正交試驗(yàn)法優(yōu)選復(fù)方麻芥透皮貼的提取工藝

湖南省湘潭市中心醫(yī)院，湖南 湘潭 411100

正交試驗(yàn)法優(yōu)選復(fù)方麻芥透皮貼的提取工藝

王艷平

湖南省湘潭市中心醫(yī)院，湖南 湘潭 411100

目的優(yōu)選復(fù)方麻芥透皮貼的最佳提取工藝。方法采用正交試驗(yàn)，以鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的浸出量及浸膏得率為考察指標(biāo)，用Lq(34)正交表安排實(shí)驗(yàn)，優(yōu)化提取條件。結(jié)果最佳提取工藝為藥材用70%乙醇回流提取3次，溶媒加量分別為8、6、6倍，提取時(shí)間分別為2、1.5、1.5h。結(jié)論優(yōu)化得到的工藝簡(jiǎn)單易行、穩(wěn)定性好。

復(fù)方麻芥透皮貼；提取工藝；鹽酸麻黃堿；鹽酸偽麻黃堿；正交實(shí)驗(yàn)

復(fù)方麻芥透皮貼由麻黃、白芥子、延胡索等組成，具有溫肺祛痰、平喘止咳之功效，臨床用于冷哮緩解期有顯著療效[1]。為優(yōu)選其提取工藝條件，以鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿浸出量、浸膏得率為指標(biāo)，采用正交法優(yōu)選復(fù)方麻芥透皮貼的提取工藝條件，為確定該制劑的提取工藝提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器 DioNEXP680系列高效液相色譜儀(600輸液泵、M32工作站)；AT-330紫外檢測(cè)器；DK-S22型電熱恒溫水浴鍋；766-3型遠(yuǎn)紅外輻射干燥箱(上海陽光實(shí)驗(yàn)儀器有限公司)。

1.2 材料 鹽酸麻黃堿(批號(hào)：171241-20030)、鹽酸偽麻黃堿(批號(hào)：171237-200807)均由中國(guó)生物制品檢定所提供；其余藥材均由湖南天泰和康醫(yī)藥有限公司提供，符合中國(guó)藥典2010年版一部要求。供試品溶液制備均使用分析純?cè)噭桓咝б合嗌V使用色譜純?cè)噭?/p>

2 方法與結(jié)果

2.1 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì) 預(yù)試驗(yàn)表明提取次數(shù)以3次為佳，在此基礎(chǔ)上采用正交試驗(yàn)對(duì)提取工藝條件做進(jìn)一步優(yōu)化。選擇乙醇濃度、乙醇用量、提取時(shí)間作為考察因素，以鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿浸出量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，用L9(34)正交表安排試驗(yàn)，因素水平與正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)見表1、表2。

2.2 提取實(shí)驗(yàn) 依處方比例稱取麻黃、白芥子、延胡索等藥材，共9份，按正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表的安排(見表2)，分別加乙醇回流提取三次，過濾，收集濾液，各份分別用相對(duì)應(yīng)濃度的乙醇定容至500ml，備用。

2.3 鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的含量測(cè)定[2]

2.3.1 色譜條件 色譜柱：CenturySIL C18 -BDS；流動(dòng)相：乙腈-0.1%磷酸(4∶96)；流速：1.0ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：210nm；柱溫：室溫。

表1 正交試驗(yàn)因素水平表

2.3.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取鹽酸麻黃堿10.4mg、鹽酸偽麻黃堿10.2mg，置100ml容量瓶中，加甲醇溶解，并稀釋至刻度，搖勻。精密量取4ml，置10ml量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml含鹽酸麻黃堿41.6μg)。

2.3.3 供試品溶液的制備與測(cè)定[3]精密量取提取液20ml，50-60℃水浴揮干，殘?jiān)眉状既芙猓ㄈ葜?5ml，過濾，精密量取續(xù)濾液2ml，置中性氧化鋁柱(100-200目，2g，內(nèi)徑1cm)上，用50%甲醇洗脫，收集洗脫液約9ml，置10ml容量瓶中，加磷酸1滴，用50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm微孔薄膜濾過，取續(xù)濾液備用。

分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液20μl，注入高效液相色譜儀，測(cè)定鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的含量，并根據(jù)藥材投料量計(jì)算鹽酸鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的浸出量，結(jié)果見表2。

2.4 浸膏得率測(cè)定 精密量取上述提取液25ml，置于已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3h，置干燥器中冷卻30min，迅速精密稱重，計(jì)算浸膏得率，結(jié)果見表2。

表2 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表及結(jié)果

注：*綜合評(píng)分：鹽酸麻黃堿浸出量/最大鹽酸麻黃堿浸出量×0.4×100+鹽酸偽麻黃堿浸出量/最大鹽酸偽麻黃堿浸出量×0.4×100+浸膏得率/最大浸膏得率×0.2 ×100。

2.5 數(shù)據(jù)分析 從表2可知，最佳提取工藝條件為A1B3C3，以綜合評(píng)分為標(biāo)準(zhǔn)，各因素的主次順序?yàn)锳、C、B。表3方差分析結(jié)果表明：因素A、C對(duì)試驗(yàn)結(jié)果有顯著性影響(P<0.05)，因素B的影響無顯著性意義(P>0.05)。考慮到乙醇用量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果無顯著性影響，但加醇量為6、4、4倍時(shí)又不能將藥材完全掩蓋，綜合經(jīng)濟(jì)效益考慮，因此選擇A1B2C3 為最佳提取工藝條件。

2.6 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn) 由于所選方案A1B2C3是正交表中沒有的方案，故尚需做實(shí)驗(yàn)予以驗(yàn)證，以保證提取工藝的重現(xiàn)性和可行性。按處方比例取麻黃、白芥子等藥材，3份，按方案A1B2C3要求的工藝條件及上述的實(shí)驗(yàn)方法制備三批樣品，并測(cè)定鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿浸出量及浸膏得率，結(jié)果見表4，結(jié)論：該工藝穩(wěn)定可行，重現(xiàn)性好。

表3 方差分析表

F0.05(2,2)=19.00,F>0.01(2,2)=99.00

表4 正交驗(yàn)證

3 討論

復(fù)方麻芥透皮貼為我院傳統(tǒng)制劑，原為敷貼散劑，其制備工藝是將藥材粉碎直接配制，我們將麻黃等藥材的有效部位進(jìn)行提取，結(jié)合新型透皮貼膏技術(shù)和新型基質(zhì)材料研制成貼劑。采用2010部中國(guó)藥典中色譜條件[4]測(cè)定麻黃中鹽酸麻黃堿及鹽酸偽麻黃堿的含量分離效果不佳，經(jīng)多次預(yù)實(shí)驗(yàn)，最終選擇文獻(xiàn)[2]中的色譜條件，調(diào)整流動(dòng)相比例為乙腈-0.1%磷酸(4:96)時(shí)分離效果最好。

本試驗(yàn)通過正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)選了復(fù)方麻芥透皮貼的最佳提取工藝件，即麻黃等藥材用70%乙醇提取3次，乙醇用量分別為8、6、6倍，提取時(shí)間分別為2、1.5、1.5h。在最佳實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，按最佳工藝進(jìn)行了驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，結(jié)果證明，該提取工藝穩(wěn)定性好，科學(xué)可行，為以后該制劑的制備工藝提供依據(jù)。

[1]彭農(nóng)建,譚燦燦.麻芥透皮貼劑三伏治療支氣管哮喘202例觀察[J].吉林醫(yī)學(xué)，2011，32(36)：7722.

[2]丘明明.HPLC測(cè)定骨通貼膏中鹽酸麻黃堿的含量及含量均勻度[J].中國(guó)藥師，2010，13(5)：695-696.

[3]喬明,韓建偉,李華.咳喘貼提取工藝研究[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2007，13(8)：8-9.

[4]國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典(一部)[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：300-301.

OpyimizationofExtractionProcessofFufangMajiePlasterswithOrthogonalDesignMethod

WANG Yan-ping

Xiangtan Central Hospital,Xiangtan 411100,China

ObjectiveTo optimize the extraction process Fufang Majie Plasters.MethodsUsing the orthogonal test,the leaching amount and extract Ephedrine Hydroehloride and Pseudoephedrine Hydroehloride rate as the study index,L9(34)orthogonal experiment,optimum extraction conditions.ResultsThe optimum extraction process using 70% ethanol reflux extraction 3 times,solvent amount is respectively 8,6,6 times,extracting time were 2,1.5,1.5h.ConclusionThe optimum extracting process is simple，stable and eficient.

Fufang Majie Plasters;Extraction process;Ephedrine Hhydroehloride;Pseudoephedrine Hydrochloride;Orthogonal design method

王艷平(1983-)，女，主管藥師，主要從事中藥制劑工藝與質(zhì)量控制的研究。E-mail:wangyanping2001@163.com

R284.2

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1007-8517(2014)20-0022-02

2014.07.11)