劉煒
[摘要] 目的 評價國產和進口微柱凝膠卡鑒定嬰幼兒ABO及RhD血型的應用效果。 方法 分別采用國產微柱凝膠血型鑒定卡和進口血型鑒定卡對早產兒、足月新生兒、血液病患兒及其他患兒進行A抗原、B抗原以及D抗原鑒定,比較兩種方法的符合情況以及凝集強度。 結果 國產微柱凝膠血型鑒定卡與進口血型鑒定卡對嬰幼兒ABO和RhD血型鑒定結果差異無統計學意義(P>0.05)。結論 國產微柱凝膠卡鑒定結果與進口微柱凝膠卡相似,并且費用更低,值得臨床推廣使用。
[關鍵詞] 國產; 進口;微柱凝膠卡;ABO;RhD
[中圖分類號] R446.6 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701(2014)22-0142-03
[Abstract] Objective To evaluate application of domestic and import micro column gel card in infant ABO and RhD blood types. Methods ABO and RhD blood types of premature, full-term newborns, blood diseases infants and infants with other diseases were detected by domestic and import micro column gel card. Consistency and agglutination intensity were analyzed. Results Domestic and import micro column gel card in infant ABO and RhD blood type showed no significant difference(P>0.05). Conclusion Detection of domestic micro column gel card in infant ABO and RhD blood types shows similar results with import micro column gel card, with less cost, worthy of clinical application.
[Key words] Domestic; Import; Micro column gel card; ABO; RhD
微柱凝膠卡是目前臨床上用于鑒定ABO血型和RhD血型的主要方法,但臨床上主要還是使用進口的微柱凝膠卡進行鑒定[1,2]。隨著國產微柱凝膠卡技術的發展,生產工藝的改進,國產微柱凝膠卡也逐漸在臨床檢驗中占據一席之地。本研究通過對比分析國產微柱凝膠卡和進口微柱凝膠卡在鑒定嬰幼兒ABO血型和RhD血型的效果,探討兩種鑒定卡鑒定結果的一致性和存在的差異。現報道如下。
1資料與方法
1.1 一般資料
選擇2013年1~12月在我院住院的3歲以下患兒8 944例,其中男5 351例,女3 593例?!?個月齡者2 142例,其中早產兒53例,足月新生兒195例,需要化療或者反復輸血者311例,其他疾病患兒1 583例。7個月~3歲患兒6 802例。
1.2檢測方法
將被測血標本用生理鹽水配制成5%的紅細胞懸液,采用國產微柱凝膠卡初步鑒定抗凝血標本A抗原、B抗原和D抗原,所有操作嚴格按照說明書進行,卡式離心機為廠商配套階梯式離心機。另將被檢測血標本采用低離子介質配制成5%的紅細胞懸液,采用進口微柱凝膠血型鑒定卡對A抗原、B抗原、D抗原進行復核,所有操作嚴格按照說明書進行,離心機為廠商提供的配套的離心機。凝集強度判定:強凝集:+++~++++,弱凝集:+~++。
1.3統計學方法
采用SPSS15.0統計學軟件進行分析,計數資料采用χ2檢驗,P<0.05為差異有統計學意義。
2結果
2.1兩種方法對不同組A抗原凝集強度鑒定結果
兩種方法對不同A抗原凝集強度鑒定結果比較,差異無統計意義(P>0.05)。見表1。
2.2兩種方法對不同組B抗原凝集強度鑒定結果
兩種方法對不同B抗原凝集強度鑒定結果比較,差異無統計意義(P>0.05)。見表2。
2.3兩種方法對不同組RhD抗原凝集強度鑒定結果
兩種方法對不同RhD抗原凝集強度鑒定結果比較,差異無統計學意義(P>0.05)。見表3。
3討論
維也納大學的Karl Landsteiner于1900年發現了人類紅細胞的同種凝集現象,隨后發現了人類第1個血型系——ABO血型系。A抗原和B抗原的構成受控于H座位基因和ABO座位基因。H基因編碼巖藻糖轉移酶,形成H抗原,A基因和B基因編碼糖基轉移酶分別產生A抗原和B抗原。O基因是無效基因。ABO抗原在胚胎早期產生,2~4歲發育完成。在出生時ABO抗體沒有產生,或者產生較弱,3個月時反應和成年人一樣,5~10歲時抗體產生達到高峰,老年時抗體水平較年輕人低。A型血指紅細胞上有A抗原,血清中有抗B抗體,B血型為紅細胞上有B抗原,血清中有抗A抗體,AB型為紅細胞上有A抗原和B抗原,血清中沒有抗A抗體和抗B抗體,O型血為紅細胞上無A抗原和B抗原,血清中有抗A抗體和抗B抗體。Landsteiner原則指只有在ABO血型系統紅細胞缺乏某抗原的血清中一定預計地含有該抗原的抗體[3]。ABO鑒定的原理是根據ABO血型的分型原則及其獨特的特質,利用凝集試驗技術通過紅細胞定型和血清定型兩組試驗并核對結果,從而鑒定ABO血型。對新生兒ABO血型的鑒定紅細胞定型常常反應較弱,而血清定型不可靠。ABO血型鑒定的方法主要有玻片法、試管法、凝膠法。endprint
Rh血型Rh是恒河猴(Rhesus Macacus)外文名稱的頭兩個字母。蘭德斯坦納等科學家在1940年做動物實驗時,發現恒河猴和多數人體內的紅細胞上存在Rh血型的抗原物質,故而命名[4]。凡是人體血液紅細胞上有Rh凝集原者,為Rh陽性,反之為陰性。這樣就使已發現的紅細胞A、B、O及AB四種主要血型的人,又都分別被劃分為Rh陽性和陰性兩種。隨著對Rh血型的不斷研究,認為Rh血型系統可能是紅細胞血型中最為復雜的一個血型系統。Rh血型的發現,對更加科學地指導輸血工作和進一步提高新生兒溶血病的實驗診斷和維護母嬰健康都有非常重要的作用。Rh血型鑒定一般指Rh系統中D抗原的檢測,根據患者紅細胞是否帶有D抗原分為Rh陽性和Rh陰性。
微柱凝膠法由Lpierre博士于1986年發明,用于檢測紅細胞抗原抗體反應,具有操作簡單、結果直觀、容易標準化等優點,并且能夠自動化檢測,因此在臨床上迅速得到推廣應用[5-8]。微柱凝膠卡法目前被廣泛應用于血型鑒定、不規則抗體篩選、交叉配合、鑒定及直接或間接抗人球白實驗中的檢驗方法,其原理是通過在微柱中加入凝膠,紅細胞膜抗原與相應的抗體在凝膠介質中發生免疫反應,利用凝膠的分子篩作用,通過調節凝膠孔徑,只允許紅細胞通過,而紅細胞的凝塊不能通過,利用重力的作用將凝集紅細胞和游離紅細胞分離[9,10]。1994 年微柱凝膠技術獲得美國 FDA批準為免疫學檢測技術,歐美等發達國家已經將微柱凝膠技術作為常規性的檢測技術而在臨床廣泛推廣。微柱凝膠技術的核心技術是凝膠分子篩,凝膠分子之間存在的間隙排阻能夠將發生凝集反應的紅細胞阻滯在凝膠內,而未發生凝集的單個紅細胞則可以穿過微孔運動到達柱底,從而辨別是否存在凝集反應。紅細胞與抗體發生凝集時,紅細胞聚集分布在凝膠的上部或凝膠中,則判斷存在凝集,為陽性,未發生凝集反應的紅細胞則沉積于管底,則判斷無凝集反應,為陰性。微柱凝膠卡有較高的靈敏度和特異性,尤其是檢測規則抗體時,對反定型弱凝集也具有不錯的優勢。微柱凝集卡倒置會導致分子膠及上層黏液層發生變化,凝膠空隙發生不規則變化,會在血型鑒定過程中出現假陽性結果,因此在運輸、儲存微柱凝膠卡時應嚴禁劇烈的顛簸以及倒置,對于已經發生倒置的微柱凝膠卡,通過離心的方法可以恢復[11,12]。有研究比較微柱凝膠卡與傳統方法對的抗球蛋白的篩選以及不規則抗體的檢測,認為柱凝膠法具有對抗體敏感性高的優點,并且反應結果容易判讀,在操作過程中采用微柱凝膠法對間接抗人球蛋白進行試驗時可以不同進行洗滌紅細胞的步驟,傳統抗球蛋白試驗需要加入質控細胞,但是微柱凝膠法不用,其還可以檢出傳統方法不能檢測出的抗體,微柱凝膠法更容易自動化、標準化。微柱凝膠技術屬于微試管柱凝集技術,該技術國外已經成為紅細胞血型血清學檢測的常規方法。國內的微柱凝集技術主要是凝膠凝集技術、玻璃珠柱凝集技術以及國產Bioxnn微柱凝膠免疫檢測試劑卡等[13,14]。
目前進口微柱凝膠卡在臨床檢驗中應用較廣,但是費用相對較高。隨著我國國產微柱凝膠卡生產技術的改進,其在臨床上的應用也逐漸推廣。本研究主要采用兩種微柱凝膠卡對嬰幼兒ABO和RhD血型的鑒定。結果顯示,兩種方法對不同年齡段以及6個月以下不同病因的患者鑒定結果比較差異無統計學意義。凝集效應為弱凝集的患兒多為早產兒。除了早產兒,兩種方法ABO血型鑒定中達到強凝集的比例均超過了95%,而RhD血型鑒定中,除了早產兒和少量足月新生兒為弱凝集,其他均為強凝集,也說明RhD抗原在出生時基本已發育完成。
綜上所述,微柱凝膠卡在嬰幼兒ABO和RhD血型鑒定中具有操作簡便、結果直觀等優點,而國產微柱凝膠卡鑒定結果與進口微柱凝膠卡沒有顯著差異,并且費用更低,值得臨床推廣使用。
[參考文獻]
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[6] 閆朝春,蔣玲,陳麗梅,等.導致微柱凝膠卡式交叉配血試驗假陽性結果的原因分析[J]. 國際檢驗醫學雜志,2011,32(15): 1737-1738.
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[10] 周安祥,王思麗,張默吟. 微柱凝膠卡式血型鑒定的干擾因素分析及處理[J]. 吉林醫學,2012,33(23): 5044-5045.
[11] 陳維佳,王冬倩,童軍. 微柱凝膠免疫實驗技術基礎[M]//李勇,馬學嚴.實用免疫血液學[M]. 第2版.西安:科學出版社,2006:562-570.
[12] 趙祥勝. 柱凝聚技術檢測孕婦血清IgG抗體水平[J]. 臨床輸血與檢驗,2000,2(3):32-33.
[13] 吳定昌,江慧. 微柱凝膠法檢測201例孕婦ABO血結果分析[J]. 江西醫學檢驗,2007,25(1):82,91.
[14] 武建. 柱凝集技術的臨床應用及其實驗研究現狀[J]. 中國輸血雜志,2003,16(5):369-370.
(收稿日期:2014-04-08)endprint
Rh血型Rh是恒河猴(Rhesus Macacus)外文名稱的頭兩個字母。蘭德斯坦納等科學家在1940年做動物實驗時,發現恒河猴和多數人體內的紅細胞上存在Rh血型的抗原物質,故而命名[4]。凡是人體血液紅細胞上有Rh凝集原者,為Rh陽性,反之為陰性。這樣就使已發現的紅細胞A、B、O及AB四種主要血型的人,又都分別被劃分為Rh陽性和陰性兩種。隨著對Rh血型的不斷研究,認為Rh血型系統可能是紅細胞血型中最為復雜的一個血型系統。Rh血型的發現,對更加科學地指導輸血工作和進一步提高新生兒溶血病的實驗診斷和維護母嬰健康都有非常重要的作用。Rh血型鑒定一般指Rh系統中D抗原的檢測,根據患者紅細胞是否帶有D抗原分為Rh陽性和Rh陰性。
微柱凝膠法由Lpierre博士于1986年發明,用于檢測紅細胞抗原抗體反應,具有操作簡單、結果直觀、容易標準化等優點,并且能夠自動化檢測,因此在臨床上迅速得到推廣應用[5-8]。微柱凝膠卡法目前被廣泛應用于血型鑒定、不規則抗體篩選、交叉配合、鑒定及直接或間接抗人球白實驗中的檢驗方法,其原理是通過在微柱中加入凝膠,紅細胞膜抗原與相應的抗體在凝膠介質中發生免疫反應,利用凝膠的分子篩作用,通過調節凝膠孔徑,只允許紅細胞通過,而紅細胞的凝塊不能通過,利用重力的作用將凝集紅細胞和游離紅細胞分離[9,10]。1994 年微柱凝膠技術獲得美國 FDA批準為免疫學檢測技術,歐美等發達國家已經將微柱凝膠技術作為常規性的檢測技術而在臨床廣泛推廣。微柱凝膠技術的核心技術是凝膠分子篩,凝膠分子之間存在的間隙排阻能夠將發生凝集反應的紅細胞阻滯在凝膠內,而未發生凝集的單個紅細胞則可以穿過微孔運動到達柱底,從而辨別是否存在凝集反應。紅細胞與抗體發生凝集時,紅細胞聚集分布在凝膠的上部或凝膠中,則判斷存在凝集,為陽性,未發生凝集反應的紅細胞則沉積于管底,則判斷無凝集反應,為陰性。微柱凝膠卡有較高的靈敏度和特異性,尤其是檢測規則抗體時,對反定型弱凝集也具有不錯的優勢。微柱凝集卡倒置會導致分子膠及上層黏液層發生變化,凝膠空隙發生不規則變化,會在血型鑒定過程中出現假陽性結果,因此在運輸、儲存微柱凝膠卡時應嚴禁劇烈的顛簸以及倒置,對于已經發生倒置的微柱凝膠卡,通過離心的方法可以恢復[11,12]。有研究比較微柱凝膠卡與傳統方法對的抗球蛋白的篩選以及不規則抗體的檢測,認為柱凝膠法具有對抗體敏感性高的優點,并且反應結果容易判讀,在操作過程中采用微柱凝膠法對間接抗人球蛋白進行試驗時可以不同進行洗滌紅細胞的步驟,傳統抗球蛋白試驗需要加入質控細胞,但是微柱凝膠法不用,其還可以檢出傳統方法不能檢測出的抗體,微柱凝膠法更容易自動化、標準化。微柱凝膠技術屬于微試管柱凝集技術,該技術國外已經成為紅細胞血型血清學檢測的常規方法。國內的微柱凝集技術主要是凝膠凝集技術、玻璃珠柱凝集技術以及國產Bioxnn微柱凝膠免疫檢測試劑卡等[13,14]。
目前進口微柱凝膠卡在臨床檢驗中應用較廣,但是費用相對較高。隨著我國國產微柱凝膠卡生產技術的改進,其在臨床上的應用也逐漸推廣。本研究主要采用兩種微柱凝膠卡對嬰幼兒ABO和RhD血型的鑒定。結果顯示,兩種方法對不同年齡段以及6個月以下不同病因的患者鑒定結果比較差異無統計學意義。凝集效應為弱凝集的患兒多為早產兒。除了早產兒,兩種方法ABO血型鑒定中達到強凝集的比例均超過了95%,而RhD血型鑒定中,除了早產兒和少量足月新生兒為弱凝集,其他均為強凝集,也說明RhD抗原在出生時基本已發育完成。
綜上所述,微柱凝膠卡在嬰幼兒ABO和RhD血型鑒定中具有操作簡便、結果直觀等優點,而國產微柱凝膠卡鑒定結果與進口微柱凝膠卡沒有顯著差異,并且費用更低,值得臨床推廣使用。
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微柱凝膠法由Lpierre博士于1986年發明,用于檢測紅細胞抗原抗體反應,具有操作簡單、結果直觀、容易標準化等優點,并且能夠自動化檢測,因此在臨床上迅速得到推廣應用[5-8]。微柱凝膠卡法目前被廣泛應用于血型鑒定、不規則抗體篩選、交叉配合、鑒定及直接或間接抗人球白實驗中的檢驗方法,其原理是通過在微柱中加入凝膠,紅細胞膜抗原與相應的抗體在凝膠介質中發生免疫反應,利用凝膠的分子篩作用,通過調節凝膠孔徑,只允許紅細胞通過,而紅細胞的凝塊不能通過,利用重力的作用將凝集紅細胞和游離紅細胞分離[9,10]。1994 年微柱凝膠技術獲得美國 FDA批準為免疫學檢測技術,歐美等發達國家已經將微柱凝膠技術作為常規性的檢測技術而在臨床廣泛推廣。微柱凝膠技術的核心技術是凝膠分子篩,凝膠分子之間存在的間隙排阻能夠將發生凝集反應的紅細胞阻滯在凝膠內,而未發生凝集的單個紅細胞則可以穿過微孔運動到達柱底,從而辨別是否存在凝集反應。紅細胞與抗體發生凝集時,紅細胞聚集分布在凝膠的上部或凝膠中,則判斷存在凝集,為陽性,未發生凝集反應的紅細胞則沉積于管底,則判斷無凝集反應,為陰性。微柱凝膠卡有較高的靈敏度和特異性,尤其是檢測規則抗體時,對反定型弱凝集也具有不錯的優勢。微柱凝集卡倒置會導致分子膠及上層黏液層發生變化,凝膠空隙發生不規則變化,會在血型鑒定過程中出現假陽性結果,因此在運輸、儲存微柱凝膠卡時應嚴禁劇烈的顛簸以及倒置,對于已經發生倒置的微柱凝膠卡,通過離心的方法可以恢復[11,12]。有研究比較微柱凝膠卡與傳統方法對的抗球蛋白的篩選以及不規則抗體的檢測,認為柱凝膠法具有對抗體敏感性高的優點,并且反應結果容易判讀,在操作過程中采用微柱凝膠法對間接抗人球蛋白進行試驗時可以不同進行洗滌紅細胞的步驟,傳統抗球蛋白試驗需要加入質控細胞,但是微柱凝膠法不用,其還可以檢出傳統方法不能檢測出的抗體,微柱凝膠法更容易自動化、標準化。微柱凝膠技術屬于微試管柱凝集技術,該技術國外已經成為紅細胞血型血清學檢測的常規方法。國內的微柱凝集技術主要是凝膠凝集技術、玻璃珠柱凝集技術以及國產Bioxnn微柱凝膠免疫檢測試劑卡等[13,14]。
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綜上所述,微柱凝膠卡在嬰幼兒ABO和RhD血型鑒定中具有操作簡便、結果直觀等優點,而國產微柱凝膠卡鑒定結果與進口微柱凝膠卡沒有顯著差異,并且費用更低,值得臨床推廣使用。
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