王 菁,丁茗敏
隨著實驗室檢測儀器自動化程度的不斷普及,不但提高了臨床檢驗的精密性和敏感性,也為臨床快速診斷提供了可靠的實驗依據。全自動分析儀的應用,解決了尿液分析中的重要問題,但對有些項目的檢查,也存在著不可忽視的缺陷。本文就尿液干化學分析和傳統手工法測紅細胞、白細胞和尿蛋白所得結果進行對比分析。
1.1 一般資料 標本均來自筆者所在療養院健康查體人員。
1.2 儀器和試劑 尿液干化學分析儀(H-300);尿十一項干化學試紙條(H11-I-I);速而準膠體金便隱血試紙條;顯微鏡;離心機;酒精燈;冰醋酸;10 ml尖底離心管。
1.3 方法 用一次性塑料杯隨機收集查體人員潔凈中段尿,充分混勻后分3管,1管用于干化學分析,1管用于常規鏡檢,1管用于隱血試驗。按《全國臨床檢驗操作規程》對尿標本進行干化學分析,并對每份充分混勻的標本進行測定并記錄試驗結果,然后再用加熱醋酸法檢測尿蛋白記錄結果。尿常規鏡檢用10 ml光底離心管取10 ml混勻的尿液,以1500 r/min,離心5 min,傾去上清液,留取0.2 ml沉渣涂片鏡檢,并記錄紅細胞和白細胞檢驗結果,對結果不相符合的,囑查體者重留一份新鮮尿液,如上檢測。
1200份尿液標本用尿分析儀和傳統手工兩種方法檢測尿蛋白質、紅細胞和白細胞,結果見表1;兩種方法陽性、陰性符合情況見表2。

表1 兩種方法尿液檢測結果

表2 兩種方法尿液檢測陽性及陰性相符合情況
干化學法紅細胞測定有204例陽性,而手工法為186例,對于不相符的標本,經膠體金隱血試驗,15例隱血陽性,3例加熱重新測定為易熱酶所致假陽性,原因不明。去干擾因素后陽性符合率可達83%。
由表1可知,尿干化學分析儀和傳統手工兩種方法檢測尿紅細胞、白細胞和尿蛋白的結果雖然存在著一定的差異,但經統計學處理,差異無顯著性意義。說明兩種方法均可為查體所用,而且兩種方法結合進行還能起到互補的作用。
3.1 關于紅細胞 分析儀204份陽性標本中,手工鏡檢有22份未見紅細胞。這種情況在實際工作中經常遇到。因為干化學法測定紅細胞不僅能測定完整的各種形狀的紅細胞,還可檢測游離的血紅蛋白,以及具有過氧化酶作用的其他物質。1200份尿標本中干化學法紅細胞測定有204例陽性,鏡檢為186例,對不相符的標本經膠體金試驗,發現83%的標本隱血呈陽性,17%呈假陽性。分析顯微鏡檢測的漏檢原因,這主要是由于紅細胞在形態上發生了很大的變化,尿液酸堿度、滲透壓的改變及放置時間過長,造成紅細胞膜破裂,紅細胞中的血紅蛋白散出,而紅細胞成碎片或成影細胞,在普通高倍鏡下難以發現造成的;其次有可能是由于腎臟病變造成紅細胞破裂及芽孢的脫落或出現多個芽孢,包體變小,折光性變弱,或是小球形畸形紅細胞,整體固縮,折光性強,容易將其誤認為是真菌孢子等[1]。因此對干化學法陽性而鏡檢陰性的尿標本需進行免疫法隱血測定,不能盲目認為無有形紅細胞就否定了干化學法。根據表1、2的結果,手工鏡檢紅細胞陽性186例標本中分析儀有2例呈陰性,詢問查體者其中1例每日口服VitC已有2月有余,另1例口服VitC 3周有余,而大量VitC可造成尿中紅細胞分析儀檢測出現假陰性。
3.2 關于白細胞 分析儀陽性的183份標本有4份手工鏡檢未見白細胞,囑體檢者重留新鮮尿液檢測,還有3份標本相符合,這是由于分析儀是檢測粒細胞漿中特有的酯酶,尿液在膀胱中駐留時間過長或尿標本放置過久,尿中pH及各種因素的影響,導致了白細胞的破壞,其特異酯酶游離于尿中,因此鏡檢時出現了假陰性。檢測中發現女性白帶增多和鹽類結晶等情況同樣可造成假陽性。手工鏡檢190份陽性標本中而11份分析儀未檢測出,通過重留尿標本,結果還是如前。將尿沉渣涂片干燥、瑞氏染色油鏡觀察發現白細胞80%以上是淋巴細胞,這是由于淋巴細胞不含有粒細胞特有的酯酶因而呈陰性;尿中有大量先鋒或慶大霉素藥物使白細胞結果偏低[2]。有1例鏡檢白細胞陽性,近期無明顯病史和用藥史,而分析儀卻未檢出,可能是由于白細胞數太少,分析儀紙條敏感度不夠所致。
3.3 關于尿蛋白 分析儀檢測尿蛋白陰性標本1176例,手工法檢查有4例陽性(即手工法27例陽性標本,分析儀有4例檢測陰性),根據有關資料分析,尿中球蛋白4000 mg/L以下干化學分析儀檢測為陰性,只有達到5500 mg/L時才會出現可疑反應。尿分析儀測定球蛋白的敏感性是白蛋白的1/100~1/50,因此導致了假陰性反應[3]。分析儀檢測蛋白陽性的24份標本中有1份手工加熱醋酸法呈陰性。根據報道:尿中混有其它分泌物或細胞成分較多時,可出現假陽性。鏡檢這1份標本含有++的黏液絲,且含有白細胞。
通過以上分析筆者認為,尿干化學分析儀的檢測和傳統手工法聯合應用具有互補性,兩者缺一不可。為了保證檢驗質量,首先要把好儀器質量關、試紙條的質量關,堅持每日質量控制并規范操作;其次是檢驗人員對尿中有形成分的形態及變化規律要有明確的認識,切不可為了省事而以分析儀代替必要的手工和鏡檢。
[1]叢玉隆,馬俊龍.尿液干化學分析與顯微鏡檢查[J].中華醫學檢驗雜志,1997,10(5):135.
[2]劉偉平,殷朋剛,鐘輝秀.UF-100尿沉渣分析儀檢測品液白細胞、紅細胞和管型的干擾因素研究[J].中國當代醫藥,2013,19(9):77-78.
[3]葉應嫵,王毓三.全國臨床檢驗操作規程[M].南京:東南大學出版社,1997.120-125.