UF-1000i全自動尿細胞分析儀在尿路感染早期篩查的應用價值

毛穎華

·論著·

UF-1000i全自動尿細胞分析儀在尿路感染早期篩查的應用價值

毛穎華

目的探討Sysmex UF-1000i全自動尿細胞分析儀(簡稱UF-1000i)在尿路感染(UTI)早期診斷的臨床應用價值。方法按照中段尿采集指南操作(按細菌培養(yǎng)要求)收集標本,同時分別做尿細菌培養(yǎng)和UF-1000i細菌數(shù)量檢測,比較兩者結(jié)果。結(jié)果UF-1000i分析儀測定白細胞、細菌的批內(nèi)精密度CV為9.1%、9.2%，符合儀器標準。測定細菌的稀釋線性范圍為23 128個/μl，α=1.0002，r=1.0000，測定白細胞的稀釋線性范圍為7 690個/μl，α=1.0003，r=1.0000。在74例待測標本中，UF-1000i分析儀分析25例標本提示UTI信息，細菌培養(yǎng)有13例標本培養(yǎng)結(jié)果為陽性。其假陽性率21.4%，假陰性率27%，敏感性72.2%，特異性78.5%，陽性預示值52%,陰性預示值89.7%,準確度77.0%。結(jié)論UF-1000i儀器檢測無菌留尿標本檢測尿沉渣中細菌計數(shù)結(jié)果大部分與培養(yǎng)結(jié)果一致,所提示的UTI信息可以作為早期細菌感染的參考指標，起到早發(fā)現(xiàn)早診斷的作用。

全自動尿細胞分析儀；細菌培養(yǎng)；尿路感染

尿路感染(urinary tract infection,UTI) 是泌尿系統(tǒng)的常見疾病之一,發(fā)病率僅次于上呼吸道感染[1]。尿路感染需要依靠對尿中細菌和白細胞的確認來實現(xiàn)，尿細菌培養(yǎng)是診斷尿路感染的金標準,它能確認尿路病原體的種類。然而,這個方法也有一些問題，比如從尿液的采集、接種、培養(yǎng)到出報告需要1周左右,標本的污染和不恰當?shù)拇娣艑е录訇栃越Y(jié)果，不但耗時且費用相對較高，造成人力和醫(yī)療資源的大量浪費。目前臨床急需一種可靠的篩檢方法，篩去大多數(shù)細菌培養(yǎng)結(jié)果預計為陰性的標本，將結(jié)果可能為陽性的標本進一步做定量細菌培。UF-1000i的原理是用紅色半導體激光束照射經(jīng)過核酸熒光染色后在鞘流貫流分析池中形成的鞘流樣本，并通過對從各粒子產(chǎn)生的前方散射光、側(cè)向散射光以及側(cè)向螢光信號轉(zhuǎn)換成的光電信號進行分析，從而對各個粒子進行識別。定量檢測參數(shù)(12項)、五項有機成份結(jié)果，如RBC(紅細胞)、WBC(白細胞)、EC(上皮細胞)、CAST(管型)和BACT(細菌)，并可定量顯示。測定結(jié)果按儀器說明及相關(guān)資料以細菌≥100/μl和白細胞≥10/μl為陽性，顯示UTI信息，報告提示尿路感染可能，以此作為診斷幫助信息。本文通過日本Sysmex公司生產(chǎn)的UF-1000i全自動尿有形成分分析儀對尿中細菌和白細胞的檢測，對74份疑似尿路感染標本進行尿液分析儀檢測和定量細菌培養(yǎng)，和儀器性能分析并將結(jié)果進行比較，探討Sysmex UF-1000i全自動尿細胞分析儀為尿路感染診斷的應用價值，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2011至2012年我院就診患者的清潔中段尿標本74例。

1.2 儀器 (1)Sysmex公司的UF-1000i全自動尿有形成分分析儀。(2)法國生物梅里埃公司VITEK2 compact 全自動微生物分析系統(tǒng)。

1.3 試劑 (1)Sysmex公司提供的UF-1000i全自動尿有形成分分析儀原廠配套進口試劑。UF Ⅱ sheath(鞘液)；UF Ⅱ pack-SED，BAC(沉渣用，細菌用稀釋液)；UF Ⅱ search-SED，BAC(沉渣用，細菌用染色液)。 儲存條件：儲藏溫度為2～35℃，須存儲于干凈閉光環(huán)境中,請勿冰凍。使用期限:在有效期內(nèi)使用，開封后有效期為60 d。注意事項:在15～30℃下使用，打開后避免污染及灰塵和細菌進入；渾濁或變色后不能使用。 (2)法國生物梅里埃公司提供的革蘭陰性桿菌鑒定卡GN；革蘭陽性菌鑒定卡GP；革蘭陰性桿菌藥敏卡AST-GN13；革蘭陽性球菌藥敏卡AST-GP61。

1.4 質(zhì)控物 (1)Sysmex公司提供的質(zhì)控品:UFII CONTROL-H和 UFⅡ CONTROL-L。(2)標準菌株：金黃色葡萄球菌(ATCC25923)，糞腸球菌(ATCC29212)，大腸埃希菌(ATCC25922)，銅綠假單胞菌(ATCC27853)。

1.5 材料 一次性尿杯、試管、乳膠手套、試管架。

1.6 方法

1.6.1 標本留取：按照中段尿采集指南操作[2]，取可疑患者清潔中段尿10 ml置帶蓋的無菌試管中(不用防腐劑),立即送檢(在收集尿液后1 h內(nèi)送至實驗室檢查，超過2 h者應重新送檢)。如果不能及時檢測，應將標本置于4～8℃冰箱內(nèi)保存，并于6 h內(nèi)檢測完畢[3]。

1.6.2 尿液細菌定量培養(yǎng)方法：用1μl定量接種環(huán)取混勻尿液1環(huán)分別劃線接種于血培養(yǎng)基和麥糠凱培養(yǎng)基上，至(35±1)℃培養(yǎng)箱內(nèi)孵育18～24 h，取出做菌落計數(shù)，細菌生長且菌落計數(shù)革蘭陽性球菌≥104cfu/ml或革蘭陰性桿菌≥105cfu/ml時為細菌培養(yǎng)陽性(當有兩種致病菌生長時,選計數(shù)接近或≥104的細菌為陽性統(tǒng)計菌,若有兩種以上雜菌生長則視為污染,重新送檢)[4]，并對陽性標本進一步鑒定到種。

1.6.3 UF-1000i的檢測：開機后，儀器工作前需進行每日質(zhì)控,質(zhì)控通過后方可進行標本檢測。將每日收集的標本充分混勻,由儀器自動進樣，每個標本吸取1 200 μl尿液進行分析，記錄分析數(shù)據(jù)。以細菌≥100/μl和白細胞≥10/μl為陽性，顯示UTI信息，報告提示尿路感染可能。測得的結(jié)果與尿細菌定量培養(yǎng)的結(jié)果進行比較。

1.6.5 尿液分析儀測定白細胞、細菌的稀釋線性評價：取富含細胞的尿樣以正常尿液樣本上清液作1∶1，1∶10，1∶100，1∶1 000，1∶10 000的系列稀釋，以稀釋計算值作為理論值，各稀釋尿樣的實測值與理論值進行回歸統(tǒng)計。

1.7 統(tǒng)計學分析 用Yerushalmy模式評價尿液分析儀對尿路感染篩檢的敏感性、特異性、陽性/陰性預期值、假陽性/假陰性率和準確度。

2 結(jié)果

2.1 儀器性能評價 尿液分析儀測定白細胞、細菌的批內(nèi)精密度CV分別為9.1%、9.2%。見表1。

表1 UF-1000i分析白細胞、細菌的批內(nèi)精密度

2.2 尿液分析儀測定細菌、白細胞的線性分析 細菌線性范圍23 128個/μl，α=1.0002，r=1.0000；白細胞線性范圍7 690個/μl,α=1.003，r=1.0000。見表2、3，圖1、2。

表2 UF-1000i分析細菌稀釋線性

注：細菌線性范圍23 128個/μl,α=1.0002,r=1.0000

表3 UF-1000i分析白細胞稀釋線性

注：白細胞線性范圍7690個/μl,a=1.0003,r=1.0000

圖1 UF-1000i分析白細胞稀釋線性圖 圖2 UF-1000i分析細菌稀釋線性圖

2.3 UF-1000i分析結(jié)果與細菌培養(yǎng)比較 UF-1000i測定結(jié)果按儀器說明及相關(guān)資料以細菌≥100/μl和白細胞≥10 /μl為陽性，顯示UTI信息，報告提示尿路感染可能。假陽性率21.4%，假陰性率27%，敏感性72.2%，特異性78.5%，陽性預示值52%,陰性預示值89.7%,準確度77.0%。見表4。

表4 UF-1000i分析結(jié)果與細菌培養(yǎng)比較 例

3 討論

UF-1000i全自動尿細胞分析儀是UF系列的最新產(chǎn)品，使用流式細胞計數(shù)法(FCM)技術(shù)來獲得尿細胞前向散射光及前向熒光的強度參數(shù)。在對細胞中的特定物質(zhì)進行熒光染色并調(diào)節(jié)到懸浮狀后，使用鞘液包圍此物質(zhì)然后通過噴嘴以單柱形式噴出。此時每個尿細胞都將暴露在高度密集的激光束照射之下。單個細胞會按不同角度發(fā)出熒光和散射光。系統(tǒng)將對這些電信號進行分析，為各尿細胞按照熒光強度生成一維直方圖，并按照熒光強度和散射光強度生成二維散點圖。儀器可得研究參數(shù)信息(3項)中UTI信息可作尿路感染致病菌初篩。本文表1顯示UF-1000i分析儀測定白細胞、細菌的批內(nèi)精密度CV為9.1%、9.2%。儀器標定CV范圍為WBC≤10%,BACT≤20%，符合儀器標準。圖1顯示UF-1000i尿液分析儀測定細菌的稀釋線性范圍為23 128個/μl，α=1.0002，r=1.0000。圖2顯示UF-1000i分析儀測定白細胞的稀釋線性范圍為7 690個/μl，α=1.0003，r=1.0000。表3顯示在74例待測標本中，顯示UF-1000i分析儀分析25例標本提示UTI信息，細菌培養(yǎng)有13例標本培養(yǎng)結(jié)果為陽性。假陽性率21.4%，假陰性率27%，敏感性72.2%，特異性78.5%，陽性預示值52%,陰性預示值89.7%,準確度77.0%。測定結(jié)果按儀器說明及相關(guān)資料以細菌≥100/μl和白細胞≥10/μl為陽性，顯示UTI信息，報告提示尿路感染可能，所以能夠為尿路感染粗篩和UTI藥效評定標準的評定提供有用的診斷支持信息，指導臨床第一時間經(jīng)驗用藥。泌尿系統(tǒng)炎癥時均可見到尿中白細胞增多,尤其在細菌感染時尿內(nèi)細菌數(shù)量增加，伴隨尿內(nèi)白細胞數(shù)量的增加是診斷尿路感染的主要依據(jù)。據(jù)報道，UF-1000i在細菌檢測方面作了很大的改進，配置專用的細菌分析通道，克服了UF-100對細菌檢測的諸多影響因素[5]。操作簡便，快捷，在一定范圍里對白細胞和細菌的定量連續(xù)現(xiàn)象彌補了尿十聯(lián)之不足,為臨床提供更多更確切信息。可高精度檢測出約5×103個/ml(5個/μl)以上尿中細菌的能力，當儀器提示為UTI陽性時再做尿液細菌培養(yǎng)還可以減少不必要的培養(yǎng)和時間，達到快速診斷、簡便、經(jīng)濟的目的。但鑒于它存在一定的假陽性和假陰性，如要確診泌尿道是否有細菌感染以及感染細菌的種類及藥敏結(jié)果則必須作細菌培養(yǎng)。

1 鐘雪萍，劉靜，黃鳳珍，尿常規(guī)亞硝酸鹽測定與尿沉渣細菌計數(shù)對尿路感染的篩查.醫(yī)學信息，2011,24：206.

2 王羽,張宗久,趙明剛，等主編.全國臨床檢驗操作規(guī)程.第3版.南京：東南大學出版社,2006.743.

3 叢玉隆.尿液沉渣檢查標準化的建議.中華檢驗醫(yī)學雜志,2002,25:249-250.

4 湯均.UF-100流式尿沉渣分析儀在篩選老年糖尿病尿路感染中的應用.實用醫(yī)技雜志,2007,14:4581-4582.

5 秦桂娥，靳巖.UF-100尿沉渣分析儀影響因素探討.國際檢驗醫(yī)學雜志，2006,27：935-937.

10.3969/j.issn.1002-7386.2014.14.027

215009 江蘇省蘇州市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科

R 446.12

A

1002-7386(2014)14-2140-03

2013-12-03)