藥品生產(chǎn)企業(yè)微生物檢查室與無菌檢查室的設(shè)置管理

王瑞玲

摘要：目的：文章結(jié)合藥品生產(chǎn)企業(yè)的實(shí)際情況，完善《中國藥典》2010版對(duì)微生物檢查室和無菌檢測(cè)室的要求。方法：討論微生物檢查室和無菌檢測(cè)室功能。結(jié)果與結(jié)論：防止?jié)撛诘慕徊嫖廴荆瑹o菌室、微生物限度和陽性對(duì)照室實(shí)驗(yàn)室選擇空間隔離。

關(guān)鍵詞：藥品生產(chǎn)；微生物檢查室；質(zhì)量管理；無菌檢查室；交叉污染

中圖分類號(hào)：R446 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1009-2374（2014）25-0148-02

微生物限度檢查法和無菌檢查法收載于《中國藥典》2010版附錄，一些口服、外用等非規(guī)定滅菌制劑及其原料、輔料、與藥品直接接觸的包裝材料都需要進(jìn)行微生物限度檢查。檢查項(xiàng)目包括細(xì)菌數(shù)、霉菌數(shù)、酵母菌數(shù)及控制菌等檢查，無菌檢查法用于檢查藥典要求無菌的藥品、原料、輔料及其他品種是否無菌的一種方法。如注射劑、眼用制劑等。微生物限度檢測(cè)室和無菌檢查室應(yīng)按照中國藥典及國際國內(nèi)有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)定進(jìn)行設(shè)計(jì)、配置和維護(hù)。本文從檢驗(yàn)室的設(shè)計(jì)原則、設(shè)計(jì)要求、設(shè)施設(shè)備配置、使用、操作、維護(hù)管理等方面提出要求，強(qiáng)化對(duì)微生物檢測(cè)室和無菌檢查室的規(guī)范管理。

為保證檢驗(yàn)質(zhì)量，微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按微生物檢驗(yàn)的項(xiàng)目和需要，合理設(shè)置。

1 無菌檢查室的環(huán)境條件

無菌檢查室是用來檢查注射劑、用于無菌制劑中的原料、輔料的檢驗(yàn)場(chǎng)所。以無菌保證水平（SAL）表述，接受標(biāo)準(zhǔn)為SAL<10-6[6-7]。因此，無菌室的環(huán)境十分關(guān)鍵，對(duì)樣品的檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性干擾很大。

《中國藥典》2010版附錄規(guī)定無菌檢查室的潔凈度要求，局部100級(jí)的單向?qū)恿骺諝鈪^(qū)域內(nèi)，背景環(huán)境潔凈度10，000級(jí)。

2 微生物檢查室的環(huán)境條件

微生物檢查室是用來檢查非規(guī)定滅菌制劑及其原料、輔料受微生物污染程度的場(chǎng)所。微生物檢查指物品中允許含規(guī)定合格范圍內(nèi)的活的微生物。

《中國藥典》2010版附錄規(guī)定微生物檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度10，000級(jí)以下，局部潔凈度100級(jí)的單向?qū)恿骺諝鈪^(qū)域內(nèi)進(jìn)行。

3 陽性對(duì)照室的環(huán)境條件

陽性對(duì)照室是制備陽性對(duì)照菌種及轉(zhuǎn)接種等場(chǎng)所。

陽性對(duì)照室應(yīng)為潔凈度局部100級(jí)的單向?qū)恿骺諝鈪^(qū)域內(nèi)，背景環(huán)境潔凈度10，000級(jí)，室內(nèi)空氣經(jīng)過濾裝置處理后直排室外，一般都在生物安全柜內(nèi)操作。

4 無菌室、微生物限度實(shí)驗(yàn)室和陽性對(duì)照室的設(shè)置管理

實(shí)驗(yàn)室布局設(shè)計(jì)應(yīng)避免交叉污染，有利于清潔和日常維護(hù)。人和物是潔凈區(qū)最大的污染源，實(shí)驗(yàn)室要分別設(shè)置人流和物流的通道，并有明確的標(biāo)識(shí)。3個(gè)實(shí)驗(yàn)室要分別設(shè)置更衣通道，避免交叉污染，環(huán)境的著裝要與藥品生產(chǎn)相一致，無菌檢查試驗(yàn)時(shí)的潔凈衣需要穿無菌內(nèi)衣、無菌外衣、無菌鞋和戴無菌手套，并且都經(jīng)過高壓滅菌。進(jìn)入的物流要與人流分開，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室要都單獨(dú)的傳遞窗傳遞試驗(yàn)樣品和器具，所有樣品都要用75%乙醇擦拭消毒，無菌檢測(cè)所用器具等皆需進(jìn)過滅菌處理送入無菌檢查室；滅菌的效果要進(jìn)行驗(yàn)證確認(rèn)，傳遞窗必須安裝紫外燈，并定期對(duì)其消毒效果進(jìn)行確認(rèn)評(píng)價(jià)，及時(shí)更換紫外燈。陽性對(duì)照室中的操作多為有菌操作，其對(duì)操作人員及操作環(huán)境污染的可能性更大，建議用生物安全柜操作。由此認(rèn)為，無菌室、微生物限度實(shí)驗(yàn)室本身都應(yīng)當(dāng)確保檢測(cè)環(huán)境對(duì)實(shí)驗(yàn)樣品不得產(chǎn)生污染，而影響檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。在無菌檢查的同時(shí)要同步對(duì)檢驗(yàn)環(huán)境進(jìn)行檢測(cè)，潔凈程度仍然滿足潔凈要求。因此，3個(gè)實(shí)驗(yàn)室在檢測(cè)結(jié)束后的清場(chǎng)、清洗等強(qiáng)度不同，但最終都是以滿足10，000潔凈要求及100級(jí)潔凈要求為可接受的標(biāo)準(zhǔn)。

5 實(shí)驗(yàn)室的管理

藥品微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范管理包括以下幾個(gè)方面：人員、培養(yǎng)基、菌種、設(shè)備、文件記錄、結(jié)果的判斷等。

5.1 人員

從事藥品微生物試驗(yàn)工作的人員應(yīng)具備微生物學(xué)或相近專業(yè)知識(shí)的教育背景，并經(jīng)過培訓(xùn)后才能上崗。在微生物實(shí)驗(yàn)的門口應(yīng)當(dāng)設(shè)置門禁裝置，進(jìn)入潔凈區(qū)人員必須按規(guī)定的更衣流程進(jìn)行洗手消毒更衣，方可進(jìn)入潔凈區(qū)。不準(zhǔn)進(jìn)入潔凈區(qū)的人員包括：非檢驗(yàn)人員、皮膚有外傷、炎癥、騷癢癥者，鼻涕排出物過多者；嚴(yán)重咳嗽、打噴嚏者；沒有按規(guī)定除去化妝品和未穿潔凈工作服者；劇烈運(yùn)動(dòng)而出汗者等。

5.2 培養(yǎng)基

培養(yǎng)基是微生物試驗(yàn)的基礎(chǔ)，它的質(zhì)量直接影響檢測(cè)結(jié)果。適宜的培養(yǎng)基制備方法、貯藏條件和質(zhì)量控制試驗(yàn)是檢測(cè)數(shù)據(jù)的前提保證。培養(yǎng)基應(yīng)采用驗(yàn)證的滅菌程序滅菌，培養(yǎng)基滅菌方法和條件，應(yīng)通過無菌性試驗(yàn)和促生長試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。培養(yǎng)基融化的程序也需要進(jìn)行確認(rèn)，因?yàn)檫^度加熱會(huì)影響培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分。

5.3 設(shè)備

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備與檢驗(yàn)?zāi)芰凸ぷ髁肯噙m應(yīng)的儀器設(shè)備，并需要定期校驗(yàn)如天平、砝碼、pH計(jì)溫度和壓力表、滅菌用的消毒器等，操作使用的凈化臺(tái)要定期驗(yàn)證它的潔凈度。這些設(shè)備的安裝要便于操作易于維護(hù)、清潔。

5.4 菌種

實(shí)驗(yàn)室菌種的處理和保藏，要考慮選用的培養(yǎng)基，儲(chǔ)存的溫度，定期檢查菌種管的外觀級(jí)干燥狀態(tài)，填寫好菌種的相關(guān)資料，專人保管和發(fā)放，嚴(yán)格執(zhí)行保管和發(fā)放制度，并建立進(jìn)行廢菌種的滅活銷毀制度。

5.5 實(shí)驗(yàn)室的布局和運(yùn)行

實(shí)驗(yàn)室對(duì)進(jìn)出潔凈區(qū)域的人和物建立控制程序和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，并嚴(yán)格執(zhí)行定期對(duì)潔凈區(qū)進(jìn)行驗(yàn)證，建立日常監(jiān)測(cè)制度。實(shí)驗(yàn)室對(duì)所用的消毒劑種類應(yīng)定期更換，防止產(chǎn)生耐藥性，進(jìn)入潔凈區(qū)的消毒液要經(jīng)過除菌過濾。

5.6 文件、記錄

文件有可控性和可操作性，實(shí)驗(yàn)記錄內(nèi)容要齊全，及時(shí)記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，避免事后寫回憶錄。

5.7 結(jié)果判斷

結(jié)果判斷及試驗(yàn)報(bào)告要準(zhǔn)確、清晰，要包含所有的檢測(cè)項(xiàng)目及判斷依據(jù)、判斷結(jié)論。

6 環(huán)境監(jiān)測(cè)

定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境進(jìn)行檢測(cè)，以確保環(huán)境處于受控狀態(tài)，包括塵埃粒子、微生物（浮游菌、沉降菌和表面微生物），高效過濾器的檢漏等。制定出檢測(cè)周期。

7 清潔消毒

實(shí)驗(yàn)室在每次試驗(yàn)結(jié)束后對(duì)實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所進(jìn)行清場(chǎng)，消毒，無菌區(qū)用的潔具應(yīng)當(dāng)滅菌處理，消毒液也要除菌過濾，有菌和無菌的潔具要分開，不能共用，在顏色上給以直觀的區(qū)分。

8 問題的討論

無菌檢查、微生物限度檢查和陽性對(duì)照室凈化系統(tǒng)功用與分開的爭(zhēng)論。

《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》要求藥品生產(chǎn)企業(yè)生物檢定、微生物和放射性同位素的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)分時(shí)進(jìn)行。避免實(shí)驗(yàn)間的交叉污染，以不影響數(shù)據(jù)的測(cè)定。無菌檢查、微生物室和陽性對(duì)照室分開固然能解決不同實(shí)驗(yàn)的交叉污染問題，若與無菌室等共用凈化空調(diào)系統(tǒng)，一旦因操作失誤或其他原因造成環(huán)境污染，則所有同一空調(diào)系統(tǒng)下的實(shí)驗(yàn)室都將被污染，所以其必須是獨(dú)立的空調(diào)系統(tǒng)。但大部分企業(yè)考慮到成本的問題都共用一臺(tái)空調(diào)機(jī)組進(jìn)行控制3個(gè)環(huán)境，因此對(duì)3個(gè)室的要求就提高了，各個(gè)室分別設(shè)置了檢測(cè)室→潔凈走廊→手消毒→更衣間→一次更衣間（緩沖間）的梯度遞減模式。陽性對(duì)照室且回風(fēng)應(yīng)直排，微生物檢查室建議且回風(fēng)應(yīng)直排，只有無菌檢查室可以利用回風(fēng)，這樣才能保證整個(gè)環(huán)境不產(chǎn)生交叉污染。

參考文獻(xiàn)

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