(xiàn)皮膚瘙癢，未特殊處理，4 h 后緩解;2例出現(xiàn)穿刺切口出血，給予加壓包扎;5例出現(xiàn)低熱，無藥物治療，自行緩解。

3 討論

我國為肝炎大國，肝炎逐漸發(fā)展為肝硬化，因此肝硬化為臨床常見病、多發(fā)病，年發(fā)病率17.1/10 萬，每年全世界死于肝硬化的人數(shù)超過31 萬，近幾年增加到50 萬［3］。但對肝硬化的治療，一直以來缺乏有效的治療手段，只是對癥處理，不能延緩肝硬化進程以及晚期并發(fā)癥的出現(xiàn)，失代償期肝硬化的終點治療方法肝移植，由于資源緊缺、費用昂貴、排斥反應等一些問題在很大程度上限制了臨床治療和應用。

干細胞能定向分化為特定功能細胞，利于器官的修復，甚至能替代失去功能的器官，主要應用于器官損傷的治療及替代治療，是目前生命科學、分子生物學及細胞生物工程學研究的熱點［4］。研究表明，干細胞定向分化在肝細胞修復及肝細胞再生的過程中起著十分重要的作用，利于肝臟損傷修復。而干細胞的主要來源骨髓干細胞，也具有干細胞定向分化的潛能［5］。骨髓造血干細胞還可通過啟動快速高效的內源性肝細胞的增殖途徑，誘導后產生的肝細胞可以很好地替代受損肝細胞，進而恢復肝臟的功能［6］，并且骨髓干細胞移植來源充足，取材方便，不受供體缺乏的限制，具有費用低廉、技術風險小、安全性高、效果顯著等優(yōu)點，被譽為“肝硬化治療第二條終極途徑”。筆者基于以上理論，臨床開展了經肝動脈自體骨髓干細胞移植治療失代償期肝硬化臨床療效及安全性觀察，結果發(fā)現(xiàn)骨髓干細胞移植后患者臨床癥狀及體征明顯改善，黃疸、腹水消失，腹脹減輕，食欲改善，乏力好轉;血清生化指標也有顯著變化，尤其是血清白蛋白的升高，提高了肝臟的合成及修復，增強了肝臟儲備能力。因此經肝動脈自體骨髓干細胞移植治療失代償期肝硬化是一種全新而有效的治療方法，療效確切，為失代償期肝硬化患者提供新的治療途徑，雖不能給失代償期肝硬化患者帶來治愈性效果，但很大程度上延緩肝硬化的進展速度，提高患者的生存質量，值得進一步深入研究。

［1］ 葉任高.內科學［M］.第5 版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2002:460-468.

［2］ 中華人民共和國中醫(yī)藥行業(yè)標準.中醫(yī)病證診斷療效標準［M］.南京:南京大學出版社，1994:17-18

［3］ Hunton D B，Bollman L，Hoffman H N.Studies of hepatic-function with indocyanine green ［J］.Gastroenterology，2006，(39):713-724.

［4］ Yao P.Activation of NF-KB is not essential for hepatocyte growth factor mediated antiapoptos is effect on WB F-344 cell but for WB cell proliferation［J］.Hepatology，2014，(40):391-398.

［5］ Jiang Y，Jahagibdar B N，Reinghardt R L，et al.Pluripotency of mesenchymal stem cells derived from adult marrow［J］.Nature，2012，418(6893):41-49.

［6］ 姚鵬.細胞因子在體外對大鼠肝干細胞的影響［J］.中華肝臟病雜志，2006，11(1):33-36.