祛毒湯聯合醋酸潑尼松對狼瘡樣大鼠IL-6、IFN-γ的影響分析

王 倩

大慶油田總醫院風濕免疫科53病區，黑龍江 大慶 163000

系統性紅斑狼瘡是自身免疫介導的，以免疫性炎癥為主要表現的彌漫結締組織病[1]。其發病與感染、免疫、遺傳、環境、激素等因素有關，其中機體免疫功能紊亂在系統性紅斑狼瘡的發病發展過程中起著至關重要的作用。系統性紅斑狼瘡的免疫特征為T細胞和B細胞的異常活化、補體激活及細胞因子失衡，體內產生大量自身抗體和免疫復合物，從而引起超敏反應[2]。

目前中藥治療系統性紅斑狼瘡已取得一定成果，但其作用機制尚不清楚。IL-6屬Th1型細胞因子，IFN-γ屬TH2型細胞因子，本實驗探究祛毒湯聯合醋酸潑尼松對狼瘡樣大鼠IL-6、IFN-γ的影響，從免疫學角度探討對系統性紅斑狼瘡的治療作用。

1 材料與方法

1.1 動物和藥物 SD大鼠，購自北京大學動物實驗中心;醋酸潑尼松，上海信誼藥業有限公司出品，國藥準字:H31020675;祛毒湯由本院自制，主要包括生黃芪、白英、生地黃、秦艽、丹參、菝葜、白花蛇舌草、雷公藤、升麻、紫草、鬼箭羽、蜈蚣、鱉甲、生甘草等藥物;IL-6、IFN-γ試劑盒購自北京大清生物技術有限公司。

1.2 模型制備 SD大鼠，共60只。隨機分為三組，各20只，即中西藥組 (祛毒湯+醋酸潑尼松)，西藥組 (醋酸潑尼松)，模型組。采用米舍爾改良法，取大鼠淋巴組織制成淋巴細胞懸液，每只大鼠每次注射0.2ml淋巴細胞懸液，含5×107淋巴細胞。分別1、4、7、10天經尾靜脈注射。

1.3 給藥方法 造模后24h，按照大鼠體重給藥，中西藥組:給予醋酸潑尼松0.312mg/20g·d，祛毒湯按照0.7g生藥/20g·d;西藥組給予醋酸潑尼松0.312mg/20g·d;模型組灌喂等量生理鹽水。各組大鼠給藥15天。

1.4 檢測指標 造模大鼠取腎臟組織，10%甲醛固定，酒精梯度濃度脫水，二甲苯透明，石蠟包埋，切片，蘇木伊紅染色。取各組大鼠靜脈血2ml，3000r/min離心15min，制備血清。按照IL-6、IFN-γ試劑盒操作說明說進行檢測，對比三組大鼠血清IL-6、IFN-γ水平。

2 結果

2.1 造模大鼠腎臟組織觀察 腎小球顯著增大，形狀不規則，可見免疫復合物，腎小球毛細血管充血，內皮細胞彌漫性、階段性增生，腎小球囊腔狹窄、基底膜增厚，近曲小管管腔變形，遠曲小管可見管型，腎間質可見炎性細胞浸潤。

2.2 IL-6、IFN-γ水平檢測 實驗結果表明，與模型組比較，中西藥組和西藥組IL-6、IFN-γ水平顯著下降 (P＜0.05)，同時，中西藥組IL-6、IFN-γ水平顯著低于西藥組，差異具有統計學意義 (P＜0.05)，結果見表1。

表1 IL-6、IFN-γ水平變化 (，N=20)

3 討論

系統性紅斑狼瘡是非器官特異性自身免疫疾病，體內CD4+T細胞亞群失衡導致其分泌的細胞因子失調[3]。IL-6作用于多種效應細胞，參與免疫應答和炎癥反應。IL-6可促進抗體產生，及肥大細胞的增殖，參與變態反應性疾病和體液免疫性疾病，因而IL-6是一個重要的細胞因子。IFN-γ主要由NK細胞和T細胞分泌產生，通過激活單核巨噬細胞、NK細胞、淋巴細胞來調節免疫反應，提示IFN-γ具有促進系統性紅斑狼瘡發病的作用。

本研究結果顯示，大鼠造模成功后IL-6、IFN-γ水平處于較高水平，給予激素及祛毒湯后IL-6、IFN-γ水平顯著下降，中西藥組大鼠IL-6、IFN-γ水平顯著低于模型組和西藥組，說明祛毒湯聯合醋酸潑尼松可以有效降低狼瘡樣大鼠的細胞因子水平，其中祛毒湯可能具有一定的作用。

祛毒湯用于系統性紅斑狼瘡具有活血化瘀、滋陰益氣、涼血解毒之效，本病的病機為本虛標實，腎虛、先天稟賦不足、熱毒內淤，因此祛毒湯可達到很好的臨床效果。現代藥理學研究表明，祛毒湯里的雷公藤具有抑制單核細胞增殖反應，抑制B細胞功能，并且作用于B細胞的活化增殖階段，因此抑制B細胞和單核細胞分泌的炎性細胞因子;甘草提取物Lx對巨噬細胞的作用能抑制抗原信息傳遞，從而抑制免疫活性細胞。

本研究通過狼瘡樣大鼠的研究，發現祛毒湯聯合醋酸潑尼松可以調節免疫，降低炎性因子IL-6、IFN-γ水平，為后續研究提供理論基礎，同時也為臨床治療提供重要實驗依據。

[1]錢齊宏，張學光，放葛華.T細胞亞群及共刺激分子表達與系統性紅斑狼瘡免疫病理的關系[J].蘇州大學學報 (醫學版)，2002，22(1):28.

[2]陳捷，王蘭蘭，劉瑾.LSE患者T細胞亞群功能紊亂與Thl、Th2細胞因子偏移的研究[J].華西醫學，2004，19(3):409.

[3]沈友軒，柯瑤，劉曉華，等.系統性紅斑狼瘡患者的Th細胞亞群平衡失調的初步研究[J].上海免疫學雜志，2003，23(6):403.