高效液相色譜法測定水體中四種鄰苯二甲酸酯

方旭輝　謝洪勇

摘要：建立了液液萃取-高效液相色譜法測定水體中DEP、DBP、DCP和DEP4種內(nèi)分泌干擾素的方法。以二氯甲烷為萃取劑，氮吹蒸發(fā)濃縮后進樣分析。PLC分析條件為：100%甲醇作流動相、流速12mL/min、柱溫3℃、紫外檢測器（224nm）。方法的線性相關(guān)系數(shù)大于0999，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于62%，儀器檢測限分別為0011mg/L、0009mg/L、0016mg/L、0020mg/L，加標(biāo)回收率為841%～99%。實際水樣檢測結(jié)果為河流中4種PAEs總濃度在36～1842μg/L，表明該河流水體受到不同程度的PAEs污染。

關(guān)鍵詞：液液萃??；高效液相色譜；鄰苯二甲酸酯

中圖分類號：O677

文獻標(biāo)識碼：A文章編號：16749944（2014）0802203

[FL（2K2]

1引言

鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)（PAEs）被作為高分子材料助劑而廣泛地應(yīng)用于塑料制品生產(chǎn)中，PAEs是塑料工業(yè)中最為常見的增塑劑，可增加聚合物材料的延展性和柔軟度，改善加工性能[1]，也可用作農(nóng)藥載體、驅(qū)蟲劑、潤滑劑、化妝品、去泡劑和香味品等的生產(chǎn)原料。鄰苯二甲酸酯類環(huán)境激素含有較弱的雌性激素活性成分，在人和動物體內(nèi)起著類似雌性激素的作用，可導(dǎo)致內(nèi)分泌紊亂、生殖機能失常等，具有影響生物體內(nèi)分泌和導(dǎo)致癌細(xì)胞增殖的作用[2] 。PAEs極易遷移進入環(huán)境，且易于吸附難以降解，在大氣、水體、土壤、生物體乃至人體都發(fā)現(xiàn)PAEs化合物的存在[3]，它是一類重要的有機污染物，受到世界各國的普遍重視。美國國家環(huán)保局（EPA）將鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEP）、鄰苯二甲酸二辛酯（DOP）、鄰苯二甲酸丁基芐基酯（BBP）、鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）、鄰苯二甲酸二乙酯（DEP）、鄰苯二甲酸二甲酯（DMP）6種PAEs化合物列為優(yōu)先控制污染物[4]。被列為內(nèi)分泌干擾素的鄰苯二甲酸酯共有8個， 都是作為增塑劑使用， 它們是：DEP、BBP、DBP、DCP（鄰苯二甲酸二環(huán)己酯）、DEP、DNPP（鄰苯二甲酸二正戊酯）、DP（鄰苯二甲酸二己酯）、DPP（鄰苯二甲酸二丙酯）。目前，在對我國的許多河流、湖泊、水源地的研究都發(fā)現(xiàn)PAEs的存在，且某些種類存在超標(biāo)現(xiàn)象[6～8]。本文以被列為內(nèi)分泌干擾素中的4種鄰苯二甲酸酯（DEP、DBP、DCP、DEP）為研究對象，采用液液萃取-高效液相色譜法對某水體中鄰苯二甲酸酯的現(xiàn)狀進行了分析。

2材料與方法

21儀器與試劑

211儀器

高效液相色譜儀：島津Shimadzu LC-20A液相色譜儀，SPD-20A紫外檢測器，Shimadzu ODS-C18色譜柱（20mm×46mm ID，μm）；04μm有機相過濾頭（上海紫一試劑廠）；烘箱（上海意豐電爐有限公司）；氮吹蒸發(fā)濃縮儀（ortex60003，Labech）。

為了避免使用塑料制品造成鄰苯二甲酸酯的污染，實驗過程全部使用玻璃器皿。將玻璃器皿用自來水洗凈， 再分別用蒸餾水、丙酮淋洗后在烘箱中以10℃烘烤3h（其中帶刻度的器具采取風(fēng)吹晾干方式），以降低空白值。

212試劑

甲醇、丙酮、二氯甲烷均為PLC色譜純（國藥集團化學(xué)試劑有限公司）；無水Na2SO4和NaCl為優(yōu)級純，使用前在馬弗爐中以00℃烘烤3h，并轉(zhuǎn)置干燥器中保存?zhèn)溆谩?/p>

213鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

鄰苯二甲酸二乙酯（Diethyl Phthalate，DEP，99%），鄰苯二甲酸二丁酯（Dibutyl Phtha -late，DBP，99%），鄰苯二甲酸環(huán)己酯（Dicyclohexyl Phthalate，DCP，990%），鄰苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（Bis（2-Ethylhexyl）Phthalate，DEP，990%），購自國藥集團化學(xué)試劑有限公司。

22標(biāo)準(zhǔn)儲備液及標(biāo)準(zhǔn)使用液的制備

準(zhǔn)確稱取DEP，DBP，DCP和DEP各01000g，分別用甲醇溶解定容至100mL的容量瓶中， 配成10000mg/L的單標(biāo)儲備液。再分別移取上述4種單標(biāo)儲備液各000μL， 放置到100mL的容量瓶中， 用甲醇定容， 配制成00mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)使用液， 置于冰箱中4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

23樣品的處理

取00mL水樣于1L的分液漏斗中，加入約2g的NaCl（防止萃取液的乳化），再加入0mL的二氯甲烷，震蕩萃取約1min，靜置分層后，收集萃取液，再在水樣中加入20mL的二氯甲烷，重復(fù)萃取一次?；旌蟽纱蔚妮腿∫?，過無水Na2SO4并轉(zhuǎn)移至氮吹蒸發(fā)濃縮儀專用濃縮瓶中。在濃縮過程中用甲醇進行溶劑置換，在濃縮至約0mL時用甲醇定容至10mL，用04μm的有機相過濾頭過濾，待測。

24色譜分析條件endprint

摘要：建立了液液萃取-高效液相色譜法測定水體中DEP、DBP、DCP和DEP4種內(nèi)分泌干擾素的方法。以二氯甲烷為萃取劑，氮吹蒸發(fā)濃縮后進樣分析。PLC分析條件為：100%甲醇作流動相、流速12mL/min、柱溫3℃、紫外檢測器（224nm）。方法的線性相關(guān)系數(shù)大于0999，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于62%，儀器檢測限分別為0011mg/L、0009mg/L、0016mg/L、0020mg/L，加標(biāo)回收率為841%～99%。實際水樣檢測結(jié)果為河流中4種PAEs總濃度在36～1842μg/L，表明該河流水體受到不同程度的PAEs污染。

關(guān)鍵詞：液液萃取；高效液相色譜；鄰苯二甲酸酯

中圖分類號：O677

文獻標(biāo)識碼：A文章編號：16749944（2014）0802203

[FL（2K2]

1引言

鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)（PAEs）被作為高分子材料助劑而廣泛地應(yīng)用于塑料制品生產(chǎn)中，PAEs是塑料工業(yè)中最為常見的增塑劑，可增加聚合物材料的延展性和柔軟度，改善加工性能[1]，也可用作農(nóng)藥載體、驅(qū)蟲劑、潤滑劑、化妝品、去泡劑和香味品等的生產(chǎn)原料。鄰苯二甲酸酯類環(huán)境激素含有較弱的雌性激素活性成分，在人和動物體內(nèi)起著類似雌性激素的作用，可導(dǎo)致內(nèi)分泌紊亂、生殖機能失常等，具有影響生物體內(nèi)分泌和導(dǎo)致癌細(xì)胞增殖的作用[2] 。PAEs極易遷移進入環(huán)境，且易于吸附難以降解，在大氣、水體、土壤、生物體乃至人體都發(fā)現(xiàn)PAEs化合物的存在[3]，它是一類重要的有機污染物，受到世界各國的普遍重視。美國國家環(huán)保局（EPA）將鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEP）、鄰苯二甲酸二辛酯（DOP）、鄰苯二甲酸丁基芐基酯（BBP）、鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）、鄰苯二甲酸二乙酯（DEP）、鄰苯二甲酸二甲酯（DMP）6種PAEs化合物列為優(yōu)先控制污染物[4]。被列為內(nèi)分泌干擾素的鄰苯二甲酸酯共有8個， 都是作為增塑劑使用， 它們是：DEP、BBP、DBP、DCP（鄰苯二甲酸二環(huán)己酯）、DEP、DNPP（鄰苯二甲酸二正戊酯）、DP（鄰苯二甲酸二己酯）、DPP（鄰苯二甲酸二丙酯）。目前，在對我國的許多河流、湖泊、水源地的研究都發(fā)現(xiàn)PAEs的存在，且某些種類存在超標(biāo)現(xiàn)象[6～8]。本文以被列為內(nèi)分泌干擾素中的4種鄰苯二甲酸酯（DEP、DBP、DCP、DEP）為研究對象，采用液液萃取-高效液相色譜法對某水體中鄰苯二甲酸酯的現(xiàn)狀進行了分析。

2材料與方法

21儀器與試劑

211儀器

高效液相色譜儀：島津Shimadzu LC-20A液相色譜儀，SPD-20A紫外檢測器，Shimadzu ODS-C18色譜柱（20mm×46mm ID，μm）；04μm有機相過濾頭（上海紫一試劑廠）；烘箱（上海意豐電爐有限公司）；氮吹蒸發(fā)濃縮儀（ortex60003，Labech）。

為了避免使用塑料制品造成鄰苯二甲酸酯的污染，實驗過程全部使用玻璃器皿。將玻璃器皿用自來水洗凈， 再分別用蒸餾水、丙酮淋洗后在烘箱中以10℃烘烤3h（其中帶刻度的器具采取風(fēng)吹晾干方式），以降低空白值。

212試劑

甲醇、丙酮、二氯甲烷均為PLC色譜純（國藥集團化學(xué)試劑有限公司）；無水Na2SO4和NaCl為優(yōu)級純，使用前在馬弗爐中以00℃烘烤3h，并轉(zhuǎn)置干燥器中保存?zhèn)溆谩?/p>

213鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

鄰苯二甲酸二乙酯（Diethyl Phthalate，DEP，99%），鄰苯二甲酸二丁酯（Dibutyl Phtha -late，DBP，99%），鄰苯二甲酸環(huán)己酯（Dicyclohexyl Phthalate，DCP，990%），鄰苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（Bis（2-Ethylhexyl）Phthalate，DEP，990%），購自國藥集團化學(xué)試劑有限公司。

22標(biāo)準(zhǔn)儲備液及標(biāo)準(zhǔn)使用液的制備

準(zhǔn)確稱取DEP，DBP，DCP和DEP各01000g，分別用甲醇溶解定容至100mL的容量瓶中， 配成10000mg/L的單標(biāo)儲備液。再分別移取上述4種單標(biāo)儲備液各000μL， 放置到100mL的容量瓶中， 用甲醇定容， 配制成00mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)使用液， 置于冰箱中4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

23樣品的處理

取00mL水樣于1L的分液漏斗中，加入約2g的NaCl（防止萃取液的乳化），再加入0mL的二氯甲烷，震蕩萃取約1min，靜置分層后，收集萃取液，再在水樣中加入20mL的二氯甲烷，重復(fù)萃取一次?；旌蟽纱蔚妮腿∫海^無水Na2SO4并轉(zhuǎn)移至氮吹蒸發(fā)濃縮儀專用濃縮瓶中。在濃縮過程中用甲醇進行溶劑置換，在濃縮至約0mL時用甲醇定容至10mL，用04μm的有機相過濾頭過濾，待測。

24色譜分析條件endprint

摘要：建立了液液萃取-高效液相色譜法測定水體中DEP、DBP、DCP和DEP4種內(nèi)分泌干擾素的方法。以二氯甲烷為萃取劑，氮吹蒸發(fā)濃縮后進樣分析。PLC分析條件為：100%甲醇作流動相、流速12mL/min、柱溫3℃、紫外檢測器（224nm）。方法的線性相關(guān)系數(shù)大于0999，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于62%，儀器檢測限分別為0011mg/L、0009mg/L、0016mg/L、0020mg/L，加標(biāo)回收率為841%～99%。實際水樣檢測結(jié)果為河流中4種PAEs總濃度在36～1842μg/L，表明該河流水體受到不同程度的PAEs污染。

關(guān)鍵詞：液液萃取；高效液相色譜；鄰苯二甲酸酯

中圖分類號：O677

文獻標(biāo)識碼：A文章編號：16749944（2014）0802203

[FL（2K2]

1引言

鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)（PAEs）被作為高分子材料助劑而廣泛地應(yīng)用于塑料制品生產(chǎn)中，PAEs是塑料工業(yè)中最為常見的增塑劑，可增加聚合物材料的延展性和柔軟度，改善加工性能[1]，也可用作農(nóng)藥載體、驅(qū)蟲劑、潤滑劑、化妝品、去泡劑和香味品等的生產(chǎn)原料。鄰苯二甲酸酯類環(huán)境激素含有較弱的雌性激素活性成分，在人和動物體內(nèi)起著類似雌性激素的作用，可導(dǎo)致內(nèi)分泌紊亂、生殖機能失常等，具有影響生物體內(nèi)分泌和導(dǎo)致癌細(xì)胞增殖的作用[2] 。PAEs極易遷移進入環(huán)境，且易于吸附難以降解，在大氣、水體、土壤、生物體乃至人體都發(fā)現(xiàn)PAEs化合物的存在[3]，它是一類重要的有機污染物，受到世界各國的普遍重視。美國國家環(huán)保局（EPA）將鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEP）、鄰苯二甲酸二辛酯（DOP）、鄰苯二甲酸丁基芐基酯（BBP）、鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）、鄰苯二甲酸二乙酯（DEP）、鄰苯二甲酸二甲酯（DMP）6種PAEs化合物列為優(yōu)先控制污染物[4]。被列為內(nèi)分泌干擾素的鄰苯二甲酸酯共有8個， 都是作為增塑劑使用， 它們是：DEP、BBP、DBP、DCP（鄰苯二甲酸二環(huán)己酯）、DEP、DNPP（鄰苯二甲酸二正戊酯）、DP（鄰苯二甲酸二己酯）、DPP（鄰苯二甲酸二丙酯）。目前，在對我國的許多河流、湖泊、水源地的研究都發(fā)現(xiàn)PAEs的存在，且某些種類存在超標(biāo)現(xiàn)象[6～8]。本文以被列為內(nèi)分泌干擾素中的4種鄰苯二甲酸酯（DEP、DBP、DCP、DEP）為研究對象，采用液液萃取-高效液相色譜法對某水體中鄰苯二甲酸酯的現(xiàn)狀進行了分析。

2材料與方法

21儀器與試劑

211儀器

高效液相色譜儀：島津Shimadzu LC-20A液相色譜儀，SPD-20A紫外檢測器，Shimadzu ODS-C18色譜柱（20mm×46mm ID，μm）；04μm有機相過濾頭（上海紫一試劑廠）；烘箱（上海意豐電爐有限公司）；氮吹蒸發(fā)濃縮儀（ortex60003，Labech）。

為了避免使用塑料制品造成鄰苯二甲酸酯的污染，實驗過程全部使用玻璃器皿。將玻璃器皿用自來水洗凈， 再分別用蒸餾水、丙酮淋洗后在烘箱中以10℃烘烤3h（其中帶刻度的器具采取風(fēng)吹晾干方式），以降低空白值。

212試劑

甲醇、丙酮、二氯甲烷均為PLC色譜純（國藥集團化學(xué)試劑有限公司）；無水Na2SO4和NaCl為優(yōu)級純，使用前在馬弗爐中以00℃烘烤3h，并轉(zhuǎn)置干燥器中保存?zhèn)溆谩?/p>

213鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

鄰苯二甲酸二乙酯（Diethyl Phthalate，DEP，99%），鄰苯二甲酸二丁酯（Dibutyl Phtha -late，DBP，99%），鄰苯二甲酸環(huán)己酯（Dicyclohexyl Phthalate，DCP，990%），鄰苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（Bis（2-Ethylhexyl）Phthalate，DEP，990%），購自國藥集團化學(xué)試劑有限公司。

22標(biāo)準(zhǔn)儲備液及標(biāo)準(zhǔn)使用液的制備

準(zhǔn)確稱取DEP，DBP，DCP和DEP各01000g，分別用甲醇溶解定容至100mL的容量瓶中， 配成10000mg/L的單標(biāo)儲備液。再分別移取上述4種單標(biāo)儲備液各000μL， 放置到100mL的容量瓶中， 用甲醇定容， 配制成00mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)使用液， 置于冰箱中4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

23樣品的處理

取00mL水樣于1L的分液漏斗中，加入約2g的NaCl（防止萃取液的乳化），再加入0mL的二氯甲烷，震蕩萃取約1min，靜置分層后，收集萃取液，再在水樣中加入20mL的二氯甲烷，重復(fù)萃取一次。混合兩次的萃取液，過無水Na2SO4并轉(zhuǎn)移至氮吹蒸發(fā)濃縮儀專用濃縮瓶中。在濃縮過程中用甲醇進行溶劑置換，在濃縮至約0mL時用甲醇定容至10mL，用04μm的有機相過濾頭過濾，待測。

24色譜分析條件endprint