急性腦出血患者發(fā)病過程中血清炎性因子的變化

馬征 孫雅菲 康玲伶 房銘輝 高燕軍

·論著·

急性腦出血患者發(fā)病過程中血清炎性因子的變化

馬征 孫雅菲 康玲伶 房銘輝 高燕軍

目的探討急性腦出血患者發(fā)病過程中血清炎癥因子的變化。方法選擇80例初發(fā)急性腦出血的患者，采用放射免疫法對(duì)其血清TNF-α和IL-6水平進(jìn)行測定。并且與60例正常健康人對(duì)照組進(jìn)行比較。結(jié)果與對(duì)照組相比，腦出血患者在發(fā)病過程中在不同時(shí)間點(diǎn)，試驗(yàn)組患者血清TNF-α和IL-6水平明顯增高(P<0.05)；腦出血患者血清中TNF-α和IL-6的變化與出血量大小成正相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論TNF-α和IL-6均與腦出血的發(fā)病有關(guān)，可通過對(duì)血清中的TNF-α和IL-6水平的測定來推測腦出血量的大小，進(jìn)而可根據(jù)血清中的TNF-α和IL-6的變化來探討腦出血的臨床治療新方法。

急性腦出血患者；炎性因子；腫瘤壞死因子；IL-6

腦出血指原發(fā)性非外傷性腦實(shí)質(zhì)內(nèi)出血，是一種發(fā)病率、致殘率及病死率都很高的急性腦血管病，至今其治療效果仍不理想[1]。ICH后繼發(fā)性腦水腫是導(dǎo)致神經(jīng)功能惡化的主要原因，其發(fā)生發(fā)展與ICH患者病情密切相關(guān)。隨著研究的不斷深入[2]，炎性因子、自由基損傷及氧化應(yīng)激效應(yīng)與出血性腦血管病的關(guān)系日益引起人們的廣泛關(guān)注。腫瘤壞死因子(TNF-α)由活化的巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞和T細(xì)胞產(chǎn)生[3],是一種多功能細(xì)胞因子。白細(xì)胞介素-6(IL-6)也是一種重要致炎因子，主要由單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生。IL-6在炎癥反應(yīng)和免疫應(yīng)答過程中起到關(guān)鍵作用，它參與炎癥損傷過程，具有刺激細(xì)胞生長、促進(jìn)細(xì)胞分化和加速細(xì)胞急性期蛋白合成的作用，在急性腦出血發(fā)病中具有重要意義[4]。為此，我們測定80例急性腦出血患者血清中的TNF-α和IL-6水平，探討急性腦出血患者發(fā)病過程中血清炎性因子的變化，探討他們與疾病的病程及預(yù)后的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究共分為2組：對(duì)照組與試驗(yàn)組。試驗(yàn)組：初發(fā)急性腦出血患者80例，我院2011年6月至2012年3月收住院患者，均符合第四屆全國腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議修訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]，并經(jīng)顱腦CT證實(shí)；男48例，女32例；年齡44～83歲，平均年齡(62±6)歲。對(duì)照組：正常健康人60例，為同期我院健康體檢人員，該組人員均無腦血管病，無心、肝、腎、血液病、自身免疫性疾病。男37例，女23例；年齡39～85歲，平均年齡(63±6)歲。2組受檢者性別比、年齡方面差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

根據(jù)CT掃描片上血腫的最大直徑和層厚對(duì)患者的血腫大小進(jìn)行計(jì)算。根據(jù)血腫的大小將急性腦出血患者進(jìn)行分組。出血量按多田氏公式(π/6×長×寬×層數(shù))計(jì)算，將其分為：大量腦出血組(LH,出血量>30 ml)18例，中等量腦出血組(MH,出血量10～30 ml)42例，小量腦出血組(SH,出血量<10 ml)30例。

1.2 方法 抽取入院后3、7、14 d時(shí)肘靜脈血，均為清晨采取空腹肘靜脈血5 ml。離心后取上層血清，于-20°冰箱保存。采用放射免疫法測定血清TNF-α、IL-6水平[6]。

1.3 觀察指標(biāo) 血液標(biāo)本用雙抗體夾心ELISA法檢測血清中TNF-α、IL-6含量。具體步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作，酶標(biāo)儀450 nm處測定OD值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣品TNF-α、IL-6含量。

2 結(jié)果

2.1 腦出血患者血清中TNF-α和IL-6變化 與對(duì)照組相比，腦出血患者在發(fā)病過程中在不同時(shí)間點(diǎn)，試驗(yàn)組患者血清TNF-α水平明顯增高(P<0.05)。腦出血患者試驗(yàn)組中，血清TNF-α呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)。與對(duì)照組相比，腦出血患者在發(fā)病過程中在在不同時(shí)間點(diǎn)，試驗(yàn)組患者血清IL-6水平明顯增高(P<0.05)。腦出血患者試驗(yàn)組中，血清IL-6呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)。見表1。

2.2 不同出血量組血清中 TNF-α和IL-6變化 腦出血患者血清中TNF-α和IL-6的變化與出血量大小成正相關(guān)(P<0.05)。見表2。

表1腦出血患者血清中TNF-α和IL-6變化

組別TNF-α3d7d14dIL-63d7d14d對(duì)照組(n=60)21±921±921±912±811±812±8試驗(yàn)組(n=80) 106±22* 40±19*# 21±18*# 79±13* 43±12*# 12±10*#

表2 不同出血量組血清中TNF-α和IL-6變化

表2 不同出血量組血清中TNF-α和IL-6變化

組別TNF-α3d7d14dIL-63d7d14dLH組(n=18)101±1940±1821±1074±1240±1212±10MH組(n=42)105±2041±19*20±16*75±13*43±12*12±10*SH組(n=30) 113±21*41±20* 22±18*79±21*44±13*13±10*

注：與LH組比較，*P<0.05

3 討論

腦出血是腦血管疾病中嚴(yán)重威脅人類健康的常見病，是最難治療的腦卒中之一，在急性腦血管疾病中，腦出血約占10%～20%，全球每年發(fā)患者數(shù)為200萬，占每年新發(fā)腦卒中的10%～15%，可能是由于同期老年人口的增長，腦出血的住院率在過去10年中增加了18%[7]，內(nèi)科保守治療無新的進(jìn)展。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為腦出血后血腫周圍腦組織的繼發(fā)性損傷是導(dǎo)致神經(jīng)功能惡化的主要原因，其中最重要的病理變化是繼發(fā)性腦水腫，目前由于腦CT和MRI的廣泛應(yīng)用，腦出血的臨床診斷并不困難，同時(shí)也能發(fā)現(xiàn)血腫周圍的腦組織水腫。但由于腦出血后腦水腫產(chǎn)生的機(jī)制至今尚未闡明，其形成原因極其復(fù)雜，許多研究表明炎性因子的參與在腦出血后腦水腫的形成過程中起重要作用。炎性反應(yīng)具有吸收血腫、清除壞死組織的作用，但過度炎性反應(yīng)可導(dǎo)致局部腦血流量減少、血腦屏障通透性增加，引起腦水腫和腦組織繼發(fā)損傷[8]。具有免疫活性的細(xì)胞炎性因子是由免疫細(xì)胞產(chǎn)生的小分子的多肽，它們有很高的生物活性，能調(diào)節(jié)和介導(dǎo)免疫反應(yīng)、機(jī)體代謝、炎性反應(yīng)。炎性因子在急性出血性腦血管病中能夠起激活、介導(dǎo)了腦組織的繼發(fā)損傷的作用。相當(dāng)數(shù)量的研究認(rèn)為炎性細(xì)胞因子在腦出血病理生理機(jī)制中有重要作用[9]，其中TNF-α和IL-6都是重要的炎性細(xì)胞因子。TNF-α是最先起作用的前炎性因子，是炎癥反應(yīng)的啟動(dòng)物質(zhì)，具有廣泛的生物活性作用，它可以活化各種炎性細(xì)胞釋放白細(xì)胞介素。TNF-α不僅會(huì)刺激或誘發(fā)多種細(xì)胞因子釋放，而且會(huì)激活白細(xì)胞和血小板產(chǎn)生血小板激活因子等，同時(shí)能激活內(nèi)皮細(xì)胞，使白細(xì)胞粘附因子-I升高,能誘導(dǎo)血管舒張因子增加，使血管通透性增加。TNF-α主要由單核-巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，既是一種具有重要免疫調(diào)節(jié)功能的細(xì)胞因子，也具有廣泛的生物學(xué)功能，同其他細(xì)胞因子共同參與機(jī)體的生長發(fā)育和維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，同時(shí)又介導(dǎo)感染、創(chuàng)傷及免疫應(yīng)答反應(yīng)。TNF-α在體內(nèi)有17 kD分泌狀態(tài)的可溶性的TNF-α(sTNF-α)和26 kD膜相關(guān)的TNF-α(mTNF-α)兩種形式存在，通常把mTNF-α當(dāng)作sTNF-α的前體，在膜金屬蛋白酶的作用下，從膜上裂解，脫落成為sTNF-α。研究表明，兩型TNF-α在受體結(jié)合、生物學(xué)效應(yīng)及其作用機(jī)制等方面各具特礎(chǔ)[10]。IL-6是由212個(gè)氨基酸組成，分子質(zhì)量為26 kD的糖蛋白，是一種具有廣泛免疫調(diào)節(jié)作用的細(xì)胞因子，主要由T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生，在腦組織中產(chǎn)生的細(xì)胞可能是星形細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞[11，12]。IL-6能參與機(jī)體多種組織細(xì)胞的生長、分化和調(diào)節(jié)，在免疫和炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要的作用，是機(jī)體-神經(jīng)-內(nèi)分泌網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)的主要因子。本研究顯示，試驗(yàn)組各時(shí)點(diǎn)血清TNF-α、IL-6水平均高于對(duì)照組，其中發(fā)病后7 d時(shí)，TNF-α達(dá)到高峰，14 d時(shí)開始下降。對(duì)于IL-6，則在發(fā)病后3d時(shí)達(dá)高峰，隨后開始下降。說明TNF-α、IL-6在腦出血后炎性反應(yīng)的發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用。腦出血患者血清IL-6水平明顯高于對(duì)照組，可以推測出單核-巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞處于激活狀態(tài)。進(jìn)一步推測出，患者在腦出血發(fā)生后，出現(xiàn)腦組織壞死現(xiàn)象，使得體內(nèi)相當(dāng)數(shù)量的抗原產(chǎn)生，來刺激免疫系統(tǒng)，進(jìn)而使得相當(dāng)數(shù)量的炎性細(xì)胞浸潤和激活，導(dǎo)致強(qiáng)烈的免疫應(yīng)答過程出現(xiàn)，致使單核-巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞等被激活，從而產(chǎn)生大量的炎性因子，也表明了IL-6參與了腦出血的病理變化過程。同時(shí)，研究結(jié)果也顯示，腦出血患者血清中TNF-α和IL-6的變化與出血量大小成正相關(guān)。由此，可以通過對(duì)血清中的TNF-α和IL-6水平的測定來推測腦出血量的大小。因此，在治療的過程中，可控制IL-6和 TNF-α含量，減少由此而引發(fā)的繼發(fā)性腦損傷。因此，動(dòng)態(tài)監(jiān)測血清炎性因子的變化有利于對(duì)腦出血后腦水腫及腦損傷程度的判斷以及預(yù)后的判定，將開辟ICH的內(nèi)科治療新途徑，對(duì)減輕腦出血后腦損傷的程度及改善患者的預(yù)后有重要的臨床價(jià)值。

1 趙建勇.急性腦出血不同炎癥因子與周圍腦組織水腫的相關(guān)性比較.河北醫(yī)科大學(xué)，2010.6.

2 Elkind MS.Inflammation,atherosclerosis,and stroke.Neurologist,2006,12:140-148.

3 Keigan MP,William JB.Tumor necrosis factor-alpha mediated signaling in neuronal homeostasis and dysfunction.Cellular Signaing,2010,22:977-983.

4 Dziedzie T.Clinical significance of acute phase reaction in stroke patients.Front Biosci,2008,13:2922-2927.

5 中華神經(jīng)科學(xué)會(huì).各類腦血管疾病診斷要點(diǎn).中華神經(jīng)科雜志,1996,29:370-380.

6 盧少軍,陳俊拋,何國軍.急性腦出血并發(fā)全身炎癥反應(yīng)綜合征細(xì)胞因子的研究.中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志,2007,6:697-699.

7 Qureshi Al,Suri MF,Nasar A,et al.Changes in cost and out-come among U S patients with stroke hospitalized in 1990 to 1991 and those hospitalized in 2000 to 2001.Stroke,2007,38:2180-2184.

8 王興池.急性腦出血患者血清ICAM-1和TNF-α水平測定及分析.山東醫(yī)藥,2011,51:66-67.

9 吳浩,張顥.急性期腦出血患者血清白細(xì)胞介素-6水平檢測及臨床意義.臨床醫(yī)學(xué),2011,31:117-118.

10 Baowei S,Jun PW,Wang X.The effects of IL-6 and TNF as molecular adjuvants on immune responses to FMDV and maturation of dendritic cells by DNA vaccination.Vaccine,2008,26:5111-5122.

11 Muraguehi A，Hirano T,Tang B,et al.The essential role of B cell stimulatory factor 2(BSF/IL-6) for the terminal differentiation of B cells.J Exp Med,1988,167:332.

12 沈曉明,馬丹,王興山.腦梗死患者血清白介-6水平變化的臨床意義.臨床神經(jīng)病學(xué)雜志,2002,15:296.

10.3969/j.issn.1002-7386.2014.08.023

067000 河北省承德市，承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科

高燕軍，067000 承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院；

E-mail：yanjungao2009@126.com

R 743.34

A

1002-7386(2014)08-1180-03

2013-12-11)