106例自身免疫性疾病患者的血清抗核抗體和自身抗體檢測結果分析

謝 璟，張小蓮，李 健

(宜春市人民醫院 檢驗科，江西 宜春336000)

自身免疫性疾病(AID)是一類發病原因復雜，臨床表現多樣，嚴重危害人類健康的疾病之一。常累及多器官、多系統、反復發作和慢性遷延。泛指機體免疫效應細胞或免疫效應分子針對自身組織或細胞產生病理性免疫應答反應，由自身免疫反應參與發病機制，導致組織損傷或功能障礙的疾病。近年來，隨著對自身免疫性疾病的深入研究，醫院已廣泛開展了抗核抗體(ANA)和自身抗體的檢測。其中ANA主要用于對自身免疫性疾病的篩查，而自身抗體則主要針對于自身免疫性疾病診斷和鑒別。

1 材料與方法

1.1材料來源1859例患者均來自我院風濕免疫科、腎內科住院及門診。時間為2010年9月-2013年2月，其中男性652例，女性1207例，年齡為14-79歲，平均年齡為48歲。其中非自身免疫性疾病1753例，符合美國風濕病學會(ACR)診斷標準的AID患者106例，其中系統性紅斑狼瘡(SLE)49例，干燥綜合征(SS)17例，系統性硬皮病(SSc)3例，肌炎/皮肌炎(PM/DM)2例，混合性結締組織病(MCTD)13例，類風濕性關節炎(RA)22例。

1.2試劑和儀器ANA與自身抗體的檢測試劑盒均購自于德國歐蒙公司。熒光顯微鏡為日本尼康公司生產。

1.3方法ANA采用間接免疫熒光法(IIF)，用PBS緩沖液作1∶100稀釋的血清與抗原基質片反應30 min，浸泡5 min，加入熒光標記的二抗避光室溫溫育30 min，浸泡5 min，加甘油封片后熒光顯微鏡下判讀結果。自身抗體采用歐蒙印跡法，1∶100稀釋的患者血清1.5 ml與膜條上的靶抗原反應30 min，洗滌3次(5 min/次)，加入1.5 ml酶標記的抗人IgG(酶結合物)反應30 min，洗滌3次(5 min/次)，加入底物液反應15 min，蒸餾水清洗膜條終止反應。均嚴格按照試劑說明書進行操作。

2 結果

2.1 106例AID患者中，各疾病組的ANA熒光模式分析結果見表1。

2.2 106例AID患者血清中自身抗體檢測結果見表2。

3 討論

近年來，隨著對AID認識的提高，加之臨床經驗的積累和實驗室診斷技術的進步，AID發病率明顯上升，其總體發病率占世界人口的3%-5%[1]。

表1 106例AID患者ANA熒光模式分析

表2 106例AID患者血清中自身抗體檢測結果比較[n(%)]

ANA泛指各種核成分的抗體，是一種廣泛存在的自身抗體，可以與不同來源的細胞核起反應，無器官和種屬特異性[2]。多種風濕性疾病可出現陽性，正常人中，特別是老年人常表現低滴度陽性，在SLE、SS、SSc、PM/DM、RA等AID中陽性率較高[3]，自身抗體是自身免疫性疾病患者血循環中針對自身組織器官、細胞及細胞內成分產生的抗體，與自身組織成分的抗原決定簇發生反應，通過各種途徑造成自身免疫損傷。

本結果顯示，所有自身免疫性疾病患者的ANA均為陽性，熒光模型主要以核均質型和顆粒型為主。49例SLE患者自身抗體陽性率抗nRNP/sm抗體為26.5%，抗SS-A抗體為32.7%，抗SS-B抗體為22.4%，抗dsDNA抗體為55.1%，抗Sm抗體為49.0%。17例SS患者自身抗體陽性率抗SS-A抗體為100.0%，抗SS-B抗體為88.2%。3例SSc患者自身抗體陽性率抗Scl-70抗體100.0%。2例PM/DM患者自身抗體陽性率抗Jo-1抗體100.0%。13例MCTD患者自身抗體陽性率抗nRNP/sm抗體為69.2%，抗SS-A抗體為84.6%，抗SS-B抗體為61.5%，抗dsDNA抗體為7.8%。22例RA患者自身抗體陽性率抗nRNP/sm抗體為27.3%，抗SS-A抗體為45.5%，抗SS-B抗體為18.2%，抗dsDNA抗體為9.1%，抗Sm抗體為4.5%。抗SS-A抗體和抗SS-B抗體陽性時，ANA熒光模型主要為顆粒型其他模型如均質型、胞漿型占比例也較高，與其他研究報道一致[4]。抗nRNP/sm抗體、抗Sm抗體陽性時，ANA熒光模型也主要集中在顆粒型，且在抗原基質中反應強度一致[5]。抗Scl-70抗體陽性時，ANA熒光模型主要為核仁型，次為著絲點型。抗dsDNA抗體陽性時，ANA熒光模型主要為均質型，是SLE患者的標志性抗體。抗nRNP/sm抗體是MCTD的標志性抗體，抗SS-A抗體、抗SS-B抗體是SS的標記性抗體，抗Scl-70抗體見于SSc，抗Jo-1抗體見于PM/DM[6]。

在檢測ANA的基礎上，有必要進行自身抗體的檢測和分析，有益于自身免疫性疾病的鑒別診斷、診斷分型和療效觀察。臨床應對需要通過檢測ANA來排除AID患者的標本同時進行ANA篩查和自身抗體的檢測，以避免使用一種方法檢測導致的AID患者漏診。對于臨床疑似AID患者，應無論ANA初篩試驗陰性與否，均需進行各種針對特異性抗體和確認試驗檢測。ANA與自身抗體聯合檢測，結合臨床綜合分析，對自身免疫性疾病的診斷具有重要意義。

參考文獻：

[1]李永哲.自身抗體檢測技術臨床推廣應用和質量保證工作中應用重視的問題[J].中華檢驗醫學雜志，2006,29(9):769.

[2]Ardoin S P,Pisetsky D S.Developments in the scientific understanding of lupus[J].Arthr Res & Ther,2008,10(5):218.

[3]王國麗，王有為，肖莎麗，等.614例系統性紅斑狼瘡自身抗體檢測結果分析[J].中國中西醫結合皮膚性病學雜志，2005,3(1):46.

[4]黃雪梅，蒲澤晏，劉方久.ANA、ENA、dsDNA抗體在自身免疫性疾病中的敏感性及相關性分析[J].西部醫學，2010,22(3):534.

[5]馬東來，張少靜，文夫瑞德·斯特克.自身抗體及其免疫熒光模式[M].北京：北京科學技術出版社，2000.

[6]李本忠，光 輝，陳家東.抗核抗體譜在自身免疫性疾病中的臨床應用[J].分子診斷與治療雜志，2010，2(4):260.