免疫熒光干式定量法檢測全血CRP的臨床應(yīng)用評估

錢英超 陳麗華

免疫熒光干式定量法檢測全血CRP的臨床應(yīng)用評估

錢英超 陳麗華

目的 評估免疫熒光干式定量法檢測全血C-反應(yīng)蛋白(CRP)的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法 150例住院患者, 采用免疫熒光干式定量法檢測全血CRP, 采用常規(guī)免疫比濁法檢測血清CRP, 檢測結(jié)果用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析。結(jié)果 與常規(guī)免疫比濁法檢測血清比較, 使用免疫熒光干式定量法檢測全血, 兩種方法所得的CRP檢測結(jié)果相符, 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)論 采用免疫熒光干式定量法檢測全血CRP, 具有快速、簡便、結(jié)果可靠等特點(diǎn), 可作為臨床一種快速檢測感染過程和自身免疫疾病的工具。

免疫熒光干式定量法；C-反應(yīng)蛋白；全血

近年來對于CRP的關(guān)注越來越多, 其在感染、心腦血管疾病、糖尿病、代謝綜合征、外周血管疾病等多種疾病中對臨床診斷和治療有較高的應(yīng)用價(jià)值, CRP的檢測方法也在不斷發(fā)展, 常用的有免疫比濁法、免疫單抗法、膠乳凝集法、火箭電泳法等［1］。本院檢驗(yàn)科于2013年8月采購了i-CHROMA Reader免疫熒光分析儀, 使用免疫熒光定量檢測技術(shù), 干化學(xué)層析法快速檢測EDTAK2抗凝全血中的CRP水平。與常規(guī)生化儀上使用的免疫比濁法相比, 方法學(xué)的改變, 省去了分離血清的步驟, 可在3 min內(nèi)得到檢測結(jié)果, 而免疫比濁法的檢測時(shí)間為10 min。本文就以上兩種方法分別對150份EDTAK2抗凝全血標(biāo)本和血清標(biāo)本中的CRP進(jìn)行檢測分析, 探討免疫熒光定量檢測全血CRP的臨床應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機(jī)選擇150例2014年3～5月在本院住院的患者, 同一患者的血液分別使用EDTAK2抗凝真空采血管采集全血, 使用真空促凝管采集新鮮血清。

1.2 儀器和試劑 i-CHROMA Reader免疫熒光分析儀由杭州麗珠醫(yī)療器械有限公司提供, 使用其配套測試卡；HITACHI7600-020全自動生化分析儀由日立公司提供, 所使用CRP試劑由日本和光公司提供；EDTAK2抗凝真空采血管、真空促凝管由廣州陽普公司提供。所用儀器均使用配套的校準(zhǔn)品校準(zhǔn)。

1.3 方法 采用免疫熒光干式定量法檢測全血中的CRP, EDTAK2抗凝真空采血管采集的全血馬上進(jìn)行處理, 使用i-CHROMA Reader免疫熒光分析儀檢測；采用免疫比濁法檢測血清中的CRP, 真空促凝管采集的標(biāo)本1 h內(nèi)分離血清,避免溶血和脂血標(biāo)本, 在HITACHI7600-020全自動生化分析儀上檢測。以上儀器均嚴(yán)格按照儀器操作說明書進(jìn)行操作,所有室內(nèi)質(zhì)控均在控。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( x-±s)表示, 采用t檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

兩種檢測方法檢測的CRP結(jié)果 與常規(guī)免疫比濁法檢測血清比較, 使用免疫熒光干式定量法檢測全血, 兩種方法所得的CRP檢測結(jié)果相符, 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見表1(正常和異常以參考值范圍劃分)。

表1 150例患者使用兩種檢測方法檢測的CRP結(jié)果( x-±s, mg/L)

3 討論

CRP即C-反應(yīng)蛋白(C-reactive protein), 于1930年被發(fā)現(xiàn),是一種能與肺炎球菌C多糖體反應(yīng)形成復(fù)合物的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白, 由肝臟合成, 正常人血清中含量極低, 一般＜10 mg/L。在人體發(fā)生細(xì)菌感染、非特異性疾病和創(chuàng)傷等情況下可以迅速升高到500 mg/L, CRP濃度的測量已經(jīng)被臨床用作一種檢測感染過程和自身免疫疾病的工具, 如細(xì)菌與病毒感染的鑒別診斷可通過CRP升高的程度加以區(qū)分(細(xì)菌性感染時(shí)CRP明顯高于病毒感染)；用于治療監(jiān)測, 連續(xù)監(jiān)測CRP下降水平, 是治療效果滿意的指標(biāo)；類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎時(shí), CRP可高于200 mg/L, 高低與臨床癥狀和治療效果密切相關(guān)［2］。CRP和血清膽固醇一起被認(rèn)為是動脈硬化的一項(xiàng)指標(biāo), 可以作為心血管疾病(如心肌梗死)的診斷指標(biāo), 同時(shí)也是冠狀動脈疾病的一種獨(dú)立的危險(xiǎn)因子［3,4］。

目前, 國內(nèi)大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用于檢測CRP的方法主要是免疫透射比濁法和免疫散射比濁法, 在生化分析儀上, 利用抗原抗體結(jié)合動態(tài)測定血清中的CRP濃度。比濁法容易受到脂血的影響, 當(dāng)抗原或抗體大大過剩時(shí), 可出現(xiàn)可溶性復(fù)合物而造成誤差。免疫熒光干式定量法是基于免疫熒光定量檢測技術(shù)的干化學(xué)層析法：將檢測緩沖液和血液樣本在檢測瓶中進(jìn)行混合, 緩沖液中的熒光標(biāo)記抗CRP抗體和血液中的CRP抗原形成抗原抗體復(fù)合物, 當(dāng)混合樣本被放到反應(yīng)板的樣品上并通過毛細(xì)血管作用擴(kuò)散到硝酸纖維基質(zhì)的測試帶上, 該復(fù)合物被測試帶上的抗CRP抗體所捕獲, 熒光抗體的信號強(qiáng)度反映了被捕獲的CRP數(shù)量, 經(jīng)過i-CHROMA Reader免疫熒光分析儀的處理, 能夠反映出血液樣品中CRP的濃度。在實(shí)際工作中, 免疫熒光干式定量法可直接檢測全血中的CRP水平, 不需要分離血清, 操作簡單, 用血量少(可以采集末梢血), 可用檢測血常規(guī)的標(biāo)本進(jìn)行檢測, 3 min就能得出結(jié)果, 特別適用于急診檢查。本文的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,應(yīng)用免疫熒光干式定量法檢測全血中的CRP含量, 與常規(guī)比濁法檢測血清中的CRP含量相比, 檢測結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05), 可在臨床上廣泛應(yīng)用。

［1］ Pepys MB, Hirschfield GM.C-reactive protein: a critical update.J Clin Invest, 2003, 111(12):1805-1812.

［2］ 黃家財(cái),莫甲光.免疫散射比濁法和化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法檢測C反應(yīng)蛋白的結(jié)果評價(jià).現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生, 2010, 26(15):2284-2285.

［3］ 巫一中.C反應(yīng)蛋白臨床應(yīng)用研究近況.實(shí)用心腦肺血管病雜志, 2010, 18(10):1558-1559.

［4］ 孟秀芹,張善輝.兩種分析儀C反應(yīng)蛋白檢測結(jié)果的比對.中國實(shí)用醫(yī)藥, 2010, 5(34):23-24.

2014-07-10］

528415 南方醫(yī)科大學(xué)附屬小欖人民醫(yī)院檢驗(yàn)科