血清淀粉樣蛋白酶P（SAP）在3種常見結締組織病患者中的表達及其意義

吳麗芬　范倩　陳風華　孫文聞　劉永玉　姬海燕　魏蔚　鞏路

【摘要】 目的：研究血清淀粉樣蛋白P（SAP）在3種常見結締組織病患者血清中含量，探討其在結締組織病發生發展中的作用及意義。方法：用ELISA方法測定正常人、系統性紅斑狼瘡活動期和緩解期、類風濕關節炎活動期和緩解期、初治干燥綜合征等風濕性疾病血清中血清淀粉樣蛋白P（SAP）含量。統計各型患者血清中血清淀粉樣蛋白P（SAP）的表達水平及其意義。結果：SAP在系統性紅斑狼瘡患者活動期血清中高表達，且其表達水平顯著高于緩解期和正常人，差異均有統計學意義（P<0.05）。結論：血清淀粉樣蛋白P（SAP）在系統性紅斑狼瘡活動期高表達，可以作為系統性紅斑狼瘡患者活動期的診斷指標之一。

【關鍵詞】 血清淀粉樣蛋白酶P（SAP）； 系統性紅斑狼瘡； 類風濕關節炎； 干燥綜合征； DNA

系統性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）是一種表現有多系統損害的慢性自身免疫病，其血清具有以抗核抗體為代表的多種自身抗體。本病病程以病情緩解和急性發作交替為特點，臨床表現為皮膚損害、關節癥狀、貧血、心血管動脈粥樣硬化和腎臟疾病和神經系統損害等癥狀，感染、狼瘡腦病和狼瘡腎炎是該病最常見的死因[1-2]。系統性紅斑狼瘡（SLE）、類風濕關節炎（RA）、原發性干燥綜合征（PSS）是3種臨床常見的彌漫性結締組織病，免疫功能異常及T或B細胞的紊亂是其共同的發病機制，3種疾病的主要病理基礎分別是血管炎、滑膜炎、外分泌腺體病變，但是后兩者在合并關節外或者腺體損害時也會有血管炎的表現[3-4]。至今為止，3種常見結締組織病的病因不清。血清淀粉樣蛋白P（SAP）是人體內主要DNA結合蛋白，可促進DNA被巨噬細胞吞噬起到免疫調理作用。本論文擬研究SAP在3種主要結締組織病患者血清中含量，探討其在這些疾病發生發展中的作用及意義，為3種結締組織病的診斷和治療提供新思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2010-2013年在本院風濕免疫科門診就診或住院治療的無慢性消耗性疾病的10例活動期和10例緩解期SLE患者、10例初治的PSS、10例活動期和10例緩解期RA患者的血清標本，同時選取在本院體檢中心A套餐中體檢的抗核抗體和類風濕因子陰性的正常人血清標本10例，研究對象年齡均在18～65歲之間。SAP試劑盒購自美國RB公司。ELSIA試驗所用分光光度計由天津醫科大學總醫院感染免疫科實驗室提供。

1.2 納入標準 （1）據SLEDAI評分系統將SLE患者分為活動期和緩解期，SLE>4分為活動期，SLE<4分為緩解期。（2）據28個關節疾病活動度評分（DAS28）DAS 28評分系統來評分：DAS 28是以28個關節計分：包括雙肩、雙肘、雙腕、雙手掌指關節、雙手近端指間關節、雙膝關節。DAS 28>5.1表示疾病活動高；3.2

1.3 方法 用ELISA方法測定正常人、SLE、初治的PSS、RA患者血清標本中血清淀粉樣蛋白P蛋白的含量。嚴格按照試劑盒說明書操作：實驗前20 min從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫（20～25℃），取出所需數量的板條，其余密封放回4 ℃；加樣、溫育、洗滌、顯色、終止、測定，然后繪曲線圖。

1.4 統計學處理 采用SPSS 19.0軟件進行統計學處理，計量資料以（x±s）表示，比較采用t檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 SLE中SAP表達水平的測定 用ELISA方法檢測顯示SLE活動期SAP含量為（382.29±277.96）?g/L明顯高于正常人SAP的（40.32±34.09）?g/L，差異具有統計學意義（P<0.05）；SLE患者緩解期SAP水平含量為（111.82±153.25）?g/L，亦高于正常人，但差異無統計學意義（P>0.05）。

2.2 SAP在RA患者活動期、緩解期和正常人體內的表達水平測定 RA患者活動期SAP的表達水平為（121.04±60.12）?g/L高于正常人的（40.32±34.09）?g/L，但差異無統計學意義（P>0.05）；而緩解期的SAP表達水平為（35.54±23.43）?g/L與正常人比較差異無統計學意義（P>0.05）。

2.3 SAP在初治PSS患者和正常人體內的表達水平測定 初治PSS患者SAP的表達水平為（86.83±30.12）?g/L和正常人的（40.32±34.09） ?g/L

比較差異無統計學意義（P>0.05）。

3 討論

人血清淀粉樣蛋白P物質（SAP），與C反應蛋白（CRP）構成血清正五聚蛋白家族，其系統發生學非常保守，表明具有重要生理功能。在生理狀態（鈣濃度2 mmol/L）下，SAP在血清中由5個相同亞基非共價結合而形成為環狀五聚體，并通過相鄰單體的氨基酸殘基相互影響，從而形成功能性空間結構，具有結合LPS、凋亡細胞小體、DNA等物質的能力。它每個亞基分子量為25.5 kd，且血清濃度相對恒定，約為40 ?g/mL。SAP蛋白易于沉積于腎臟等器官的基底膜組織，在各種炎癥組織中分布增加，尤其是具有很強的與淀粉樣纖維結合的能力，因此得名為血清淀粉樣蛋白。DNA是人體結構的核心組成部分，也是人體免疫系統識別的重要成分。大量研究表明，無論是外源性的核酸物質，包括感染病原體的核酸組分，人工合成的核酸片段和模擬分子等，還是內源性的核酸物質包括人體自身的體液循環核酸，細胞凋亡小體內的DNA片段等，均可以成為免疫系統的識別對象，并引起強烈的先天免疫反應和抗原特異性免疫反應[5]。DNA免疫識別異常可以引起多種自身免疫性疾病[6]；而另一方面DNA作為一種免疫調節劑，在腫瘤、感染性疾病中早有應用，而攜帶特定基因的DNA載體，又在DNA疫苗和基因治療領域有著廣泛的應用，在人體內SAP可以促進DNA被人巨噬細胞吞噬從而起到免疫調理作用，從而介導DNA清除，以減輕DNA抗原在組織的沉積和自身免疫活性，阻止自身抗體的產生[7-8]?，F有研究發現SAP是血清中主要的DNA結合蛋白，并具有物種差異性的DNA結合活性，可以與巨噬細胞等免疫細胞發生相互作用并且有可能具有調理吞噬的功能，即抑制DNA的轉染非吞噬細胞，促進DNA被巨噬細胞清除[9-11]。SAP還可以抑制巨噬細胞引起的先天免疫激活。文獻[12-13]報道：SAP可以顯著地抑制DNA誘導的巨噬細胞激活，表現為細胞因子和趨化因子分泌大大減少，而且可以抑制TLR9下游的NF-κB，RIG-I、DAI下游的IRF3轉錄因子的激活。并揭示SAP對先天免疫反應有著負向調控的作用。

本論文研究了SAP在3種常見結締組織病患者血清中含量，探討其在3種常見結締組織病發生發展中的作用及意義。SAP是一個功能蛋白，目前為止，國內外對該蛋白在3種常見結締組織病中的功能的研究報道很少。2003年國內文獻報道SAP在SLE活動期的表達升高，而緩解期升高不明顯；但2004年國外文獻[14-15]卻報道SAP在SLE患者體內不減少，急性期也不升高，兩者存在矛盾性，筆者通過ELISA方法驗證在SLE活動期SAP的表達水平是升高的，而緩解期升高不明顯，且在RA活動期和緩解期及PSS患者體內血清淀粉樣蛋白P表達水平與正常人比較無明顯差別。

綜上所述，SAP在SLE活動期高表達，可以作為SLE患者活動期的診斷指標之一。

參考文獻

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（收稿日期：2014-04-29） （本文編輯：蔡元元）endprint

本論文研究了SAP在3種常見結締組織病患者血清中含量，探討其在3種常見結締組織病發生發展中的作用及意義。SAP是一個功能蛋白，目前為止，國內外對該蛋白在3種常見結締組織病中的功能的研究報道很少。2003年國內文獻報道SAP在SLE活動期的表達升高，而緩解期升高不明顯；但2004年國外文獻[14-15]卻報道SAP在SLE患者體內不減少，急性期也不升高，兩者存在矛盾性，筆者通過ELISA方法驗證在SLE活動期SAP的表達水平是升高的，而緩解期升高不明顯，且在RA活動期和緩解期及PSS患者體內血清淀粉樣蛋白P表達水平與正常人比較無明顯差別。

綜上所述，SAP在SLE活動期高表達，可以作為SLE患者活動期的診斷指標之一。

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（收稿日期：2014-04-29） （本文編輯：蔡元元）endprint

本論文研究了SAP在3種常見結締組織病患者血清中含量，探討其在3種常見結締組織病發生發展中的作用及意義。SAP是一個功能蛋白，目前為止，國內外對該蛋白在3種常見結締組織病中的功能的研究報道很少。2003年國內文獻報道SAP在SLE活動期的表達升高，而緩解期升高不明顯；但2004年國外文獻[14-15]卻報道SAP在SLE患者體內不減少，急性期也不升高，兩者存在矛盾性，筆者通過ELISA方法驗證在SLE活動期SAP的表達水平是升高的，而緩解期升高不明顯，且在RA活動期和緩解期及PSS患者體內血清淀粉樣蛋白P表達水平與正常人比較無明顯差別。

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